抑瘤素M在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

目的：构建抑瘤素M（oncostatinM,OSM)的酵母表达体系,方法：将人OSM cDNA连入pPIC9K酵母表达载体,转染毕赤酵母（Pichia pastoris),用MD和MM营养缺陷型培养基筛选具有正确表型的重组转化子,用RNA印迹法和蛋白质印迹法鉴定母转化菌株中OSMmRNA转录和OSM相对分子质量。MTT法鉴定OSM蛋白对人黑素瘤细胞生长的抑制活性。结果：构建的毕赤酵母体系可实现人OSM分泌表达,表达量占外分泌蛋白的70％以上,表达蛋白相对分子质量约30000,对黑素瘤细胞生长可产生明显抑制作用。结论：OSM的酵母分泌表达体系表达量可观,表达蛋白集中于培养液上清,便于纯化,是日后进行OSM大规模制备的可行途径。     

一株从死亡黑天鹅中分离出H5N1亚型流感病毒株血凝素基因特性的研究

目的了解从黑天鹅分离H5N1亚型流感病毒株血凝素基因特性。方法用RT-PCR扩增目的基因,用PGBM-TVecTor(美国Promeqa公司)4℃过夜连接重组质检转入dH5α细菌,筛选阳性菌落,酶切鉴定。送六合通公司自动测序,然后进行进化树分析,并推导出基因树序列。结果从黑天鹅分离出H5N1毒株血凝素的重链区与轻链区连接肽的序列为R-E-R-R-R-K-R,即含一串碱性氨基酸,共有8个潜在的糖基化位点,其中6个位于重链区的第9、10、23、165、193和296位点上;其余2个位于轻链区的第154和213位点上。其HA基因进化树与无论从家禽还是从人中分离的均有差异。结论从黑天鹅中分离的H5N1亚型流感病毒为对禽是高致病性的,他的HA基因不同于从人和家禽中分离出的H5N1毒株。     

一株从死亡黑天鹅中分离出HSN1亚型流感病毒株血凝素基因特性的研究

目的了解从黑天鹅分离H5N1亚型流感病毒株血凝素基因特性。方法用RT-PCR扩增目的基因，用PGBM-TVecTor（美国Promeqa公司）412过夜连接重组质检转入dH5α细菌，筛选阳性菌落，酶切鉴定。送六合通公司自动测序，然后进行进化树分析，并推导出基因树序列。结果从黑天鹅分离出H5N1毒株血凝素的重链区与轻链区连接肽的序列为R—E—R—R—R—K—R，即含一串碱性氨基酸，共有8个潜在的糖基化位点，其中6个位于重链区的第9、10、23、165、193和296位点上；其余2个位于轻链区的第154和213位点上。其HA基因进化树与无论从家禽还是从人中分离的均有差异。结论从黑天鹅中分离的H5N1亚型流感病毒为对禽是高致病性的，他的HA基因不同于从人和家禽中分离出的H5N1毒株。     

甲型H1N1、季节性H1N1及H3N2亚型流感病毒的多重荧光RT-PCR方法的建立

目的构建一种可同时检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2亚型流感病毒的多重荧光RT-PCR方法。方法根据不同流感亚型HA与NA的差异,设计五对引物及五条探针,构建合适的检测体系,分析特异性、灵敏度、可重复性、仪器适用性,并将其与常用检测试剂盒进行比对。结果本研究成功构建多重荧光RT-PCR检测体系,能同时检出甲型H1N1、季节性H1N1及H3N2亚型流感病毒,检测灵敏度为101~102拷贝/μl,可重复性好(变异系数为0.47%~4.03%),比常用检测试剂具有更好的荧光值水平,可适用于多种常见的荧光定量PCR仪。结论本方法所构建检测流感亚型体系具有较好的特异性、灵敏度、可重复性、仪器适用性,适用于各基层疾控及医疗机构。     

