辽宁外科名医考略

辽宁外科名医在整骨、疮疡等病证的治疗中独树一帜,收效斐然。"妙手回春的整骨大王"孙华山善于手法整复闭合性的骨折,"肖氏整骨十法"的创始人肖雅三在整骨手法、夹板固定和用药上均有独到之处,"大连仁先整骨医院"的创始人牟仁先自成流派,"巾帼整骨大家"安淑坤形成了独特的安氏整骨体系,"疮疡四大膏"的创制者王品三在临证中多有创见,"治红伤先生"迟永清与"华佗金像奖"得主苏相良中西医并用疗效显著。他们的独特经验根于中医理论,验于临床实践,富有地域特色,值得我们研究和借鉴。     

中国株HGV部分基因的分子克隆与核苷酸序列分析

采用ＲＴ－ＰＣＲ对广东地区３３例肝炎病人血清进行ＨＧＶＲＮＡ检测，结果２例（６．１％）阳性。对其中１株输血后ＨＧＶ（ＣＨ－３）基因组５＇端非翻译区（５＇ＵＴＲ）进行分子克隆与测序，并分别与Ｌｉｎｎｅｎ等报道的２株ＨＧＶ（ＰＮＦ２１６１，Ｒ１０２９１）和Ｌｅａｒｙ等报道的ＧＢＶ－Ｃ相比较，其核苷酸序列的同源性分别为８９．２％、８８．７％、８７．１％。本研究首次证实我国华南地区存在ＨＧＶ感染。ＨＧＶ高度保守区５＇ＵＴＲ的分子克隆与核苷酸序列的测定对开展ＨＧＶ感染的基因诊断具有重要意义。     

电泳印迹和分子杂交技术在肝内HBV DNA研究中的应用

应用DNA电泳转移、生物素探针Southern杂交及不同探针重复杂交等3项新技术研究肝炎肝癌的肝内HBV DNA分子状态。经过方法学比较以电泳印迹取代毛细渗吸法对65例肝炎肝癌病人的101份肝内组织DNA进行尼龙膜快速转移和HBV DNA杂交,结果检出HBV DNA分子状态里整合型15份、游离型31份、整合型合并游离型30份。其中12例乙型肝炎标本为经生物素探针杂交检测,结果全部检出游离型HBV DNA。还有3例乙型肝炎标本和2例其它肝炎标本为经重复杂交检测,即先用~(32)P探针杂交继去探针再用生物素探针杂交,结果乙型肝炎标本两次杂交HBV DNA都阳性,其它肝炎标本两次均阴性。阳性者表现为3.2kb和2.3kb电泳位置呈现杂交带,代表HBV之松弛环状和超螺旋状结构。由于两种探针各含不同序列,故结果可对待检基因进行初步序列分析。本实验表明,上述3项技术对临床医学研究有广泛的应用价值。     

佛山市庚型肝炎病毒检测和部分基因序列分析

目的了解佛山庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染状况，分析ＨＧＶ非结构基因（ＮＳ）３区部分核苷酸序列。方法采用逆转录聚合酶链反应检测血清ＨＧＶＲＮＡ，对一例肝炎患者的ＨＧＶ（ＨＧＶＣ－ＦＳ）ＮＳ３区８１８ｂｐ片段作克隆及序列分析。结果８０例非甲－戊型肝炎患者和１０５例静脉吸毒者ＨＧＶＲＮＡ检出率分别为６．３％（５／８０）和２３．８％（２５／１０５），ＨＧＶＣ－ＦＳＮＳ３区片段核苷酸序列与ＨＧＶ－Ｕ４４４０２、Ｕ４５９６６、Ｕ３６３８０及ＨＧＶＣ９６４相同区段同源性为８５．５％、８５．６％、８８．０％、８９．２％。结论佛山存在ＨＧＶ感染，静脉吸毒者感染率较高，ＨＧＶ可能不是非甲－戊型肝炎主要致病因素。ＨＧＶＣ－ＦＳ与ＨＧＶＣ９６４同源性最高。     

丙型肝炎病毒基因高变区（E1，E2／NS1）的分子克隆及基因型鉴定

对广东省一个患者血清中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因高变区进行分子克隆及基因型鉴定。采用微粒吸附法提取ＨＣＶＲＮＡ，随机引物逆转录后进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）。所用引物位于Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１区，扩增产物８０６ｂｐ，产物提纯后定向插入ｐＢＶ２２０质粒载体，重组体转染ＤＨ５α菌株，筛选菌落经增殖后碱变性法提取质粒，再通过ＰＣＲ及酶切法鉴定阳性克隆。我们还用酶切法对此株克隆的基因型作了初步鉴定，证明属于１组Ⅱ型。     

套式PCR技术检测肝细胞癌患者血清HBV DNA

应用套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ）技术检测了１６例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，并与ＰＣＲ结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交（ＰＣＲ－ＳＢＨ）的方法作了比较。２种方法灵敏度均可达１０￣（－５）ｐｇ。套式ＰＣＲ无需制备探针，试验周期短，更适于推广。１６例ＨＣＣ患者检出ＨＢＶＤＮＡ９例（５６．２５％）。ＨＢｓＡｇ阳性组９例检出４例，ＨＢｓＡｇ阴性组４例检出２例。３例未测ＨＢＶ血清标记物均检出ＨＢＶＤＮＡ。结果表明ＨＣＣ患者血清中仍有ＨＢＶＤＮＡ低水平复制，仍具传染性。     

丙肝诊断的竞争定量PCR法的实验研究及应用

迫于丙型肝炎病毒（HCV）的基础研究与实际应用中定量病毒基因的需要，本文利用体外构建的野生型与突变型模板，建立HCVRNA的竞争性聚合酶链反应（PCR）定量检测，进行了敏感性、特异性一重复性实验，并试用于检测血清标本。结果表明，野生型与突变型模板的灵敏度达到RNA为100fg，DNA为10fg；同一条件下，野生型与突变型模板进行竞争反应存在良好的稳定的比例关系，通过已知量的参照模板可较准确地推算出血清标本中的原始浓度。因此，此野生型模板可作为HCVRNA的逆转录及PCR定性诊断中的金标准；而突变型模板则作为内参照用于HCVRNA的竞争性逆转录PCR定量。丙肝诊断从定性走向定量，在实际工作中具有重大意义。     

成人白喉疫苗

广泛应用白喉疫苗预防接种的国家,婴儿及入学儿童白喉已基本消灭。但在儿童接种率高的国家,成人亦偶有小规模爆发流行,可见免疫并不普遍。高危人群为医院工作人员,家庭保健医生,街区护士与急