糖化白蛋白测定及其在临床的应用进展

本文主要介绍了人血清白蛋白糖化位点、糖化速率,及糖化白蛋白的测定方法.2015年中国血糖监测临床应用指南中明确指出,糖化白蛋白能够反映2～3周血糖水平,在糖尿病监测中可以作为糖化血红蛋白的有益补充,现对糖化白蛋白的检测方法及临床应用进行阐述.     

心脏肌钙蛋白T低水平升高的临床分布及意义初探

目的对心脏肌钙蛋白T低水平升高的分布情况进行分析。方法回顾本院自开展心脏肌钙蛋白T检测以来的所有临床结果,按照正常人群的99百分位点和急性冠脉综合征的临床阈值为数据的分区标准,对介于二者间的结果进行分析和讨论。结果心脏肌钙蛋白T处于低水平升高的检测结果占总检测例数的9.69%（1 228例中有119例）,以急性冠脉综合征为最多,其次是2型糖尿病、肿瘤、高血压、烧伤和脑梗塞。其中23例最后发展为心肌梗死。结论心脏肌钙蛋白T的低浓度升高可见于多种疾病,与心肌损害密切相关,部分会发展到心肌梗死,须密切关注。     

GYVEX 2T-SGR/GYREX-V DLX磁共振机扫描床传动横轴的改进

我院的GYVEX 2T-SGR和甘肃省人民医院的GYREX-V DLX磁共振机，在引进后分别运行8个月和6个月，都发生了扫描床水平移动的动力传动横轴（cross-shaft)断裂故障。我们对断裂横轴进行了分析和改进，重新制做的横轴运行4年至今良好。经调查核实，核横轴发生断裂在全国同类型磁共振机中属常见故障。对扫描工作造成不良影响。     

组织金属蛋白酶抑制物转基因对小鼠肝脏组织结构与抗氧化能力的影响

目的探讨金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）及其金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9在TIMP1转基因小鼠和正常小鼠肝脏自然衰老过程中的表达和作用。方法选择3、12和24月龄正常和TIMP_1转基因小鼠，采用HE和Masson染色，观察小鼠肝脏的组织病理学改变，用RTPCR和Westernblot法分别检测TIMP-1和MMP-2、MMP-9在不同月龄小鼠肝脏组织中的表达。测定3月龄小鼠肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、单胺氧化酶（MAO）活性及丙二醛含量。结果24月龄小鼠肝脏中有较多的脂肪变性和胶原沉积，TIMP1的表达随小鼠月龄增加而增高，转基因小鼠的病变更明显。两组小鼠MMP-2和MMP-9的表达均无明显变化。3月龄转基因小鼠肝脏组织学结构和形态无明显改变，但SOD活性降低，MAO活性增高，丙二醛含量增高（P〈0．05）。结论TIMP-1表达增高在肝脏衰老过程中可能起重要作用。     

调控纤维蛋白水平对不同鼠龄肾脏炎症反应的影响

目的　探讨调控纤维蛋白在不同鼠龄肾脏沉积水平对肾脏炎症反应的影响及其机制。　方法　青年及老年鼠均随机分4组,对照组予生理盐水腹腔注射;脂多糖组腹腔注射脂多糖,氨甲环酸组注射脂多糖加氨甲环酸,尿激酶组注射脂多糖及氨甲环酸加尿激酶。应用激光共聚焦显微镜分析纤维蛋白沉积,应用RT PCR、免疫组化及蛋白质印迹法分别检测肾组织细胞间黏附分子(ICAM 1)基因和蛋白质表达。　结果　(1)青年与老年鼠比较脂多糖、氨甲环酸、尿激酶组纤维蛋白、ICAM 1表达差别均有统计学意义(P<0 05);(2)氨甲环酸组与脂多糖、尿激酶组间比较纤维蛋白、ICAM 1基因及蛋白质表达差异均有统计学意义(P<0 05)。　结论　纤维蛋白可上调ICAM 1基因及蛋白质表达,促进肾脏炎症反应;增龄能促进肾脏纤维蛋白沉积及炎症反应。     

