YAP在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用及其机制

目的探究Yes相关蛋白(YAP)在小鼠肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及机制。方法雄性C57BL/6小鼠40只,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、溶血磷脂酸(LPA)+Sham组、IRI组、 LPA+IRI组,每组10只。缺血-再灌注6 h后,收集肝组织和血清标本。检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的水平,苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学(免疫组化)染色检测肝组织病理学改变和巨噬细胞浸润情况,蛋白印迹法分析肝组织YAP的蛋白表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法评估炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)-1和IL-6的信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果蛋白印迹结果显示,LPA+IRI组YAP的蛋白表达水平较IRI组明显升高。与Sham组相比,IRI组ALT和AST显著增高(均为P0.05);LPA+IRI组较IRI组血清ALT和AST显著降低(均为P0.05)。HE染色显示,Sham组和LPA+Sham组肝细胞形态正常;LPA+IRI组和IRI组出现肝脏淤血、肝细胞肿胀和肝小叶结构异常等病理改变;LPA+IRI组相较于IRI组病理改变程度减轻。RT-PCR提示,LPA+IRI组中炎症因子TNF-α、iNOS、IL-1和IL-6的mRNA表达水平较IRI组降低(均为P0.05)。免疫组化显示,LPA部分抑制了IRI后缺血组织巨噬细胞浸润。结论 YAP能明显缓解肝脏IRI,其作用机制与调控巨噬细胞募集和活化相关。     

白细胞介素17在器官移植排斥中的作用及机制

器官移植已成为治疗脏器功能衰竭的有效手段,但术后的移植排斥仍然是影响移植物和患者存活的主要问题.同种异体排斥反应的细胞学机制主要为T细胞介导的免疫反应.该群T细胞包括CD4+T和CD8+T细胞,其中尤以CD4+T细胞在移植排斥反应中的作用更为重要.先前研究认为Th1与排斥反应细胞免疫有关;而Th2细胞与体液免疫有关,有保护作用[1].然而,最近认为Th1、Th2细胞均参与了器官移植排斥反应.除此T辅助细胞外,新发现T辅助细胞亚群Th17细胞在移植排斥反应中也逐渐被认识.     

苏贝止咳颗粒中挥发油的质量标准初步研究

目的 建立苏贝止咳颗粒中挥发油成分的质量标准.方法 采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)对挥发油提取物的成分进行鉴定,共鉴定出10个色谱峰;采用气相色谱法(GC)测定制剂中挥发油的含量,其中 α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯采用外标法进行测定.结果 α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯线性范围分别为0.5908～75.625 mg·L-1(r=1),0.7781～24.90 mg·L-1(r=1),1.7194～220.08 mg·L-1(r=1),平均加样回收率分别为102.68％(RSD=4.82％)、108.09％(RSD=6.45％)和95.59％(RSD=5.43％)(n=9).结论 所建立的方法准确、可靠、专属性强,增加了能反映制剂临床疗效的质量控制指标,为质量标准的完善提供依据.     

紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目前,随着对肺癌诊断方法、诊断分期的进步和新药、靶向治疗药物的出现以及根据肺癌临床行为进行的多学科治疗,致使患者的生存率有所提高。2007年12月至2008年12月我院应用紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌患者85例取得较好疗效,现报告如下。     

西罗莫司对T淋巴细胞分化发育的影响

西罗莫司(SRL)最初作为低毒性的抗真菌药物,于1977年被发现具有免疫抑制作用,1989年开始将SRL用于预防器官移植后排斥反应.由于SRL在预防排斥反应中的疗效显著,不良反应较少,现在已广泛应用于各种器官移植.SRL不仅能抑制T淋巴细胞的分化发育,而且能够诱导效应性T淋巴细胞转化为调节性T淋巴细胞(Treg细胞),在体内外能明显扩增CD4+CD25+Treg细胞.     

