膀胱移行细胞癌A激酶锚定蛋白12基因转录表达与其启动子区甲基化状态的相关性

目的 探讨膀胱移行细胞癌组织中A激酶锚定蛋白12(A-kinase anchoring protein 12,AKAP12)基因mRNA表达水平和基因启动子区CpG岛甲基化程度及其与临床病理参数之间的关系.方法 用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)和甲基化特异性PCR(MSP)检测30份膀胱移行细胞癌组织及其癌旁组织中AKAP12基因mRNA的表达水平及其启动子区CpG岛甲基化状态.并用亚硫酸盐修饰后PCR产物进行克隆测序.结果 在30份膀胱移行细胞癌患者组织标本中,AKAP12在癌组织中表达下调比率为73.3%(22/30),在病理Ⅱ和Ⅲ级膀胱移行细胞癌中下调比率明显高于Ⅰ级(P=0.02).MSP检测结果显示,膀胱移行细胞癌甲基化比率为53.3%(16/30),且与膀胱移行细胞癌TNM分期(r=0.52,Pn=0.03)和病理分级(r=0.61,Pn=0.01)有明显的相关性.结论 AKAP12基因启动子区出现的异常甲基化可导致其在膀胱移行细胞癌中的表达沉默,且与膀胱移行细胞癌的发生有关.     

核心岩藻糖化运铁蛋白测定在良,恶性肝病鉴别诊断中的初步应用

利用LCA-agarose固相亲和层析法分离血清中核心岩藻糖化的运铁蛋白（cFuc-Tf），再结合运铁蛋白免疫比浊法，测定了50例正常人、44例良性肝病患者以及19例肝癌患者血清中的核心岩藻糖化运铁蛋白。结果显示正常人、良性肝病患者以及肝癌患者血清中的CFCC-Tf分别为36±34.9mg／L、40．5±34．1mg／L和167．8±104mg／L。经统计学处理，肝癌患者血清中的cFuc-Tf含量较正常人及其它良性肝病患者有极显著的升高。以cFuc-Tf＞140．7mg／L为诊断上限时，诊断肝癌的特异性为98．9％，阳性率为579％，对伴有AFP升高（＞40pg／L）之肝癌，阳性率为100％。血清eFuc-Tf测定可作为肝癌鉴别诊断的一项新指标。     

临床检验质量保证体系的重要环节:检验科对外部供应商的评价和选择

检验科的全程质量管理是一个系统工程,在全程质量保证的环节中,外部供应商(包括厂家和代理商等)所提供的产品及其服务与检验科的质量保证体系息息相关,是体系中非常关键的一环.供应商提供的产品质量与服务质量必须符合体系的要求.     

抗变形链球菌卵黄抗体的初步研制

目的 通过用变形链球菌作为疫苗免疫蛋鸡，从鸡蛋中获得抗变形链球菌特异性抗体（抗S.mutans抗体）。方法 以变形链球菌Ingbritt珠（血清型c型）作为抗原免疫蛋鸡，取鸡蛋卵黄以水溶－硫酸铵沉淀－超滤提取纯化的卵黄抗体（IgY)，以直接凝集法测定鸡血清及蛋黄中的抗体。结果 血清中首先产生抗变形链球菌的抗体，在初免后2周逐步增高，在4－5周达到高峰，而后抗体转移到卵黄中，制备的卵黄抗体经电泳检测，相对分子质量约为210000，纯度达到75％以上，每只鸡蛋中能提取约150mg的IgY。结论 变形链球菌菌苗免疫蛋鸡可使鸡蛋产生高效价IgY。     

T,Tn和S—Tn抗原的检测在卵巢肿瘤诊断中的应用

迄今用于诊断卵巢肿瘤的相关抗原很关，主要有ＣＡ－１２５、ＣＡ－５０、ＣＡ１９－９、ＳＬＸ，ＣＡ７２－４等，本文介绍三种特异性较高，用于卵巢肿瘤早期诊断的糖链性肿瘤标志物。     

