HCV 5′NCR和结构蛋白编码序列的克隆及对PA317细胞的转染

目的进一步研究丙型肝炎病毒５′ＮＣＲ对结构蛋白编码基因的表达调控。方法以拼接好的ＨＣＶ５′ＮＣＲ，Ｃ，Ｅ１和Ｅ２／ＮＳ１区基因共长２５４７个核苷酸片段克隆于逆转录病毒载体ＬＮＳＸ得重组体ｐＬＨＣ２５４７，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及核苷酸序列分析等方法对重组体进行鉴定。通过磷酸钙－ＤＮＡ共沉淀法把经鉴定的重组体转染入ＰＡ３１７细胞，用Ｇ４１８进行克隆筛选，以ＮＩＨ３Ｔ３细胞测其病毒滴度。提取转染细胞ＤＮＡ及培养上清ＲＮＡ分别用ＰＣＲ和逆转录ＰＣＲ进行鉴定。结果培养上清的病毒滴度为２×１０５ＣＦＵ／ｍｌ，ＰＣＲ及逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）分别可以从转染的细胞ＤＮＡ及培养上清中扩增出ＨＣＶ的基因片段。结论目的基因已整合到细胞的基因组中并得以表达     

快速康复理念在肝癌肝切除术围手术期处理中的应用

目的：评估快速康复外科（FTS）理念应用于肝癌切除术患者围手术期的优越性。方法：297例肝细胞性肝癌患者被随机分为FTS组（135例）和对照组（162例）,FTS组采用FTS理念指导下的围手术期处理措施,对照组采用传统围手术期处理措施,比较分析两组患者术中情况,术后肠道功能恢复时间、术后住院天数、住院费用、术后不良反应及并发症情况。结果：与对照组比较,FTS组手术时间明显缩短,术后肠道功能恢复时间明显提前,术后住院天数缩短,住院费用降低;差异均有统计学意义（均P<0.05）。并发症情况两组无统计学意义（均P>0.05）。结论：FTS理念应用于肝癌切除术患者围手术期的处理安全有效的,可加速患者的康复进程。     

IMP3与IGF2在乙肝相关性肝癌组织中表达及与临床病理特征的关系

目的:研究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IMP3)与胰岛素样生长因子2(IGF2)在乙肝相关性肝癌中的表达,并探讨二者的相关性及与乙肝相关性肝癌临床病理特征的关系?方法:采用免疫组织化学法,检测82例乙肝相关性肝癌组织及对应癌旁组织中IMP3及IGF2的表达;采用实时定量聚合酶链式反应法检测32例冰冻肝癌组织中IMP3及IGF2 mRNA含量;采用蛋白质印迹法检测4例IMP3强阳性染色及4例IMP3阴性染色对应的新鲜冰冻肝癌组织中IMP3及IGF2蛋白含量?结果:IMP3在62.2%肝癌组织中表达,在癌旁组织中不表达?IGF2在59.8%肝癌组织及14.6%癌旁组织中表达?同时,IMP3与IGF2在乙肝相关性肝癌组织中表达密切相关(rn = 0.335,P = 0.002)?另外,IMP3高表达与Edmondson-Steiner 3~4级(P = 0.001)?TNM 3~4期(P = 0.001)?α-甲胎蛋白(AFP)> 200 ng/ml (P = 0.012)及伴有门脉癌栓的肿瘤(P = 0.018)均密切相关;与IMP3表达相似,IGF2高表达亦与Edmondson-Steiner 3~4级(P = 0.001)?TNM 3~4期(P < 0.001)及伴有门脉癌栓的肿瘤(P < 0.001)密切相关?结论:IMP3与IGF2在乙肝相关性肝癌组织中表达密切相关,同时,IMP3与IGF2蛋白分子的检测有助于判断肿瘤恶性分化程度及进展?     

