线粒体ATP敏感性钾通道在大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

目的探讨线粒体ATP敏感性钾通道在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法建立70%的大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,SD大鼠随机分为6组,假手术组（sham,S）,缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion,IR）组,对照组（control,C）,二氮嗪（diazoxide,DZ）预处理组,DZ＋ 5-羟基葵酸（5-hydroxydecanoate,5-HD）预处理组,以及5-HD预处理组。再灌注后,取肝脉血检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平,取肝脏组织TUNEL法检测缺血肝脏细胞凋亡指数（apoptotic index,AI）,免疫组化检测Bcl-2,Bax,caspase-3表达。结果其他各组与S组相比,血清ALT、AST水平升高（P〈0.05）,C组与IR组之间AIX、AST水平无差异（P〉0.05）。DZ预处理组大鼠血ALT、AST水平较IR组明显改善,肝细胞凋亡减少,为（14.5±4.5）%（P〈0.05）,Bax及caspase-3表达降低,分别为15.7±5.4,15.1±6.3（P〈0.05）,而Bcl-2表达升高（18.5±5.8）（P〈0.05）,5-HD能阻断DZ的保护作用,使肝细胞凋亡（25.6±7.9）%增加,Bcl-2表达（13.4±5.7）下降,caspase-3表达（25.0±6.6）升高（P〈0.05）。单独应用5-HD时与IR组相比肝脏细胞凋亡（30.4±8.7）%和caspase-3（33.8±7.1）表达增加（P〈0.05）,Bax（31.2±7.0）和Bcl-2（9.1±3.6）差异没有统计学意义（P〉0.05）。结论线粒体ATP敏感性钾通道的开放对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,它可能是通过上调Bcl-2表达,下调Bax和caspase-3表达,抑制肝脏细胞凋亡而起作用的。     

HBV相关性原发性肝癌行综合治疗后HBV炎症与肿瘤复发的关系

目的总结乙型肝炎病毒(HBV)相关性原发性肝癌(肝癌)肝叶切除为主的综合治疗后HBV炎症与肿瘤复发之间的关系。方法回顾性分析646例肝癌患者的临床资料。采用Kaplan-Meier法计算肝癌行肝切除术为主的综合治疗后生存率和无瘤生存率,Log-rank检验比较组间差异。结果 646例肝癌患者行肝切除术为主的综合治疗后1、3和5年总生存率分别为76.12%、52.65%和38.18%,无瘤生存率分别为82.54%、62.17%和41.90%。HBV低复制组1年肿瘤复发率为22.17%;HBV高复制组1年肿瘤复发率为47.32%。两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBV的复制程度是影响肝癌综合治疗患者生存率及无复发生存率的独立预后因素,抗病毒治疗可以抑制病毒复制,延缓肿瘤复发,延长生存时间。     

CD133在肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨肿瘤干细胞标志物CD133在肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测25例手术切除的HCC原发组织、癌旁组织中CD133 mRNA的表达,分析CD133的表达与临床参数的关系.结果 HCC原发组织和癌旁组织中CD133 mRNA表达的阴性率分别为72.0%和4.0%(P<0.01);原发组织CD133 mRNA的表达与肿瘤大小、甲胎蛋白(AFP)阳性表达有关(P<0.01),与性别、年龄及组织分化程度均无关.结论 CD133的表达与HCC的大小及AFP阳性表达有关,可能在HCC的诊断及判断复发中有一定价值.     

甲硝唑结肠定位缓释片的工艺研究

目的：研制甲硝唑结肠定位缓释片。方法：通过羟丙甲基纤维素（HPMC）骨架缓释材料制备甲硝唑缓释片芯，再采用S100包肠溶衣，制备甲硝唑结肠定位缓释片，并进行体外释放度和药动学研究。结果：所制得的片剂体外释放度符合结肠释放并缓释的特征，犬的药动学研究以及大鼠的消化道药物分布研究表明，药物口服后主要在结肠中释放，胃和小肠中几乎无药物释放。结论：采用本工艺制备的甲硝唑结肠定位缓释片可达到结肠定位和缓释的效果。     

