原代大鼠肾小球系膜细胞最佳电转染条件的探索和验证

目的探索并验证原代大鼠肾小球系膜细胞最佳电转染条件。方法设立不同的电压与电容组合、电击前孵育温度、质粒DNA浓度等电转染条件,将绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1导入原代大鼠肾小球系膜细胞。24h后比较各组细胞存活率和绿色荧光蛋白表达情况,确立最佳电转染条件。再以此条件电转染质粒pcDNA3.1和pcDNA3.1-FHL2,48h后收取两组细胞RNA和蛋白。应用RT-PCR和Western印迹检测目的基因FHL2的核酸和蛋白表达,验证电转染效果。结果在电击前室温孵育,40μg质粒,340V电压、550μF电容的最佳电转染条件下,原代大鼠肾小球系膜细胞的电转染效率可达40%以上,细胞存活率在50%左右。转染FHL2质粒组较对照组检测FHL2的核酸和蛋白表达水平明显升高（P〈0.05）。结论适当的电转染条件可以有效转染原代大鼠肾小球系膜细胞。     

健脑益智胶囊薄层鉴别研究

目的建立健脑益智胶囊的薄层鉴别矛法。方法采用薄层色谱法,对健脑益智胶囊中的水蛭、白茅根、石菖蒲、郁金、葛根进行定性鉴别。结果薄层色谱斑点清晰,样品与对照品或对照药材在相应的位置有相同颜色的斑点,阴性无干扰。结论所建立的方法简单、重现性好,可用于健脑益智胶囊的质量控制。     

非肿瘤患者血浆中肿瘤标志物升高的研究进展

肿瘤标志物在健康人群中的血浆浓度非常低,其检测多用于肿瘤患者的诊断、治疗监测以及预后判断。在临床应用过程中发现,非肿瘤患者血浆中的肿瘤标志物可由于检测的方法学、特定的生理及病理过程等多种原因而升高,给临床诊疗造成困惑。本文系统回顾了多种临床常用的肿瘤标志物在非肿瘤状态下的升高情况,以便更好地理解各肿瘤标志物的特性,帮助正确解释和使用这些标志物的检测结果 。     

太白楤木抗肝损伤作用药效物质基础的初步研究

目的初步确定太白楤木抗肝损伤作用的药效物质基础。方法采用经典的系统溶剂法(极性由小到大:石油醚-氯仿-乙酸乙酯-正丁醇)依次对太白楤木提取液进行萃取,将各提取液分别灌胃给予四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤模型小鼠,检测血清及肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,比较各部位的抗肝损伤作用;将筛选出的活性部位用大孔吸附树脂进行分离纯化,不同浓度乙醇进行梯度洗脱,洗脱液分别灌胃给予肝损伤模型小鼠,检测血清及肝组织中ALT、AST、SOD的活性和MDA、GSH-Px的水平,比较各洗脱部位的抗肝损伤作用。结果与模型对照组比较,正丁醇部位可明显降低CCl4引起的ALT、AST、MDA升高,增加肝组织中SOD的活性和GSH-Px的水平;70%乙醇洗脱的正丁醇提取物可明显降低CCl4引起的ALT、AST、MDA升高,增加肝组织中SOD的活性和GSH-Px的水平,且洗脱液剂量与保肝作用有明显的正相关性。结论太白楤木保肝作用的药效活性物质大多存在于70%乙醇洗脱的正丁醇部位,其抗肝损伤作用的活性成分可能与该部位主要成分皂苷类有关。     

健脾润肺片的质量标准研究

目的:建立健脾润肺片的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对处方中的当归、五味子、麦冬、黄芪、制何首乌、黄芩、陈皮进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对本品中五味子醇甲进行含量测定。结果:TLC分离效果好,专属性强。五味子醇甲进样量在5～25μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率为99.44%,RSD=2.81%(n=6)。结论:所建标准可用于健脾润肺片的质量控制。     

罗汉果根化学成分的研究(Ⅰ)

从葫芦科植物罗汉果Siraitiagrosvenori根的脂溶性部位，分离并鉴定了2个三萜酸：罗汉果酸甲（siraiticacidA）和罗汉果酸乙（siraiticacidB），为葫芦烷型新化合物。     

BCYRN1对结直肠癌转移表型的影响及其机制探讨

目的:探究长链非编码RNA脑细胞质RNA1(BCYRN1)在结直肠癌组织中的表达特征及其与细胞侵袭转移的关系。方法:35例结直肠癌组织及相应的癌旁正常组织收集于2016年3月至2017年12月期间经我院普外科行结直肠癌根治术的患者，采用实时荧光定量PCR（Real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）技术检测结直肠癌及癌旁正常的组织中BCYRN1、Snail及E-cadherin的mRNA表达水平；比较不同来源组织中BCYRN1、Snail及E-cadherin表达差异并分析BCYRN1与Snail及E-cadherin表达的相关性；分析BCYRN1表达与患者病理资料间的关系。采用过表达载体慢病毒转染技术外源性上调结直肠癌细胞SW480中BCYRN1的表达以此作为实验组细胞，转染空白对照载体的SW480作为对照组细胞，Transwell侵袭及迁移实验检测细胞转移能力；RT-qPCR技术检测Snail及E-cadherin mRNA表达的变化；Western Blot实验检测Snail及E-cadherin蛋白表达水平的变化。结果:实验组Transwell基底膜侵袭及迁移细胞数显著高于对照组，实验组BCYRN1及Snail mRNA表达显著高于对照组，E-cadherin mRNA表达显著低于对照组，Snail蛋白表达显著高于对照组，E-cadherin蛋白表达显著低于对照组。BCYRN1及Snail mRNA在结直肠癌组织中表达显著高于癌旁正常的组织，E-cadherin mRNA在结直肠癌组织中表达显著低于癌旁正常的组织，结直肠癌组织中BCYRN1与Snail mRNA表达显著正相关，与E-cadherin mRNA表达显著负相关，结直肠癌组织中BCYRN1高表达患者TNM分期及浸润深度显著高于低表达患者。结论:BCYRN1可通过Snail/E-cadherin途径促进结直肠癌侵袭转移能力。     

丹红注射液研究进展及鼻腔递药可行性探讨

丹红注射液由丹参和红花组成,具有活血化瘀、通脉舒络之功,临床广泛应用于全身脏器供血不足的治疗。作为临床急症用药,在心脑血管疾病治疗中发挥了重要作用,但中药注射剂存在潜在的临床风险,不良反应时有发生。通过文献研究,对丹红注射液的基础研究现状进行整理分析,结合现代药剂学研究成果,提出对丹红制剂进行二次开发的思路(鼻腔递药)和可行性分析。     

癫痫脑电特征波的综合检测分类方法研究

本文将小波变换、人工神经网络、专家规则判据等多种检测方法有机地结合起来 ,用于癫痫脑电特征波的检测与分类 ,以充分发挥不同方法的优势。这种综合检测分类方法是先将预处理的多导脑电时间序列经小波变换将脑电中癫痫特征波在不同尺度下分离出来 ,再对选出的癫痫嫌疑波进行特征参数提取 ,然后把特征参数送入已经训练好的人工神经网络进行分类识别 ,最后再由专家规则判断筛选并作出检测分类统计报告。研究表明 ,该方法具有很好的信号特征提取和屏蔽随机噪声能力 ,获得了较好的检出率 ;尤其适合于非平稳、非线性生物医学信号的检测分类 ,值得进一步深入研究