两种SOD模拟物对氧自由基所致质粒pBR322DNA损伤的防护作用

以自由基所致质粒ｐＢＲ３２２ＤＮＡ在琼脂糖电泳中的构象改变为实验模型，结合ＥＳＲ技术观察了南京大学配位化学研究所首次合成的二十员大环双核铜和线形二氧四胺铜两种ＳＯＤ模拟物对Ｏ＿２和·ＯＨ所致ＤＮＡ损伤的防护作用及清除氧自由基效能的差异。结果表明，两种ＳＯＤ模拟物对Ｏ＿２的清除效能显著，并对其所致ＤＮＡ损伤具有明显的抑制作用，而对·ＯＨ所致损伤未见明显的防护效能．     

深圳市2012年流感监测结果分析

目的通过对2012年深圳市流感监测结果进行分析,探索流感流行规律,为制定流感防治措施提供依据。方法收集全市哨点医院的流感样病例数据,病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析。结果2012年深圳市的流感样病例占门诊急诊就诊总数百分比（ILI％）为4．15％,波动在3．16～5．56％之间。2012年全市哨点医院共采集ILI咽拭标本3776份,分离出474株流感病毒,阳性率为12．6％,其中264株季节H3亚型（55．7％）,150株B（Victoria,31．6％）亚型,55株B（Yamagata,11．6％）亚型,4株季节H1亚型（0．8％）,1株甲型H1N1亚型（0．2％）。2012年全市报告了87起ILI暴发疫情,流感PCR检测阳性74起,其中乙型23起（26．7％）,季节性甲型46起（53．5％）,季节性甲型和乙型混合感染5起（5．8％）。结论2012年深圳市流感活动较低,主要在上半年流行,3月初和6月初出现流行高峰。     

甲型H1N1病毒感染BEAS-2B细胞差异蛋白的初步研究

目的通过建立2009H1N1流感病毒感染BEAS-2B（人支气管上皮细胞）细胞模型,探讨病毒感染细胞后细胞蛋白质差异变化,为2009H1N1流感病毒的致病机理研究奠定基础。方法 100 TCID50 2009H1N1（D、S、O）流感病毒感染BEAS-2B细胞12、24、48、72h后提取细胞总蛋白进行双向电泳,Image MasterTM 2D Platinum Software 7.0软件分析图像,对有差异的蛋白酶解,质谱分析鉴定差异蛋白。结果质谱共鉴定出包括蛋白酶体α5、巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、前纤维蛋白1（profilin-1）、α-2干扰素等13个差异蛋白。结论 13个差异蛋白可能参与了2009H1N1流感病毒的致细胞病变过程。     

指数平滑模型在流感样病例预测中的应用

目的建立指数平滑模型预测流感样病例率的变化趋势。方法利用深圳市2006～2008年流感监测的ILI周数据建立指数平滑模型,拟合ILI%的变化趋势,对2009年的流感样病例率进行预测。结果 2006～2008年深圳市的ILI%呈季节性周期变化,Holt-Winters指数平滑模型为最优模型,预测值与实际值的平均相对误差为9.8%。对2009年流感样病例率的预测结果为,2009年上半年的平均相对误差为11.0%,下半年的平均相对误差为39.5%。结论指数平滑模型可对ILI%进行很好的拟合,建模后的中短期预测效果较好。     

2010年深圳市流感流行病学分析

目的 对2010年深圳市流感监测结果进行分析,了解流感的流行趋势,为流感防治提供科学依据.方法 收集全市31家监测单位的流感样病例数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析.结果 2010年深圳市的流感样病例百分比(ILI％)为5.43％.2010年全市共采集日常监测ILI咽拭标本4 031份,分离出445株流感病毒,阳性率为11.0％,其中14株季节性H1N1亚型(3.1％),42株季节性H3N2亚型(9.4％),171株甲型H1N1亚型(38.4％),213株B(Victoria,47.9％)亚型,5株B(Yamagata,1.1％)亚型.2010年全市报告了89起ILI暴发疫情,发病总人数741人,流感PCR检测阳性79起,其中季节性甲型6起(6.8％),乙型67起(75.3％),甲型H1N1流感6起(6.8％).结论 2010年深圳市流感活动较低,未出现明显的高峰.