儿童血培养的病原菌分布及耐药性分析

目的 分析住院患儿血培养的病原菌分布及耐药特点,指导临床抗菌剂的合理应用.方法 采用BACTEC 9240全自动血培养仪和MicroScan WalkAway 96SI全自动微生物鉴定系统进行病原菌的培养和鉴定,用K-B法进行细菌药敏实验.结果 5 750例血培养中379例检出阳性,阳性率为6.59%.共检出病原菌381株,包括革兰阳性菌260株,占68.24%;革兰阴性菌81株,占21.26%;真菌40株,占10.50%.按年龄分组,各年龄段患儿检出的病原菌均以凝固酶阴性葡萄球菌居多,又各有其分布特点;凝固酶阴性葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁敏感,对β-内酰胺类和大环内酯类耐性率高(>80.00%);大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均未分离出亚胺培南耐药菌株,两者对头孢菌素类抗菌剂耐药严重.结论 儿童血培养分离的病原菌以革兰阳性菌为主,常见的病原菌凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均对多数常用抗菌剂耐药严重.     

2009H1N1流感病毒对A549细胞和BEAS-2B细胞作用的初步研究

目的 探求2009H1N1流感病毒对A549细胞和BEAS-2B细胞作用,为研究2009H1N1流感病毒的致病机理提供线索。方法 不同来源(死亡、重症、普通病例分离)的2009H1N1流感病毒和季节性H1N1流感病毒分别感染A549和BEAS-2B细胞12、24、48、72 h后用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果 感染A549细胞12和24 h,普通病例分离的2009H1N1流感病毒组的细胞凋亡率最高(P<0.05),重症组的细胞凋亡率最低(P<0.05);48 h和72 h,死亡组细胞凋亡率最高(P<0.05)。感染BEAS-2B细胞12 h,重症组细胞凋亡率最高(P<0.05);48 h,死亡组和重症组细胞凋亡率高(P<0.05);72 h,死亡组和普通组细胞凋亡率高(P<0.05)。4株病毒主要将A549细胞阻滞在S期,将BEAS-2B细胞阻滞在G0/G1期。结论 在细胞凋亡和细胞周期的细胞学观察水平上2009H1N1流感病毒和季节性H1N1流感病毒之间存在差异,不同来源的2009H1N1流感病毒之间也存在差异。     

多西紫杉醇联合卡铂与氟尿嘧啶联合卡铂治疗局部晚期鼻咽癌近期疗效的比较

背景与目的:以铂类为基础联合氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)方案是鼻咽癌患者最常用方案,但患者的疗效一直维持在50%～60%。多西紫杉醇是治疗头颈部恶性肿瘤有效的单药,其给药方式简单、给药时间短。本研究通过比较多西紫杉醇联合卡铂(TC)方案与5-FU联合卡铂(FC)方案对局部晚期鼻咽癌患者的近期疗效和不良反应,探讨局部晚期鼻咽癌诱导化疗的新方案。方法:2005年11月1日至2008年12月1日,58例局部晚期鼻咽癌患者按照相同的临床分期和性别,随机抽签进入试验组和对照组。试验组29例患者采用多西紫杉醇联合卡铂诱导化疗2个疗程后,行2疗程卡铂单药同期放化疗;对照组29例患者采用5-FU代替多西紫杉醇诱导化疗,余治疗方案同试验组。χ2检验比较两组患者诱导化疗及同期放化疗的近期疗效和不良反应。结果:试验组的平均化疗周期数比对照组多(3.31vs.2.83,P=0.043)。两组近期疗效及1年总生存率差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组和对照组Ⅲ度及Ⅲ度以上中性粒细胞减少的发生率分别为72.4%和37.9%,差异有统计学意义(P=0.05)。试验组血小板减少和呕吐发生率均较对照组少,差异有统计...     

中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因特性

目的研究中国南方地区H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因分子特征。方法从Genebank中下载中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒和其他国家或地区的16株代表性H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因序列，利用生物信息学软件DNASTAR5．0进行核酸同源性分析，用MEGA3．1进行核酸和氨基酸序列比对和进化树分析。结果中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA蛋白的重链区和轻链区连接肽的序列为LRERRR—KR，与动物分离的高致病性H5N1亚型禽流感病毒和东南亚地区人禽流感病毒的连接肽相比，减少1个碱性氨基酸；共有8个潜在的糖基化位点，抗原决定簇位点有其独特的特征。基因进化树表明中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA基因位于单一的进化簇，与动物来源的高致病性禽流感病毒HA基因同源性高。结论中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA基因分子特征一致，有其显著的独有特点。提示候鸟或其他扩散因素在高致病性H5N1亚型流感病毒HA基因的重配方面扮演了重要的作用。     

