骨髓间充质干细胞体外培养及肝向分化方案的优化

目的优化一套简便、可靠、稳定的大鼠骨髓间充质干细胞分离、培养、鉴定及肝向分化的方案。方法采用全骨髓差速贴
壁法分离提取大鼠骨髓间充质干细胞,通过优化的1.5 h差速贴壁结合12 h首次全量换液方法,及体外改良培养方案实现细胞
高效纯化扩增。流式细胞术表面标志物检测结合成脂、成骨、成软骨诱导分化鉴定细胞群。采用添加bFGF、HGF、EGF等多种
生长因子的三步诱导法促使骨髓间充质干细胞向肝系分化,并进行形态学、免疫学、基因水平评估。结果分离纯化的细胞群阳
性表达CD29、CD44、CD90,阴性表达CD34、CD45,经成脂、成骨、成软骨诱导液作用后,油红O、茜素红、甲苯胺蓝染色均呈阳
性。经三步法肝向诱导处理后,细胞群呈肝样细胞形态改变,表达肝脏特异性标志物ALB、AFP,肝系相关基因表达水平呈时间
依赖性逐渐上升。结论优化后的方案能够简便、可靠、稳定地获得高纯度的大鼠骨髓间充质干细胞,并能在特定微环境作用下
实现肝向分化。
     

原发性肝癌伴阻塞性黄疸的诊断及根治性手术治疗

目的探讨原发性肝癌致阻塞性黄疸的诊断和外科根治性手术治疗的方法及疗效。方法自1991年1月至2001年12月间对17例原发性肝癌致阻塞性黄疸的患者进行了诊断和外科根治性手术治疗。其中行肝叶切除及胆总管切开取癌栓者14例,行同种异体原位肝移植术3例。结果患者平均生存时间为8个月．最长存活时间为24个月。结论明确的诊断和根治性手术治疗是治疗伴阻塞性黄疸的原发性肝癌关键。     

飞腾八法针法配合围刺治疗慢性湿疹32例

慢性湿疹是临床上常见的皮肤病:病程不定,易复发,经久不愈,并伴有明显的瘙痒。我们近几年采用飞腾八法针法按时取穴配合围刺治疗此病,临床观察32例病人,疗效满意,现介绍如下。     

胰岛素瘤的定位诊断分析

目的:探讨胰岛素瘤较佳的定位诊断方法,提高胰岛素瘤的定位准确率。方法:回顾性分析54例胰岛素瘤病人诊断治疗经过,总结定位诊断经验。结果:胰腺B型超声和普通CT扫描的定位准确率低,多层螺旋CT薄层增强扫描、MRI、动脉造影以及术中B超的准确率相对较高。结论:对于定性诊断为胰岛素瘤的患者,用B超初步检查后可行多层螺旋CT薄层增强扫描或MRI进行定位诊断。对仍不能明确定位者应进行手术探查,术中辅助定位首选B超检查。     

以临床路径为基础的单病种定价方法研究

目的探索在保证医疗服务质量、有效控制医疗费用的基础上,合理的单病种付费标准制定方法。方法采用回顾性调查和分层随机抽样的方法,将实际发生的病种平均费用、临床路径下病种费用与病种成本进行综合比较。结果临床路径通过降低住院日、规范诊疗行为,有效地控制了不合理的医疗费用。结论病种付费标准的制定应以临床路径为基础,以社会平均的项目成本计算病种成本,以此成本作为病种付费的制定标准更具有合理性、科学性。     

肝脏巨大肿瘤瘤内出血5例诊断与处理

目的 探讨肝脏巨大肿瘤瘤内出血的诊断与治疗方法。方法 回顾性分析5例肝脏巨大肿瘤合并瘤内出血病例的临床表现及诊疗过程,结合文献复习总结其临床诊疗经验。结果 5例肝脏巨大肿瘤合并瘤内出血病例,其中3例经确诊后行手术切除,术程顺利,恢复良好;2例放弃治疗。结论 肝脏巨大肿瘤瘤内出血的诊断有赖于细致的病史采集和临床检查,手术切除是其目前主要的治疗方法。     