再造浓缩丸中天麻素含量测定方法的研究

目的用反相高效液相色谱法测定再造浓缩丸中天麻素的含量。方法用乙醚萃取法去除样品中的干扰物质。采用Cromosil C18分析柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相：乙腈-0．05％磷酸溶液（1．5：98．5）,检测波长：220nm,流速：1ml·min^-1。结果天麻素进样量在0．08-1．20μg（r=0．9999）范围内呈线性,加样回收率为98．77％（RSD：5．0％）。结论前处理方法能有效去除干扰物质,保护色谱柱,所得样品组分分离度好,简便快速,结果准确可靠,可用于制备再造浓缩丸质量控制所需的供试品溶液。     

复方单硝酸异山梨酯缓释片中单硝酸异山梨酯的释放度测定

目的建立高效液相色谱法,测定复方单硝酸异山梨酯缓释片中单硝酸异山梨酯的释放度。方法以pH=5．0的磷酸盐缓冲液250mL为溶剂．转速为100r／min。以高效液相色谱法测定含量,色谱柱为LunaODS C18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为1％醋酸溶液（加0．1％三乙胺）-甲醇（55：45）,检测波长230nm,流速1．0mL／min。结果单硝酸异山梨酯质量浓度线性范围为19．66～314．56μg／mL（r=0．9999）,平均回收率为100．27％,RSD=1．78％（n=9）;体外释放符合Higuchi方程,与国外对照样品一致。结论该方法简便、准确,可作为复方单硝酸异山梨酯缓释片的释放度测定方法。     

HPLC法同时测定宣木瓜中五种有机酸和原儿茶酸的含量

目的建立同时测定宣木瓜药材中五种有机酸(莽草酸、苹果酸、柠檬酸、绿原酸、咖啡酸)和原儿茶酸的含量测定方法。方法采用HPLC法,Phenomenex luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A:0.5%磷酸二氢铵溶液(磷酸调节pH值至2.40);流动相B:乙腈进行梯度洗脱;检测波长:214 nm;流速:1.0 mL·min-1;进样量:10μL;柱温:30℃。结果莽草酸、苹果酸、柠檬酸、绿原酸、咖啡酸五种有机酸和原儿茶酸的线性范围分别为:0.049 5～0.371 g·L-1(r=1.000 0),0.066 3～0.358g·L-1(r=0.988 9),0.067 5～0.352 g·L-1(r=0.995 7),0.009 9～0.080 2 g·L-1(r=0.991 0),0.008 81～0.062 2 g·L-1(r=0.992 1),0.010 1～0.090 2 g·L-1(r=0.993 3),平均加样回收率分别为:97.2%(RSD=2.0%)、99.6%(RSD=4.1%)、101.0%(RSD=1.6%)、98.4%(RSD=2.3%)、99.5%(RSD=2.1%)、101.0%(RSD=1.4%)。结论该实验建立了同时测定木瓜中五种有机酸和原儿茶酸的HPLC检测方法,操作简便,可靠,灵敏度较高,具有较好的重复性和稳定性,可用于宣木瓜药材的质量控制。     

药物中间体2-氰基-4-甲基联苯的合成

2-氰基-4-甲基联苯(1)是生产新型抗高血压药物坎得沙坦(candesartan)[1]和依伯沙坦(irbesartan)[2]等的重要中间体,国外文献[3,4]均未详细报道该化合物的合成工艺.本文介绍以2-氰基-4-甲基联苯为原料,经四步反应制备(1).该工艺条件温和,适宜规模化生产.     

网络药理学联合灰色关联分析黄芩抗呼吸道合胞病毒小鼠肺炎的药效物质基础研究

目的 探讨黄芩抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)的药效物质基础。方法 运用网络药理学分析黄芩抗RSV的作用靶点；UPLC-QTOF-MS/MS定量表征黄芩的共有成分，建立RSV肺炎小鼠模型，检测小鼠体质量、肺指数、肺部病理切片以及IL-6的含量，采用灰色关联度方法对50批次黄芩样品谱-效数据进行关联分析，挖掘黄芩抗RSV肺炎小鼠的有效成分。结果 蛋白互作网络结果确定黄芩抗RSV核心靶点为AKT1、IL-6、TNF、MAPK3、SRC、HSP90AA1、PTGS2；整体动物实验证明，黄芩可不同程度地下调肺指数及炎性因子IL-6含量；灰色关联度分析显示黄芩中抗RSV的化学成分主要为黄酮苷类成分。结论 采用网络药理学方法确定药效靶点，灰色关联度分析成分-靶标数据，挖掘药效物质基础的方法可行，黄芩苷、汉黄芩苷、白杨素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷、白杨素-6-C-阿拉伯糖-8-C-阿拉伯糖苷、白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷等黄酮苷类成分可作为黄芩的Q-Markers用于质量评价。