双碱基延伸法结合荧光偏振法快速检测新甲型HINl耐药位点方法的建立

目的建立一种利用双碱基延伸法与荧光偏振技术（Fluorescence polarization,FP）快速检测甲型H1N1流感病毒NA基因耐药突变位点的新方法。方法从GenBank随机下载30条甲型HINl的NA（neuraminidase）基因序列,通过MEGA分析,利用Primer Premier软件设计3条特异引物,其中一对引物通过RT—PCR用于扩增含有耐药位点H275Y的NA基因,第3条引物是应用双碱基延伸终止法与荧光偏振技术检测NA基因对达菲类药物耐药位点H275Y的突变情况,再随机选取50株甲型HINl流感病毒进行检测,与测序结果进行比对,验证检测结果的准确性。结果50株甲型H1N1流感病毒的NA蛋白第275位氨基酸均为组氨酸,未发生HY的替换,在灵敏度与特异性方面,与传统的基因测序结果一致性均达100％。结论本方法操作简便、敏感性及特异性高、判读结果直观明确、检测费用低,能实现对耐药位点突变的快速、准确检测,可应用于与SNP相关疾病的快速分型和突变位点的实时监测和临床检测。     

流感样病例暴发流行的病原学研究与方法比较

目的 对 2007 年 5 月下旬至 6 月上旬深圳市龙岗区某鞋厂流感暴发流行情况进行病原学研究.方法 采集发热患者的鼻咽拭子 27 份,急性期患者血清标本 17 份和恢复期患者血清标本 12 份.27 份鼻咽拭子标本,采用荧光定量 RT-PCR 方法 、胶体金法、MDCK 细胞培养、鸡胚分离培养方法 进行病原学检测;血清标本采用血清学和血凝抑制试验检测.结果 27 份鼻咽拭子标本中荧光定量 RT-PCR 检测阳性 17 份,阳性率为 62.96%(17/27);胶体金法检测阳性 12 份,阳性率 44.44%(12/27);MDCK 细胞分离培养,其中 2 份鼻咽拭子标本中分离出 2 株 H3N2 亚型流感病毒,阳性率 7.41%(2/27);鸡胚分离培养未分离出流感病毒.6 例病人的双份血清学检测结果 显示:恢复期抗体比较急性期抗体有 4 倍或以上增长. 结论 该起流感样病例暴发流行由 H3N2 亚型流感病毒引起.荧光定量 PCR 法的特异性高、灵敏度好,可用于流感病毒的快速检测.     

狗肝铜锌超氧化物歧化酶的纯化及理化性质鉴定

<正> 超氧化物歧化酶(SOD)是广泛存在于生物界的金属酶类,它催化超氧化物自由基O_2~r转变为O_2H_2O_2的歧化反应,是生物体抗氧化损伤的重要保护酶。按所含金属的不同,SOD分为,Cu,Zn-SOD,Mn-SOD,和Fe-SOD。Cu,Zn-SOD存在于需氧生物的细胞浆中,     

单纯微创手术与调强放射治疗原发性I期鼻咽癌的疗效比较

背景与目的 "美国国家癌症综合网络"指南建议将调强放射治疗(intensity-modulated radiotherapy,IMRT)作为新诊断鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的主要治疗方法,但放疗相关并发症和相对较高的医疗费用仍困扰着患者。内镜下鼻咽切除术(endoscopic nasopharyngectomy,ENPG)已成功用于复发性鼻咽癌的治疗,无辐射且医疗费用相对较低。在本文中,我们对ENPG能否作为局限性I期NPC的有效治疗方法进行了探讨。方法从2007年6月至2017年9月,10例新诊断为局限性I期NPC的患者自愿在中山大学肿瘤防治中心接受了ENPG治疗。同时,收集了329例接受IMRT治疗的I期NPC患者数据作为参考队列。比较两组的生存结局、生活质量(quality of life,QOL)和医疗费用。结果经过中位随访59.0个月(95%CI:53.4–64.6)后,接受ENPG治疗的10例患者均未出现死亡、局部复发或远处转移。接受ENPG治疗的患者的5年总生存率、局部无复发生存率、区域无复发生存率和无远处转移生存率与接受IMRT治...     

抗坏血酸—Fe^3＋羟自由基生成体系对质粒pBR322DNA的损伤

以抗坏血酸-Fe^3 作为自由基生成体系，结合琼脂糖电泳和激光密度扫描等方法，观察了自由基对质粒pBR322DNA的损伤及过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的防护效能，结果表明，该体系生成的羟自由基可造成的单链断裂而使pBR322的超螺旋构型转变为开环构型；过氧化氢酶对羟自由基所致DNA损伤的抑制作用显著，而超氧化物歧化酶无明显抑制作用。     

羊脾转移因子的免疫调节作用及高压液相色谱分析

从单核细胞获得的提取物,特别是由淋巴细胞释放的许多细胞间作用因子,可产生特定的生物学活性。近二十多年来已证明这类白细胞透析物具有转移细胞免疫的特殊功能而称之为转移因子(TF)。它不仅可以非特异地选择性激发机体的细胞免疫反应,还能诱导淋巴细胞释放干扰素而促进机体抗感染防御功能。因而将转移因子列为免疫增强剂,在治疗原发或继发性免疫缺陷病,慢性粘膜