输血及血液制品与慢性HBV感染患者发生HCV重叠感染的关系

通过检测丙型肝炎抗体与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核糖核酸的方法对广东地区４４２例慢性乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者发生ＨＣＶ重叠感染的状况进行流行病学调查，分析其与输血及血制品的关系。结果显示慢性ＨＢＶ感染患者中ＨＣＶ重叠感染率为９．７３％；其发生主要与治疗性输用血浆有关。与不输血制品相比，输白蛋白、输血浆和输血浆加白蛋白引起ＨＣＶ重叠感染的相对危险度分别为２．１３，１２２．５７和１２５．８４。而且血浆输入量越大，发生重叠感染的危险性也越大。当输注血浆超过１６次，重叠感染率可达７７．７８％     

HSV-TK基因逆转录病毒重组体的构建和鉴定

利用逆转录病毒载体ｐＬＮＳＸ构建了带ＨＳＶＴＫ基因的逆转录病毒重组体ｐＬＮＳＴＫ，用磷酸钙沉淀法转染ＰＡ３１７包装细胞，经Ｇ４１８筛选抗性克隆，建立了产生重组病毒的载体产生细胞系ＰＡ３１７／ＴＫ，用ＮＩＨ３Ｔ３细胞测定病毒（ＣＦＵ）滴度为３×１０８Ｌ－１。提取ＰＡ３１７／ＴＫ细胞的ＤＮＡ和细胞上清液的ＲＮＡ，在特异性引物引导下，分别用ＰＣＲ和ＲＴＰＣＲ检测证实ＰＡ３１７／ＴＫ细胞整合了ＨＳＶＴＫ基因并产生重组病毒，为ＨＳＶＴＫ基因治疗恶性肿瘤的实验研究打下了基础。     

以二氧化硅快速提取HBV－DNA用于双阶变温PCR检测

以异硫氰酸胍裂解血清释放核酸使被二氧化硅吸附，经乙醇洗涤后用水悬浮，上清即含纯化ＤＮＡ。结合双阶变温ＰＣＲ建立一种简单快速的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检测方法。该法只需检测１０ｕｌ血清，完成提取和扩增只要３ｈ．操作很易掌握。用之检测５６例ＨＢｓＡｇ＋／ＨＢｅＡｇ＋的血清、４２例ＨＢｓＡｇ＋／ＨＢｅＡｇ－的血清和５４例ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ的血清，结果ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为８６％、５７％和１３％。应用表明这是一种简捷有效的核酸纯化和扩增方法，适于对大量临床样本作检测之用。     

三对引物聚合酶链反应扩增检测肝细胞癌肝组织中乙型肝炎病毒…

用聚合酶链反应技术检测了１６例肝细胞癌患者癌灶和癌旁肝组织中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸。所用三对引物Ｓ１／Ｓ２、Ｃ１／Ｃ２、Ｃ１／Ｃ２和Ｘ１／Ｘ２分别选自ＨＶＢＤＮＡ的Ｓ区，前Ｃ和Ｃ区，以及Ｘ区，以质粒提取ＨＢＶＤＮＡ作灵敏度测定，ＰＣＲ－ＥＢ可达１０＾－２ｐｇ，ＰＣＲ－ＳＢＨ可达１０＾６Ｐｇ，以Ｓ，Ｃ和Ｘ引物扩增，阳性率分别为４３．８％（１４／３２），７１．９％（２３／３２）和７１．９％（２３／３     

浅谈“脾开窍于口,其华在唇”

脾为"后天之本""气血生化之源",是全身营养物质的源泉,与机体各个组织和器官都有着千丝万缕的联系,《脾胃论·卷上·脾胃盛衰论》曰:"欲人之百病皆由脾胃衰而生也"。人体疾病的发生都与脾胃衰弱有直接的联系,文章就脾与口唇的联系加以论述,为脾脏象理论研究提供参考。     

HPLC 法同时测定宣木瓜中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素的含量

目的建立宣木瓜药材中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素的含量测定方法。方法采用HPLC法,Phenomenex luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.6%磷酸溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速设为1.0 ml.min-1。结果绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素线性范围分别为0.035～0.56 g·L-1(r=0.997 8),0.003 2～0.051 2 g·L-1(r=0.999 3),0.004 25～0.068 g·L-1(r=0.999 7),0.003 5～0.056 g·L-1(r=0.999 7),平均加样回收率分别为102.9%(RSD=1.04%)、99.3%(RSD=2.28%)和99.2%(RSD=2.33%)、99.5%(RSD=2.52%)。结论该方法操作简单,结果准确,具有较好的重复性和稳定性,可用于宣木瓜药材的质量控制。