细胞凋亡相关基因Bcl-2及Bax在骨肉瘤中的表达

细胞凋亡(apoptosis)是一种普遍发生的生物学现象,为维持机体内环境稳定所必须,与细胞分裂增殖相辅相成共同参与了机体生理和病理过程.现代肿瘤学理论认为,在肿瘤发生过程中,不但有细胞的异常分裂增殖因素,而且还有细胞的凋亡因素.Bc1-2及Bax均为细胞凋亡相关基因,其在骨肉瘤中的表达尚未见报道,而骨肉瘤又是最常见的恶性骨肿瘤,多发于青少年,预后差.单凭组织形态变化不能准确评估骨肉瘤的预后,我们对51例不同临床行为骨肉瘤中Bcl-2及Bax的表达进行初步研究,并探讨骨肉瘤细胞凋亡现象与预后的关系.     

依折麦布对高脂血症并肝损患者的疗效和安全性观察

目的观察依折麦布对危险评估为高危的高脂血症并肝损患者的疗效和安全性。方法肝损的高胆固醇血症30例和混合型高脂血症35例予依折麦布治疗,观察治疗后血脂变化、肝毒性和肌毒性。结果治疗后第4、8周的肝功能和CK均未升高。两组治疗8周后血LDL—C下降明显,混合型高脂血症组血TC和TG治疗8周后均有下降,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论他汀类药物的肝毒性和肌毒性等使高脂血症并肝损的患者无法或惧怕使用他汀药物。依折麦布几乎不经细胞色素P450酶代谢,依折麦布单药治疗8周也能使合并肝损的高危高脂血症患者的血LDL—C和TC进一步下降,有良好的安全性,有理由相信血脂下降能使高危患者最终获益。     

新型快速成形的三维多孔支架材料构建组织工程软骨

目的:探讨以骨髓基质细胞(BMSC)为种子细胞,以快速成形的生物相容性材料为支架构建组织工程软骨的可行性.方法:成年兔BMSC在成软骨培养液中诱导培养,使之具有软骨细胞表型后,接种于快速成形的生物相容性三维支架材料聚乳酸/聚羟乙酸共聚物(poly-lactic-co-glycolic acid,PLGA),经体外培养扩增2 wk后植入自体肌袋,术后8 wk取材,进行组织学、甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组织化学观察.结果:成年兔BMSC在体外可诱导为软骨细胞,接种于三维支架材料培养后,扫描电境观察见细胞在支架上可大量扩增;接种细胞的支架植入自体肌袋8 wk,可形成软骨样组织,甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组化染色阳性.结论:具有软骨细胞表型的BMSC接种于快速成形的三维支架材料在体内非关节环境可形成软骨样组织.     

诱发电位在马尾神经压迫损伤中的应用

目的 探讨腰段诱发电位在马尾神经压迫损伤中的应用及意义。方法 将导管胶囊轻柔插兔L7慢性压迫马尾神经,将23只兔随机分为对照组5只和压力值分别为1.934kPa的实验Ⅰ组和2.213kPa的实验Ⅱ组各9只,每组按1周、2周、4周时减压,用诱发电位仪观察1个月。结果 随着椎管狭窄越重、压迫时间越长,诱发电位的潜伏期呈进行性延长,波幅不断下降,马尾神经损害由功能性改变发展为器质性改变,实验Ⅱ组较实验Ⅰ组更明显（P＜0.01）,压迫4周组较压迫1周组更明显（P＜0.01）。马尾神经功能恢复的优劣取决于马尾损害的程度和减压时机的早晚：实验Ⅰ组马尾神经功能恢复明显优于实验Ⅱ组（P＜0.01）,1周时减压明显优于4周时减压（P＜0.01）。结论 根据腰段诱发电位的改变可以判断马尾神经损害程度及神经功能恢复情况,手术减压时间越早,疗效越好。     

