舟山群岛地区蝙蝠博卡病毒的初步鉴定与分析

为进一步了解我国蝙蝠携带博卡病毒(Bocavirus)的分布状况和遗传多样性特征,本研究采集舟山群岛地区4种蝙蝠的肠组织样本,使用套式PCR方法进行蝙蝠博卡病毒检测,分析该地区蝙蝠携带博卡病毒的遗传多样性。结果显示,从141只蝙蝠(菲菊头蝠、马铁菊头蝠、大卫鼠耳蝠和渡濑式鼠耳蝠)体内共检测出7份博卡病毒的DNA目的条带,经测序后获得5条博卡病毒序列,系统进化分析表明蝙蝠源博卡病毒同已发现的其他博卡病毒属于不同的进化分支。序列遗传进化分析显示,5条序列的同源性介于98.9%～100%之间,与其他博卡病毒的同源性介于50.8%～77.2%之间;根据ICTV关于博卡病毒属新种的判定标准,该地区检测出蝙蝠源博卡病毒为新的博卡病毒种类。     

氧驱动雾化吸入速尿治疗小儿毛细支气管炎60例

毛细支气管炎是婴幼儿时期常见的下呼吸道疾病,临床上多发于1个月～2岁婴幼儿,尤以6个月以内婴儿居多。以喘憋、气急为主要表现,严重时常合并呼吸衰竭、心力衰竭。病程长,病情重,廖采用抗生素、抗病毒类、肾上腺皮质激素等药物静脉滴注治疗。我科对2007年1月～2009年1月收治的60例毛细支气管炎患儿采用氧驱动雾化吸入速尿治疗,疗效满意,现报道如下。     

徐州地区三带喙库蚊胃血来源分析

应用PCR技术检测江苏徐州地区三带喙库蚊Culex tritaeniorhynchus蚊胃血来源,研究其吸血习性.根据三带喙库蚊可能吸血对象(猪、人、牛、羊、鼠、鸡)的线粒体DNA细胞色素b序列的差异,设计种特异引物,建立聚合酶链反应(PCR)体系鉴定三带喙库蚊胃血来源.同时,用该方法检测猪血、人血、牛血、羊血、鼠血、鸡血中提取的DNA,验证其特异性;对吸饲人血后不同时间(1、12、24、36、48、60h)的中华按蚊进行检测,测试该方法的敏感性.该方法可从已知动物血样提取的DNA中分别扩增得到689(人)、561(牛)、453(猪)、225(羊)、485(鼠)、266 bp(鸡)大小的特异性条带;吸人血36 h内的中华按蚊均能扩增出特异性条带,在吸人血后48、60 h的中华按蚊中,均未扩出特异性条带.共检测24只现场三带喙库蚊,血源来自猪、人、鸡、牛、鼠、羊分别为7、6、3,2、2、1只,其中5只蚊虫兼吸吸血.建立的PCR检测方法可鉴定三带喙库蚊蚊胃血来源,结果稳定可靠;徐州地区三带喙库蚊不仅嗜吸猪血和人血,也可兼吸其他动物血.     

烈性呼吸道细菌多重荧光PCR检测方法建立

目的 建立多重实时荧光PCR检测炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌的方法.方法设计分别针对炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌、嗜肺军团菌毒力因子基因和特异性结构基因的引物和荧光双标记探针,优化反应体系,建立2套均可同时检测3种细菌的多重实时荧光PCR方法,以及3种分别针对上述单一细菌的二重实时荧光定量PCR方法.结果构建的多重和二重实时荧光PCR方法,检测敏感性分别达到100模板拷贝每反应和20模板拷贝每反应,并且高浓度模板对低浓度模板的扩增检测干扰不明显,对阳性菌株均100％检出,对常见杆菌检测均为阴性.结论多重实时荧光定量PCR具有可以同时筛查、经济、快速、特异性强、灵敏度好等优点,在炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌、嗜肺军团菌的病原体检测方面有较大应用价值.     

