深圳市首例人禽流感病例的实验室检测分析

目的对深圳市首例人禽流感病例进行实验室确诊，并研究其携带病毒关键基因的遗传特性。方法采用实时荧光RT-PCR方法检测高致病性禽流感病毒（H5N1）核酸，采用血凝抑制方法检测患者血清抗高致病性禽流感病毒的抗体滴度变化，利用MEGA3．1软件分析患者携带病毒HA、NA基因的进化关系。结果成功确认了深圳市首例人禽流感病例，患者携带病毒为H5N1高致病性禽流感病毒，HA、NA基因进化关系比较特殊。结论深圳地区禽鸟中可能携带高致病性禽流感病毒，具有潜在感染人类的可能。     

OA学术期刊的出版规范及其版权管理

【目的】 勘察国际OA期刊的OA实践及其期刊政策声明,为我国OA期刊建设提供借鉴。【方法】 以DOAJ图情类期刊为研究对象,调查并分析期刊的出版形式如发行媒介、出版周期、收费情况等,以及存档政策、许可条款、OA模式等版权管理政策。【结果】 揭示OA期刊在出版频率、APC、OA模式方面出现的新形式、新模式,分析OA期刊在可访问性、透明性和开放性方面存在的问题。【结论】 OA已经成为学术期刊发展的必然方向,在版权管理方面仍处在初级阶段,认证环节较为混乱,现阶段处于多模式探索尝试阶段;OA期刊的出版管理应在保持适度灵活性的同时,着力加强规范建设。     

放射线敏感性自杀基因体外杀伤肝癌细胞的实验研究

目的观察可被放射线转录激活的早期生长反应基因 1(earlygrowthresponse 1,Egr 1)启动子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (herpssimplexvirusthymidinekinase ,tk)对肝癌细胞的高效杀伤作用。方法构建以Egr 1为启动子 ,以tk为目的基因的重组质粒pET ,经脂质体介导转染人肝癌细胞株SMMC 772 1,命名为SMMC/ET细胞 ,经G418抗性筛选、60 Co γ射线照射后 ,加入前药丙氧鸟苷 (ganciclovirGCV) ,测定其对肝癌细胞的杀伤作用。结果与对照组肝癌细胞 ( 0 88± 0 12 )相比 ,经γ射线照射后 ,前药GCV可明显提高对SMMC/ET肝癌细胞的杀伤效率 ( 0 0 7± 0 0 3) (P <0 0 0 1)。结论放射敏感性自杀基因在γ射线作用下可以显著提高对肝癌细胞的杀伤作用。     

血红蛋白替代红细胞输血的研究进展

本文着重介绍了近年来血红蛋白替代血液研究在血红蛋白的大量制备、化学修饰和结构改造等方面所取得的重要进展,同时也扼要指出了目前尚待进一步探讨的技术难点,以及在实际应用中暴露出的一些安全性问题。     

应用转基因小鼠生产药用重组蛋白的两条途径

一个由法国、美国、澳大利亚科学家组成的研究小组,最近试用转基因小鼠通过两条途径生产人α_1抗胰蛋白酶(α_1AT)和人凝血因子IX(FIX),均获满意结果。途径之一是以小鼠免疫球蛋白H 链增强子(Eμ)和κ链启     

早期手术治疗感染性心内膜炎的可行性探讨

目的 探讨早期手术治疗感染性心内膜炎(IE)的可行性.方法 1996年6月至2011年7月,135例IE患者接受手术治疗.分为A组(早期手术治疗组,2008年后收治的患者)和B组(传统治疗组,2008年前收治的患者).比较两组患者死亡、治疗后心功能不全、感染复发、出院后栓塞等事件,分析患者生存情况.结果 两组患者一般资料无差异.组间比较,A组患者整体死亡比例下降(9.4％对23.0％,P=0.016);心脏功能衰竭患者比例减少(5.4％对26.2％,P＜0.001);两组患者感染复发比例无差异(0对4.9％,P=0.112;).A组患者手术比例高(67.6％对32.8％,P＜0.001),手术死亡率及再感染发生率未增加(6.0％对15.0％,P=0.222;0对5.0％,P=0.405).结论 早期积极合理的外科治疗可以改善IE患者整体预后.     

