酒精性肝病发病的免疫学机制和调节性T细胞治疗展望

近年来嗜酒、暴饮者增多，使酒精性肝病（alcoholliverdisease，ALD）的发病率增加，并呈年轻化趋势。75％-100％的酗酒者出现脂肪肝，其中8％～12％的患者发展为肝硬化，其中行肝移植治疗的患者术后的生存率比肿瘤等其他疾病低。此外，酒精性肝炎（alcoholhepatitis，AH）患者的住院死亡率高60％。AH是ALD的慢性活动性改变，与肝功能衰竭和肝硬化的发生关系密切。     

Th17细胞在移植排斥反应中的作用

以往认为,参与细胞免疫的CD4+T淋巴细胞可分为Th1和Th2等细胞亚群,他们各自以不同的角色参与免疫应答.近年来,研究发现了一类新型的效应性T淋巴细胞亚群Th17细胞.     

2,3—0—二烷基6—0—烯丙基—β—环糊精衍生物的合成研究

本文对一新的改性β－环糊粗，２，３－０－二烷基６－０焕丙基－β－环糊精（烷基．正丁基，正戊基）的合成，分离、分析测试进行细致的研究，探索了此类β－不糊精衍生物的合成方法。     

检测HCA-RNA的RT-PCR技术改进与应用

以台湾株丙型肝炎病毒的非结构区基因序列(HCV-T3)设计内外五条呈巢式排列的引物，结合AGPC核酸一步抽提法，寡聚接苷酸撩针5’末端标记法和Southern电泳转移杂交法，建立简捷特异检测HCV-RNA的逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术。应用这一技术对121例非甲非乙型肝炎患和45例抗HCV阳性的慢性乙型肝炎患进行了血浆HCV-RNA检测，结果阳性率分别为66．1％(80／121)和66．7％(30／45)。本对这一技术的方法学、HCV-RNA与抗HCV的关系、血液暴露史对HCV感染的意义以及HBV与HCV的重叠感染进行了讨论。     

用热启动聚合酶链反应检测血清中乙型肝炎病毒DNA技术的建立和应用

建立了热启动聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的技术。ＰＣＲ所有反应成分被２次加样。先加Ａ液（含ｄＮＴＰｓ、一对引物和ＭｇＣｌ＿２）与一粒石蜡珠。７０℃加热后冷却至室温，使蜡珠先融化后凝固形成蜡盖封住Ａ液，然后在向其上加入Ｂ液（含耐热性ＤＮＡ聚合酶、ＨＢＶＤＮＡ模板和ＫＣｌ）并开始循环扩增。当反应管内第一次变性温度升至６０℃以上时，中隔蜡层融化，蜡上浮形成防蒸发屏障，Ａ、Ｂ两液则由于热分子运动而混匀，从而保证引物与靶基因在较高温度下严格退火以减少错导非特异性扩增和引物聚体形成。提高了ＰＣＲ的特异性和灵敏性，应用这种技术对７６例肝炎血清进行了检测，结果ＨＢＶＤＮＡ检出率为６８％，其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为１００％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢｅ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为７０％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢＣ（＋）血清检出率为８９％；抗ＨＢＣ（＋）血清检出率为对％；标记全阴性血清检出率为３３％。     

重组干扰素治疗慢性丙型肝炎的临床及肝组织学疗效评价

报告８４例慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者，通过临床、血清学、肝组织学、分子生物学和免疫组织化学等方法，观察应用重组α－干扰素加传统护肝治疗的效果，疗程２４周，并与单用传统护肝治疗的对照组治疗前后各项指标变化比较。疗程结束时结果显示：治疗组６４例中，血清ＡＬＴ复常率为７０．３％，ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转率为６７．２％，肝组织学好转率为６５．６％，肝组织内ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转率为５１．５％，肝组织内ＨＣＶ－Ａｇ抗原的免疫组化检出率从治疗前的１５．６％减至治疗后的６．３％，分别显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。疗程结束后随访３～６个月，测定ＨＣＶ－ＲＮＡ并动态观察血清ＡＬＴ的变化，部分病人有复发，但治疗组ＡＬＴ复常率及ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转率仍达７０．０％。     