组织金属蛋白酶抑制物在老年大鼠肾小管间质病理损害中的动态变化

目的研究组织金属蛋白酶抑制物(TIMPs)及基质金属蛋白酶(MMPs)在不同鼠龄单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质中的表达变化,探讨其在老年大鼠肾小管间质损害中的作用. 方法选用3月龄(青年)、26月龄(老年)大鼠制备UUO模型,采用病理及免疫组化等方法动态观察不同年龄大鼠UUO术后3、7、14d梗阻侧肾脏的组织学变化和TIMP-1、TIMP-2 、MMP-2、MMP-9等在梗阻肾小管间质中的表达情况. 结果 TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9主要表达于肾小管上皮细胞和间质细胞.在对照组中,TIMP-1、TIMP-2仅微弱表达于青年鼠肾脏中,而在老年大鼠肾脏中其表达显著增加(TIMP-1 0.84±0.23 vs 2.17±0.85,P<0.01; TIMP-2 0.93±0.12 vs 2.31±0.87,P<0.01),MMP-2、MMP-9在正常青年鼠与老年鼠肾脏中均有表达,二者之间差异无显著性(P＞0.05).与对照组相比,3、26月龄大鼠梗阻侧肾脏的TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9在术后各时间点的表达均显著增高(P<0.01),肾小管间质纤维化面积随UUO术后时间的延长而增加,且TIMP-1、TIMP-2的表达与肾小管间质纤维化面积呈正相关(TIMP-1,r=0.816,P<0.01; TIMP-2, r=0.851, P<0.01).与3月龄UUO大鼠比较,26月龄UUO大鼠TIMP-1、TIMP-2在肾小管间质中各时间点的表达均显著增高(P<0.01),肾小管间质纤维化面积在各时间点也明显增加(P<0.01). 结论 TIMPs的高表达所致的MMPs/TIMPs比例失调可能促进老年大鼠肾小管间质损害的进程.     

调控凝血活性对老年大鼠肺组织炎症反应的影响

目的 通过调控凝血活性,观察老年大鼠肺组织凝血酶受体(PAR-1)表达和纤维蛋白沉积变化与炎症反应之间的关系,探讨高凝状态对老年大鼠肺组织炎症反应的促进机制.方法 雌性Wistar大鼠3月龄(青年鼠)和27月龄(老年鼠)均随机分组,以脂多糖(LPS)腹腔注射诱导大鼠肺组织炎症反应,分别给予氨甲环酸、肝素或尿激酶调控凝血活性,检测PAR-1、细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达及单核巨噬细胞浸润、纤维蛋白沉积水平的变化.结果 (1)氨甲环酸可使肺组织纤维蛋白沉积增加,而PAR-1表达无明显变化,浸润的炎细胞数目、ICAM-1的蛋白质表达水平较单独给予脂多糖显著上调(P＜0.05);(2)肝素和尿激酶均可使有炎症反应的肺组织纤维蛋白沉积显著减少,但仅有肝素能使PAR-1表达下调,肝素和尿激酶均可显著减少浸润的炎细胞数目及ICAM-1的蛋白质表达(P＜0.05),且两组下降程度差异无统计学意义(P＞0.05);(3)与相同处理的青年鼠比较,老年鼠肺组织纤维蛋白沉积、PAR-1表达显著增多(P＜0.05),浸润的炎细胞数目、ICAM-1的蛋白质表达水平亦显著增加(P＜0.05).结论 (1)凝血系统激活导致的纤维蛋白沉积和PAR-1表达上调,能够诱导黏附分子表达上调,促进炎症反应,增龄所导致的高凝状态能够促进肺组织纤维蛋白沉积及PAR-1表达,从而加重炎症反应;(2)纤维蛋白与PAR-1相比较,在凝血系统参与调节炎症反应的机制中,可能起着更主要的调节作用.     