优化配方的CPC/DBM/rhBMP-2复合材料在体内的超微结构和组织学特征

目的探讨磷酸钙骨水泥(CPC)/脱钙骨基质颗粒(DBM)/重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)复合材料在骨内的超微结构和组织学特征,评价该材料的成骨性能。方法预制兔DBM,按0.2的DBM质量比制作CPC/DBM/rhBMP-2复合材料。将复合材料(A组,n=12)、CPC(B组,n=10)、医用骨水泥(C组,n=7)分别植入兔股骨髁部骨缺损,在植入后第6、12、24周取材进行组织学和扫描电镜观察。结果术后第6周,A组中复合材料-骨界面模糊,宿骨发出纤维连续通过界面,编织骨样结构开始向材料内部长入。第12周,A组中血管和成骨细胞在复合材料内部生长,产生新骨。第24周,A组中骨缺损已修复,形成骨性连接,材料大部分被新骨替代。B组术后第6周CPC-骨界限清晰,未见新骨向材料内部长入,第24周骨缺损部位仍为CPC填充,材料内部未见新骨出现。C组材料直至第24周尚未与宿骨形成任何连接。A组材料在成骨细胞活性、血管化程度和新骨生长速度方面均优于B组。结论将DBM质量比为0.2的复合材料植入骨缺损内可以促进细胞、血管、新骨的长入,且易降解及被自体骨替代。     

肿瘤坏死因子-α诱导成骨细胞凋亡时Bcl-2和Bax蛋白表达变化

目的：了解成骨细胞凋亡发生机制，观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠成骨细胞凋亡过程中Bcl-2，Bax蛋白表达变化及意义。方法：以原代培养的SD大鼠颅骨成骨细胞为实验对象，分别用含量为0，10，20，30，40μg／L TNF-α刺激成骨细胞。通过对细胞活性、超微结构变化观察TNF-α对成骨细胞凋亡的诱导作用；同时检测细胞Bcl-2，Bax蛋白表达变化。结果：随刺激含量的加大，成骨细胞的活性逐渐降低，细胞凋亡逐渐增加。TNF-α含量为&;lt;30μg／L时Bax表达呈稳步上升趋势，30～40μg/L时开始下降。Bcl-2表达在含量为10μg／L的时候轻度上升，在20μg／L回复到正常，后随着剂量的加大Bcl-2表达开始明显下降，30～40μg／L时下降非常显著。对于Bax／Bcl-2相对表达强度与细胞死亡率做相关性分析两者呈显著性正相关(n=25，r=0．827，P&;lt;0．001)。结论：蛋白相对比例是决定成骨细胞对TNF-α诱导凋亡的易患性的重要因素。     

人骨形态发生蛋白2重组腺病毒载体的构建及其生物学活性检测

目的构建人骨形态发生蛋白2(hBMP-2)重组腺病毒载体(Ad-hBMP-2),并检测其转染后的骨髓基质细胞hBMP-2表达以及成骨能力的改变。方法采用Cre-lox重组方法构建含有hBMP-2基因的复制缺陷型重组腺病毒,并利用原位杂交和免疫组化手段观察转染后的骨髓基质细胞hBMP-2mRNA和蛋白表达情况;通过Ⅰ型胶原原位杂交、碱性磷酸酶测定、透射电镜观察以及裸鼠肌袋试验评价Ad-hBMP-2转染对兔骨髓基质细胞成骨能力的影响。结果病毒培养上清液的聚合酶链式反应证实构建的重组腺病毒含有Ad-hBMP-2基因,重组腺病毒滴度达3·8×1010pfu/L;感染增殖率为100的Ad-hBMP-2转染兔骨髓基质细胞24h和48h后即可分别检测到显著的hBMP-2mRNA和蛋白表达,转染效率几乎达100%;Ad-hBMP-2转染可以明显刺激兔骨髓基质细胞Ⅰ型胶原mRNA表达、碱性磷酸酶分泌、细胞内蛋白质合成以及异位骨形成等。结论Ad-hBMP-2具有高效转染能力,并能够诱导骨髓基质细胞向成骨细胞转化,进而促进骨形成。     