双重荧光定量RT-PCR快速检测N_1、N_2亚型流感病毒的研究

目的利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测流感病毒N1、N2亚型的方法。方法根据N1、N2亚型流感病毒NA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建立体系的灵敏度和重复性并建立相对定量标准曲线;利用多种流感病毒和具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。结果 N1、N2亚型流感病毒的检测灵敏度为10拷贝/μl,扩增效率分别为102.21%和101.78%,标准曲线相关系数大于99%,重复性良好,特异度实验未发现有非特异性扩增。结论双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确的检测N1、N2亚型流感病毒。     

深圳市儿童呼吸道腺病毒4型暴发流行的病原学研究

目的探讨深圳市某幼儿园一起急性呼吸道感染暴发的流行特征及病因。方法使用荧光定量PCR方法对采集的17份患儿咽拭子进行流感样病例筛查,筛查后的阴性样本进一步进行呼吸道腺病毒核酸检测,对检测出的5份腺病毒阳性标本进行病毒分离,感染Hep-2受体细胞后共获得4份腺病毒稳定细胞毒株,用腺病毒六邻体基因作为靶基因进行序列扩增及测定,测序结果在GenBank上进行序列比较,确定其病毒亚型并进行系统进化分析。结果 17份咽拭子中5份为腺病毒PCR阳性,阳性率为29.4%,用分型引物检测并分析序列确定均为腺病毒4型。结论本次急性呼吸道病毒疫情暴发由腺病毒4型引起。     

肝硬化患者血清苹果酸脱氢酶的活性检测

目的探讨肝硬化患者血清苹果酸脱氢酶(MDH)的活性变化及其临床意义。方法 95例血清分为肝硬化组48例、肝炎组20例和正常对照组27例。采用终点法测定肝硬化患者血清MDH活性,计算MDH对诊断肝硬化的阳性率、灵敏度和特异性,并分析血清MDH与白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)的相关性。结果肝硬化组血清MDH活性为(72.60±7.90)U/L,肝炎组患者血清MDH活性(77.47±7.03)U/L,正常组血清MDH活性为(38.58±3.54)U/L。肝硬化组、肝炎组均显著高于正常对照组,有显著性差异(P<0.01),但肝硬化与肝炎组间无明显差异(P>0.05)。MDH活性与ALB、ALT、TB均无相关性。阳性判断以MDH>50 U/L为标准,其敏感度为100%,特异性为96.3%。结论肝硬化患者有MDH活性增高,可为辅助诊断肝硬化提供有价值的信息。     

荧光定量RT-PCR在流感病毒检测上的应用

目的　探讨实时荧光定量RT PCR检测方法在流行性感冒检测诊断上的意义。方法　收集集体暴发疑似流感、SARS患者的咽拭子标本 16起 2 0 7份和双份血清标本 10 4份 ,应用荧光定量RT PCR检测方法、MDCK细胞培养法和血凝抑制试验进行病原学和血清学检测。结果　 2 0 7份集体暴发疑似流感、SARS患者的咽拭子标本中用荧光定量RT PCR检测 ,阳性 79份。阳性率 38 16 % (79 2 0 7)。MDCK细胞培养 ,16起中有 13起共 14 5份咽拭子有 6 2份标本阳性。阳性率 2 9 95 % (6 2 2 0 7)。两者的阳性率差异有显著意义 (χ2 =8.6 4 ,P <0 0 0 5 )。有 9起 10 4份成功的采集了双份血清 ,经HI试验有 6 4份双份血清与H3N2亚型抗原产生血抑 4倍增长 ,阳性率 6 1 5 4 % (6 4 10 4 )。结论　荧光定量RT PCR方法检测流感病毒能够在 3～ 4h内得出结果、且操作方便、特异性强、灵敏度高。因此我们认为实时荧光定量RT PCR方法 ,可作为一种快速的流感病毒检测诊断方法。