肾脏缺血再灌注损伤E-钙粘附素的表达研究

目的探讨肾脏缺血再灌注损伤时E-钙粘附素(E-cadherin)的变化。方法2006年1月至6月对解放军肾脏病研究所暨肾病重点实验室利用ATP耗竭剂抗霉素A建立的犬集合管上皮细胞(MDCK)缺血模型进行体外实验;体内实验使用双侧肾动脉钳闭法建立大鼠缺血再灌注损伤模型。PAS染色了解肾脏病理改变;E-cadherin免疫组化了解E-cadherin的定位和表达;Western bolt检测E-cadherin的蛋白表达。结果正常MDCK细胞E-cadherin在细胞膜表达,ATP耗竭4hE-cadherin表达极性消失,主要在细胞质表达。肾组织免疫组化显示,假手术组E-cadherin主要表达在肾小管上皮细胞基底膜侧;缺血肾脏组E-cadherin的表达极性消失,空泡变性的肾小管上皮细胞基底膜侧E-cadherin表达明显减少,主要在细胞质表达;而在脱落的肾小管上皮细胞只表达于细胞质。肾组织Western bolt显示,假手术组E-cadherin为120ku条带,缺血45min120ku条带减弱,出现明显的80ku条带,缺血60min120ku条带几乎检测不出,而主要表现为80ku条带。结论体内体外实验均证实,肾脏缺血再灌注损伤时E-cadherin的定位、蛋白表达量发生明显变化,并出现时间依赖性E-cadherin降解,使上皮细胞的极性和细胞间连接受损,部分解释了肾脏缺血再灌注损伤时上皮细胞脱落的原因。     

内质网应激途径诱导肾小管上皮细胞凋亡在横纹肌溶解肾损伤过程中的作用

目的探讨内质网应激(ERS)诱导的肾小管上皮细胞凋亡是否参与了横纹肌溶解肾损伤过程。方法雄性Wistar大鼠33只,根据标本采集时间分为对照组及模型组,后者又按照时间分为1、3、6、12、24、48、72、96、120、168h 10个亚组(n=3)。建立甘油诱导横纹肌溶解肾损伤大鼠模型,建模后于相应时间点分别处死大鼠,收集血清及肾脏组织,利用肾功能指标和肾组织病理评估不同时间点肾脏损伤程度;采用TUNEL染色评估肾小管上皮细胞凋亡程度;Western blotting检测死亡受体途径和线粒体凋亡途径关键凋亡因子caspase-8、细胞色素C及caspase-9活性片段的表达,同时检测ERS伴侣蛋白GRP-78和特异性内质网凋亡因子caspase-12活性片段的表达。结果横纹肌溶解肾损伤后1h肾小管上皮细胞出现病变,24h出现大量坏死、脱落,肾小管上皮细胞凋亡数最高,72h肾小管-间质损伤达高峰。横纹肌溶解肾损伤后凋亡因子caspase-8、细胞色素C和caspase-9的表达上调,12h达到高峰(P<0.05),GRP-78表达升高趋势与caspase-12一致。结论肾小管上皮细胞凋亡是横纹肌溶解肾损伤的主要发病机制,除了死亡受体及线粒体途径的活化,ERS也可能在此过程中发挥了重要作用。     

健脑益智胶囊水提部位精制工艺研究

目的考察健脑益智胶囊水提部位的醇沉工艺条件。方法以药液浓度、醇沉浓度和醇沉时间为考察因素,采用Box-Behnken中心组合试验设计,响应面分析法,以葛根素转移率为评价指标,确定醇沉的最佳工艺条件。结果最佳工艺条件为:药液浓度为0.72 g/mL,醇沉浓度为60%,醇沉时间为36 h,葛根素转移率可达到99%以上。结论采用醇沉工艺精制健脑益智胶囊水提液部分,具有较好的可行性和有效性,可节约成本并提高产品质量。