自固化磷酸钙复合BMP及同种异体骨修复兔股骨大段骨缺损

[目的] 观察一种新型自固化磷酸钙（CPC）复合BMP与同种异体骨修复兔股骨节段性骨缺损的效果，为临床复合应用大段同种异体骨移植提供参考。[方法] 54只新西兰大白兔随机分成3组，于一侧股骨中上段造成2cm长皮质骨缺损模型，分别进行：A组复合BMP与CPC的新鲜冷冻同种异体骨移植；B组单纯新鲜冷冻同种异体骨移植；C组自体大段骨移植。移植骨均用直径3mm三棱髓内针固定。于术后4、8、12周，进行影像学、组织学检查，对比各组移植骨愈合过程与修复效果。[结果] CPC复合BMP大段同种异体骨移植早期骨修复效果优于单纯异体骨移植（P〈0．01），与自体骨移植修复效果相似，至12周3组均达骨性愈合，以A组及C组骨修复塑形较好。CPC复合BMP组骨痂量较多，分布于移植骨与宿主骨结合部及移植骨周围，形成皮质骨外骨桥，并较早在异体骨外表面形成破骨与成骨，异体骨内哈佛氏管扩大，衬垫细胞、成骨细胞、破骨细胞及血细胞较其它组多。CPC随着新骨的形成及改建塑形逐步缓慢降解。[结论] CPC复合BMP对大段同种异体骨移植的愈合及替代有增强和促进作用。     

Reciprocal action between BMP-2 and BMP-3 in cultured fibroblast in vitro

Objective:To explore reciprocal action between BMP-2 (bone morphogenetic protein-2)and BMP-3 for better understanding of the mechanism of BMP during bone fracture union.Methods:rhBMB-2 was added into the cultured fibroblasts with the concentration of 1200 ng/ml.The expression of BMP-3 in fibroblasts was detected by immunohistochemistry.Eukaryotic expression vector pcDNA3-BMP-3 was transfected into the fibroblasts.After the effective expression of BMP-3 was identified,BMP-2 was also detected by immunohistochemistry in BMP-3 expression cells.The fibroblasts transfected with empty vector pcDNA3 were used as the control.Results:Exogenous rhBMP-2 could promote the expression of BMP-3 in fibroblasts. BMP-3 also could be detected in these cells.Conclusions:BMP-2 and BMP-3 could reciprocally adjust the expression in fibroblasts.     

自体和异体肌腱移植重建前十字韧带后止点转归的组织学研究

目的：比较自体和异体肌腱移植重建前十字韧带后韧带止点的组织学转归。方法：取12只健康成年杂种犬，切除双膝前十字韧带，切取伸趾肌腱，对折成双股后移植重建前十字韧带，韧带的两端分别通过胫骨和股骨骨隧道后用缝线和螺钉固定．将每条犬的左右侧膝关节随机建成自体或异体的腱-骨愈合模型，采用HE染色，观察比较韧带重建后其止点在6周、12周、6个月时的组织学表现。结果：正常犬的前十字韧带止点具有四层移行结构，即致密结缔组织、纤维软骨、钙化纤维软骨和骨组织，在纤维软骨和钙化纤维软骨之间可见清晰连续的“潮线”。术后6周，自体和异体肌腱重建韧带止点均可见韧带与骨隧道之间充满疏松结缔组织。12周时．自体韧带与骨隧道之间胶原纤维排列有序．并已形成明显的“潮线”．但不连续．四层结构不清；异体韧带与骨隧道之间胶原纤维排列无序，无明显的“潮线”形成，6个月时，自体韧带与骨隧道之间形成明显的“潮线”．且连续，四层结构清晰；异体韧带与骨隧道之间也已形成“潮线”，但“潮线”的起伏性、连续性及结构均较自体韧带差，结论：无论是自体肌腱还是异体肌腱移植重建前十字韧带．6个月后均可初步形成韧带-软骨止点：但在相同时间点．自体肌腱止点的组织学形态优于异体肌腱。