Th17细胞在移植排斥反应中的作用

以往认为,参与细胞免疫的CD4+T淋巴细胞可分为Th1和Th2等细胞亚群,他们各自以不同的角色参与免疫应答.近年来,研究发现了一类新型的效应性T淋巴细胞亚群Th17细胞.     

PCR技术用于检测肝细胞癌石蜡包埋肝组织中的HBV DNA

用多聚酶链反应(PCR)技术检测了16例肝细胞性肝癌(HCC)患者癌灶和癌旁双份组织石蜡包埋标本中的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)。以C基因引物扩增HBV-DNA,32份标本中检出率71.87％。以新鲜冷冻肝标本作对照检出率81.25％,二者相比无显著性差别(X~=0.57,P>0.05)。以质粒提取HBV-DNA作灵敏度测定,PCR-EB可达10fg,PCR-SBH可达lag。应用非放射性的地高辛素标记探针作杂交灵敏度达~32P标记探针的水平。     

输血及血液制品与慢性HBV感染患者发生HCV重叠感染的关系

通过检测丙型肝炎抗体与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核糖核酸的方法对广东地区４４２例慢性乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者发生ＨＣＶ重叠感染的状况进行流行病学调查，分析其与输血及血制品的关系。结果显示慢性ＨＢＶ感染患者中ＨＣＶ重叠感染率为９．７３％；其发生主要与治疗性输用血浆有关。与不输血制品相比，输白蛋白、输血浆和输血浆加白蛋白引起ＨＣＶ重叠感染的相对危险度分别为２．１３，１２２．５７和１２５．８４。而且血浆输入量越大，发生重叠感染的危险性也越大。当输注血浆超过１６次，重叠感染率可达７７．７８％     

人乳头瘤病毒18型E6E7反义RNA表达重组体的构建

目的　为了探讨人乳头瘤病毒 (HPV)的致病机理和寻找由HPV所致疾病的治疗途径 ,研究了HPV1 8型E6E7反义RNA表达重组体的构建。方法　以HPV1 8型全基因质粒为模板 ,聚合酶链反应扩增出HPV 1 8型E6E7区 81 6bp片段 ,以逆转录病毒pLNSX为载体 ,构建HPV 1 8型E6E7逆转录病毒重组体 ,并以限制性内切酶酶切和Southern杂交分别鉴定插入方向和特异性检测。结果和结论　筛选出可表达HPV1 8型E6E7逆转录病毒重组体。该反义RNA表达重组体的构建为进一步研究E6E7基因的作用 ,以及探索是否能通过反义技术调控E6E7基因的表达打下基础。     

探讨医院外科系统科研管理中的执行力

科研对临床工作的支持和促进作用日益突显?如何提升科研水平更好地为临床服务,执行力至关重要?执行力有利于从整体实力的竞争中赢得主动,越来越受到外科管理者重视?执行力主要体现在谁去执行,如何执行和执行效果,外科系统科研管理的执行力要从人员和制度两方面进行完善,有利于推动外科事业的发展,激励和实现外科原始创新?     

基于抑菌药效的黄芩提取物精制工艺优选

目的 优选黄芩提取物精制工艺。方法 采用抑菌率法测定黄芩提取物抑菌药效,HPLC法测定其有效成分的量,并采用正交试验设计,以抑菌率及有效成分提取量为指标,归一值法综合评分,考察酸沉时药液浓度和pH值、2次保温温度、保温时间和静置时间的影响。并比较精制前后的提取物的抑菌药效,优选其制备工艺。结果 确定最佳精制工艺为药液浓缩到含生药0.5 g/mL,用2 mol/L盐酸调节pH值至2～2.5,80 ℃保温1 h,静置24 h,减压滤过,沉淀物加1倍量的水混悬,用40%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0,加等量95%乙醇,搅拌使溶解,滤过,滤液再次如上法酸沉,减压滤过,沉淀水洗至pH值5.0,95%乙醇洗涤,挥尽乙醇,减压干燥,即得。结论 该优选工艺所得提取物有较高的抑菌药效,工艺稳定、可行。