聚合酶链反应技术结合酶切杂交研究单项抗乙型肝炎病毒核心抗原阳性者的乙型肝炎病毒感染

以聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增单项抗乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢｃ）阳性血清的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ。内外两对引物均选自ａｄｒ、ａｄｗ和ａｙｗ３种亚型ＨＢＶ基因组Ｃ基因区的共有序列，扩增产物分别长４２８ｂＰ和６６４ｂＰ，共含一个ＢｇｌⅡ酶切点，酶切后前者产生２９９ｂＰ和１２５ｂＰ、后者产生４０６ｂｐ和２５４ｂｐ各一个限制性片段。以另一条基因位置处于内引物对之间的寡核苷酸制备３２Ｐ－５＇末端标记的探针对之进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移杂交，鉴定了扩增产物的特异性。结果从单项抗ＨＢｃ阳性的８／４２例慢性肝炎和２／１２倒无症状受测者血清中检出ＨＢＶＤＮＡ，提示现症低水平病毒复制和潜在的传染性。     

Molecular cloning, sequencing and expression of obese gene in the Chinese

Ｔｈｅｏｂｅｓｅ(ｏｂ)ｇｅｎｅ,ｗｈｉｃｈｃａｕｓｅｓｓｅｖｅｒｅｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｏｂｅｓｉｔｙａｎｄｎｏｎｉｎｓｕｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ(ＮＩＤＤＭ)ｉｎｍｉｃｅ,ｈａｓｂｅｅｎｃｌｏｎｅｄｒｅｃｅｎｔｌｙ1　Ｉｎｍｉｃｅ,ｍｕｔａｔｉｏｎｓｏｒａｂｎｏｒｍａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｉｓｇｅｎｅｃａｕｓｅｐｒｏｆｏｕｎｄｏｂｅｓｉｔｙ1　Ｔｈｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｏｂｐｒｏｔｅｉｎ(ｌｅｐｔｉｎ)ｃａｎｃｏｒｒｅｃｔｔｈｅｏ…     

低剂量雷公藤甲素预处理减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制

目的 探讨雷公藤甲素(TPT)预处理减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其作用机制.方法 将60只雄性C57BL/6小鼠分成4组,每组15只.(1)TPT手术组:手术方法参照Kobayashi法,术中夹闭肝门静脉左支、肝动脉左支及左肝管,90min后开放血管,建立小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型;(2)TPT假手术组:手术方式同TPT手术组,但术中不阻断血流,仅用生理盐水(NS)纱布覆盖切口90 min;(3)NS手术组:手术方式同TPT手术组;(4)NS假手术组:手术方式同TPT假手术组.两TPT组小鼠于术前1周开始腹腔注射TPT0.1 mg·kg-1·d-1,术前1 h加用1次,而两NS组同期仅腹腔注射等体积无菌NS.再灌注后24 h,检测各组小鼠肝功能和观察肝组织病理学变化,采用流式细胞术检测各组TH17细胞占单个核细胞的比例,采用实时聚合酶链反应(PCR)检测各组肝组织中IL-17和ROR-γt mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-6、IL-17和TGF-β的含量.结果 TPT手术组肝功能的损伤较NS手术组明显减轻(P＜0.05);NS假手术组、TPT假手术组、NS手术组和TPT手术组TH17细胞占单个核细胞的比例分别为(0.72±00.23)%、(0.41±0.18)%、(4.26±0.82)%和(1.77±0.53)%;两TPT组IL-17和ROR-γt mRNA的表达量以及外周血中IL-6、IL-17和TGF-β的含量,均明显低于相应的NS组(P＜0.05).结论 低剂量TPT预处理能够减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤,这可能与TPT预处理抑制小鼠体内Th17细胞分化、发育及其功能有关.