色素上皮细胞衍生因子对脑胶质瘤细胞凋亡的影响

目的 本研究试图通过检测人脑胶质瘤U87细胞中色素上皮细胞衍生因子(PEDF)以及凋亡相关蛋白的表达,探讨其表达在胶质瘤的增殖和细胞凋亡调控中的作用.方法 将100μg/ml的PEDF加入U87细胞中(PEDF处理组),同时以未加PEDF蛋白的胶质瘤细胞作对照组(U87con),采用四甲基偶氮唑蓝法榆测PEDF对胶质瘤细胞U87增殖率的影响;流式细胞术检测胶质瘤细胞是否凋亡;Western-blot(免疫印迹)检测PEDF处理组凋亡相关蛋白p16的变化.结果 实验数据显示:与对照组相比,当PEDF浓度为100μg/ml时,对U87的抑制率为(54.29±0.62)%,PEDF处理组胶质瘤细胞的增殖明显减慢(t=2.63,P＜0.05);PEDF处理过的凋亡细胞产生明显增多,annexin V+和PI-的细胞为(21.84±0.36)%,提示胶质瘤细胞处于凋亡早期(t=2.86,P＜0.05);PEDF诱导的发生凋亡的胶质瘤细胞中,p16蛋白的表达量明显增加(0.82±0.09),与对照组相比(0.43±0.03),差异具有统计学意义.结论 PEDF与p16协同作用,可能在胶质瘤细胞凋亡的调控中起着重要的作用,从而抑制胶质瘤细胞增殖.     

结直肠癌和息肉病人中的T抗原的检测

为验证Ｔ抗原检测对结直肠癌普查的价值，用Ｓｈａｍｓｕｄｄｉｎ和Ｅｌｓａｙｅｄ介绍的半乳糖氧化酶法，对１５６例不同对象的直肠粘液标本进行Ｔ抗原检测。结果发现，３２份结直肠癌和５５份结直肠息肉病人的标本中，Ｔ抗原阳性率分别为８４．４％和２９．１％，与６９份对照组标本的阳性率（７．２％）相比，差异均有极显著性（Ｐ＜０．００１和Ｐ＜０．０１）。Ｔ抗原检测在已确定的结直肠癌中，敏感性为８４．４％，特异性为９２．８％。Ｔ抗原检测方法简便，结果易重复，且具有较高的敏感性和特异性，因此，颇具潜在的结直肠癌筛选普查的应用价值，同时也为结直肠息肉的筛选提供了一种可供选择的方法。     

脱氢表雄酮调节HepG2/GFP-HBx细胞p16基因甲基化及其与细胞周期和凋亡的相关性

目的 探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用.方法 以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检测p16基因甲基化水平.比较分析HBx与p16基因启动子甲基化、DHEA与各检测指标的关系.结果 HepG2/GFP-HBx细胞与HepG2细胞和HepG2/GFP细胞相比,细胞的增殖速度提高(P<0.05),G0/G1期细胞减少,S期细胞增多(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子呈现高水平甲基化, HepG2和 HepG2/GFP细胞呈现高水平非甲基化.100 μmol/L的DHEA使三种细胞的增殖速度降低(P<0.05),G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P<0.05),凋亡率提高(P<0.05).DHEA可下调HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平,但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响.结论 HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化,并缩短细胞周期抑制细胞凋亡;DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平,延长细胞周期促进细胞凋亡,在无HBx基因整合的情况下,DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现.     

虚拟中心实验室及其质量保证体系

继在荷兰(1995)、英国(1996)建立虚拟中心实验室(Virtual Central Laboratory,VCL)后,为适应临床医学的发展,将日益增长的临床药物的实验室研究从各地方的某个实验室转向中心实验室已成为一种趋势.选择中心实验室做研究基于下列几个原因:     

Lipocalin型前列腺素D合酶分子特征及其临床研究

Lipocalin型前列腺素D合酶催化前列腺素H2 转化为前列腺素D2 ,是Lipocalin超家族中唯一具有酶活性的成员 ,主要存在于哺乳动物的脑脊液、精液等体液中。本文就人的前列腺素D合酶的分子特征、体内分布、生理功能及临床研究方面作一介绍