异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠

背景：成体肝前体细胞可在受体肝脏内定植并分化为肝细胞。不过,异种肝前体细胞移植能否促进急性肝损伤的恢复,脾脏微环境能否促进移植物的存活和向肝细胞分化,尚没有研究。 目的：评价异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤的作用;监测移植肝前体细胞在大鼠脾脏实质内的定植及向肝细胞的分化。 方法：体外培养雄性小鼠来源的肝前体细胞系肝上皮样前体细胞。通过CCl4腹腔注射联合2/3肝切除构建急性肝损伤大鼠模型,进行肝上皮样前体细胞脾脏移植。在肝切除后1,5,14和21 d,苏木精-伊红染色观察肝脏病理改变,全自动生化分析仪监测血清转氨酶变化,PCR反应检测脾脏组织Y染色体特异性序列Sry,脾脏CK-19和Alb免疫组织化学追踪移植肝上皮样前体细胞的植入和肝细胞分化。 结果与结论：肝上皮样前体细胞可在体外长期培养,保持增殖能力和双向分化潜能。肝上皮样前体细胞脾脏移植后,肝损伤大鼠肝细胞肿胀明显减轻,丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶下降更明显。移植后1,5,14和21 d,脾脏DNA中均能检测到Sry序列。在整个实验期间CK-19阳性细胞在大鼠脾脏实质内始终存在。Alb阳性细胞在移植后5 d在脾脏实质中出现,随后阳性细胞数逐渐增多。实验表明,移植肝前体细胞能在大鼠脾脏实质中植入,并分化为肝细胞,能有效促进CCl4腹腔注射联合2/3肝切除诱导的大鼠急性肝损伤的修复过程。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用

目的探讨逆转录病毒介导的短发夹RNA（shRNA）干扰迁移诱导基因7（Mig-7）对肝细胞癌（HCC）细胞血管生成拟态 （VM）形成及体外侵袭转移能力的影响。方法设计2条Mig-7 mRNA寡核苷酸序列（Mig-7 shRNA-1,Mig-7 shRNA-2）和1条 作为负对照的无关序列（Mig-7 shRNA-N）。构建Mig-7shRNA 逆转录病毒表达载体质粒,并将要接受转染的人肝癌细胞 MHCC-97H分为6组：转染Mig-7 shRNA-1组;转染Mig-7 shRNA-2组;转染Mig-7 shRNA-N组;转染空载质粒组（Vector）;重 组人血管内皮抑素（ES,商品名：恩度）组;MHCC-97H细胞对照组（Control）。半定量PCR、Western blot检测其对Mig-7表达的 影响;三维细胞培养观察其对VM形成的影响;细胞间粘附实验、Transwell侵袭实验及迁移实验观察其对细胞粘附、侵袭及迁移 能力的影响。结果转染后,Mig-7 shRNA-1组与Mig-7 shRNA-2组中Mig-7 mRNA与蛋白的表达、MHCC-97H细胞形成VM 能力、细胞侵袭、迁移能力明显减低（P<0.05）,细胞间粘附能力明显增加（P<0.05）;Mig-7 shRNA-N 组、Vector 组、ES 组中 MHCC-97H细胞Mig-7的表达、VM形成、细胞间粘附、迁移、侵袭能力较MHCC-97H细胞组均无明显变化。结论逆转录病毒 介导的shRNA能够有效下调Mig-7的表达并明显抑制HCC细胞VM形成能力及侵袭转移能力,增加细胞间的粘附作用;ES对 HCC细胞的Mig-7表达、VM形成、侵袭转移及粘附能力无明显影响。     

分级诊疗前某市各级医院急诊科现状调查与分析

目的调查在分级诊疗的政策下,某市内各个市县级公立医院急诊科现状,分析调查结果并对发现的问题提出相应的建议。方法以实地走访、问卷调查的形式,以分级诊疗制度为调查前提对某市范围内各市县级公立医院急诊科现状进行调查分析。结果某市内各公立医院急诊科服务半径大,急诊科专职医师人才梯队建设不合理,人才培养系统缺失,基础设施配置落后。结论各级公立医院应以分级诊疗制度为指导基础,不断完善急诊科基础设施建设,人才梯队建设,探索高效运转体系;建设在分级诊疗制度下能力匹配、功能健全的急诊科。     

国际磁外科进展 —基于第四届国际磁外科大会会议报告分析

学术会议是研究者展示成果的知识平台,也是对本学科发展动态做出回应与前瞻观点发布场所.会议报告的分析,对学科未来发展趋向具有预判和指导意义.本文以第四届国际磁外科大会的报告为研究内容,以磁外科体系为框架,对磁外科研究进展进行总结.稳态磁场在调节血流、改善骨代谢、抑制肿瘤生长、调节血糖水平等方面显示出了良好的应用前景.晶界...