贝氏柯克斯体可视化等温扩增法建立

目的 建立针对贝氏柯克斯体的快速可视化环介导等温扩增（LAMP）方法。方法 体外合成贝氏柯克斯体的IS1111a基因,构建重组质粒。利用在线引物设计软件设计3组LAMP引物,用实时浊度仪筛选出最佳引物,同时对羟基萘酚蓝浓度进行优化,建立可视化LAMP反应体系,并评价其敏感性和特异性。结果 建立的可视化LAMP反应可准确检测出贝氏柯克斯体的重组质粒和新桥株,不与其他立克次体产生交叉反应,最低可检测到3.6×10²拷贝/反应,较普通聚合酶链反应（PCR）法的灵敏度提高了一个数量级,等同于实时浊度法和实时荧光定量PCR方法的检测灵敏度。结论 建立的可视化LAMP方法可敏感、特异地检测出贝氏柯克斯体感染,操作简单快捷,适用于基层卫生防疫和疫情现场的病原筛查。     

H7N9禽流感病毒重组质粒构建及应用

目的构建一种含H7N9禽流感病毒全长血凝素/神经氨酸酶/基质蛋白（HA/NA/M）基因的重组质粒,为核酸检测方法提供一种通用的阳性定量标准品。方法设计H7N9禽流感病毒HA、NA及M抗原基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H7N9禽流感病毒总RNA后用实时荧光定量PCR获得相应片段,用3次酶切连接方法,依次插入到pGEM-T easy质粒,进行测序确认;线性化后的重组质粒用T7 RNA聚合酶进行体外转录,RNA转录产物纯化后测定浓度,用实时荧光定量PCR构建标准曲线进行验证。结果HA、NA和M基因扩增片段大小分别约为1.7、1.3、1.1 kb,与预期相符;构建的重组质粒pGEM-HA-NA-M插入片段的测序结果与GenBank 公布序列一致;由重组质粒体外转录获得同时含有H7N9禽流感病毒HA、NA、M全长开放阅读框序列的RNA片段质量浓度为399.5 ng/μL,梯度稀释后用3种实时荧光定量PCR方法均获得了良好的标准曲线。结论成功构建重组质粒pGEM-HA-NA-M,由此质粒体外转录获得的RNA片段可作为H7N9禽流感病毒核酸快速检测方法通用的阳性定量标准品。     

一起直接饮用山溪水引起的腹泻疫情调查与处理

某山区部队某月8～10日连续发生27例腹泻病例。经调查后确定这是一起因使用山溪水清洗食品，使食品受到污染引起的腹泻疫情，现将有关情况报告如下。     

手法复位联合小夹板固定治疗四肢骨折的效果分析

目的 观察四肢骨折经手法复位后并给予小夹板固定治疗的效果。方法 选取2022年1月—2023年3月贵州省正安县中医院骨伤科临床收治的200例四肢骨折患者为研究对象,按随机数表法分为两组,每组100例。对照组单予小夹板固定,观察组联合手法复位治疗。比较两组临床效果。结果 观察组疼痛消退时间、肿胀消退时间、骨折愈合时间、正常活动时间、住院时间及四肢功能评分均优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。观察组总有效率为97.00%、并发症发生率为4.00%,均优于对照组,差异有统计学意义（χ2=9.828、6.105,P<0.05）。观察组生活质量评分高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 手法复位+小夹板固定治疗可尽早消除四肢骨折患者症状,临床疗效确切。且联合方案对其四肢功能恢复及骨折愈合、生活质量提升具有积极影响,降低并发症风险,缩短住院时间。     

某战区部队自备水源卫生学现状调查

目的 了解某战区内自备水源的卫生学状况,确保战区官兵饮水安全.方法 现地调查采样、实验室检测.结果 共调查自备水源695个,防护措施较完善的有237个,占34.1％;有水质净化和消毒措施的分别占51.2％和50.6％.共检测自备饮用水源536个,其中不合格水源数489个,占91.2％.结论 建议加强水源的卫生防护,确保...     

某大型指挥坑道自备水源卫生学现状调查

目的 了解某大型指挥坑道自备水源水质及日常管理情况.方法 现地调查采样和实验室检测.结果 调查的某大型指挥坑道12个自备水源,防护措施较完善,6个有消毒措施.卫生学指标均不合格,其中,感官性状不合格的6个,一般化学指标不合格的3个;毒理学指标不合格的4个;微生物学指标均不合格.结论 该大型指挥坑道自备水源质量不高,建议...