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背景:骨髓间充质干细胞具有极强的自我复制能力和多向分化潜能,但当体外分离培养的骨髓基质干细胞移植到体内后,其分布和定居情况不明,这关系到骨髓基质干细胞是否可以作为靶细胞治疗应用于临床。目的:探索绿色荧光蛋白标记的大鼠骨髓间质干细胞(MSCs),经不同途径移植到同种异体大鼠,其定居于肝脏的能力。设计:析因设计。单位:广东省第二人民医院普外科/中山大学博士后科研基地,南方医科大学珠江医院普通外科,中山大学附属第三医院器官移植科。材料:实验于2003-01/2004-12在解放军第一军医大学基础部药理教研室完成。选取清洁级成年SD大鼠36只,随机分为5组:CCL4 门静脉移植组(6只)、门静脉移植对照组(6只)、CCL4 尾静脉移植组(6只)、尾静脉移植对照组(6只)、混合组(12只)。方法:①从大鼠骨髓中分离培养获取骨髓间充质干细胞,以绿色荧光蛋白进行标记,体外扩增后,以细针移植骨髓间充质干细胞悬液,移植量为0.5mL/100g。②CCL4 门静脉移植组:骨髓间充质干细胞移植前3d,每天按20g/L的CCL42.5mL/kg体质量灌胃饲养,首次计量加倍,标记的骨髓间充质干细胞从门静脉移植。门静脉移植对照组:骨髓间充质干细胞移植前正常饲养,标记的骨髓间充质干细胞从门静脉移植。CCL4 尾静脉移植组:骨髓间充质干细胞移植前3d,每天按20g/L的CCL42.5mL/kg体质量灌胃饲养,首次计量加倍,标记的骨髓间充质干细胞从尾静脉移植。尾静脉移植对照组:移植前正常饲养,标记的骨髓间充质干细胞从尾静脉移植。混合组:前4组条件下,各设2只大鼠移植未标记的骨髓间充质干细胞;另设CCL4喂养3d和正常喂养大鼠各2只,不行骨髓间充质干细胞移植。③于移植后的第3,7天,通过荧光定量PCR检测各组移植的骨髓间充质干细胞在大鼠肝脏的表达。主要观察指标:①骨髓间充质干细胞的分离纯化、体外扩增及表型鉴定结果。②绿色荧光蛋白标记骨髓间充质干细胞结果。③移植同源异体骨髓间充质干细胞后大鼠的生长情况观察。④各组肝脏组织中绿色荧光蛋白阳性DNA数的定量检测结果。结果:实验选取SD大鼠36只全部进入结果分析。①Percoll梯度分离液分离大鼠骨髓,所获得的细胞传代、扩增后,形态呈基本一致的梭性。细胞表面不表达CD34与CD45,而表达CD29,CD44,CD90等骨髓间充质干细胞的表面标志,是骨髓中区别于造血干细胞的另一群处于未分化状态的非定向干细胞。②骨髓间充质干细胞转染24h后即可见发绿色荧光的细胞。48~72h阳性细胞明显增多,强度增强,高倍视野下转染率达20%~30%,多为明亮的绿色荧光的细胞。作为对照的骨髓间充质干细胞中未发现发绿色荧光的细胞。③所有大鼠从不同途径移植标记或未标记的同源异体骨髓间充质干细胞后,第1天精神、食欲差,少活动;移植后第2天基本恢复正常饮食和精神,各组大鼠之间无明显差异。④除混合组外,其余各组于移植术后第3,7天,肝脏内均可检测到含绿色荧光蛋白阳性细胞。且CCL4 门静脉移植组、CCL4 尾静脉移植组肝脏组织中的绿色荧光蛋白阳性DNA数显著高于门静脉移植对照组、尾静脉移植对照组升高(P<0.05)。结论:干细胞定居于肝脏的时间与细胞数量可能与肝脏是否受损有关,与移植途径关系不密切。正常动物肝脏未受损情况下,干细胞可定居于肝脏,定植的细胞量与移植途径、移植后时间相关。 相似文献
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目的 为了落实“以人为本,以患者为中心“的整体护理,进一步了解乳腺疾病患者对健康教育的需求.方法 用自行设计的调查表对本科住院的乳腺疾病患者150例手术患者进行问卷调查.结果 64%患者选择健康的教育最佳时间为术前,58%选择健康教育实施者为医生,48%选择护士,70%愿意主动参与健康教育活动,对健康教育方式的选择呈多样化.针对上述特点,提出了对患者实施健康教育的对策.结论 根据患者的需求提供健康教育,能使健康教育工作更具有科学性,针对性,实效性. 相似文献
84.
目的 研究腹股沟区以及内环周边局部解剖学特点,为腹腔镜完全腹膜化腹腔内置补片修补术(TIIPOM)提供准确的临床应用解剖.方法 尸体18具,男11具,女7具,共36侧,解剖腹股沟区以及内环周边结构,测量该区域神经及血管与相应解剖学.结果 髂腹下神经髂前上棘内侧(4.10±0.89)cm处穿越腹内斜肌,在距耻骨联合上缘(5.02±1.46)cm处穿过腹外斜肌腱膜;髂腹股沟神经在髂前上棘内侧(3.09±0.81)cm处穿过腹内斜肌,于耻骨结节上方距耻骨联合上缘(3.84±0.89)cm处穿过腹外斜肌腱膜;建立内环周边局部解剖学模型.结论 量化测量腹股沟区重要结构以及建立内环周边局部解剖学模型对减少TPIPOM术中、术后并发症可提供重要的参考价值. 相似文献
85.
腹腔镜治疗小儿急性腹股沟嵌顿性斜疝45例报告 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨暖腔镜治疗小儿急性腹暖沟嵌顿性斜疝的临床应用价值。方法:2002年1月至2006年12月,应用腹腔镜手术治疗小儿急性愎股沟嵌顿性斜疝45例。其中男42例,女3例,10周~7岁,平均3.8岁。手法复位不成功后,立即行腹腔镜手术。腹腔镜下还纳内容物.检查肠管,并行内环口高位结扎术,脐正中襞覆盖内环口及其周围。结果:45例均在腹腔镜下复位成功,无中转开腹,平均手术时间30min(10—50min),肠鸣音恢复时间6.2h(4.0~10h),住院4.5d(2~7d),无并发症发生、随访6~48个月,平均26个月,无复发及睾丸萎缩。结论:腹腔镜治疗小儿急性嵌顿性斜疝具有直视下可同时还纳疝内容物,检查嵌顿器官,修补疝内环口等优点。术中内容物复位容易,住院时间短,术后康复快,值得推广。 相似文献
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目的应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究人肝细胞生长因子(hHGF)转染肝癌细胞系后基因表达谱的差异,分析hHGF抗肝纤维化的信号转导途径。方法应用包含20000条人类全长基因的寡聚核苷酸芯片ImaGene3.0检测hHGF转染的肝癌细胞系基因表达谱差异,并选择其中参与肝纤维化过程的存在表达上调基因[信号转导和转录激活因子1(STAT1)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)]用RT-PCR方法进行验证分析。结果基因芯片筛选出存在差异表达的基因,其中包括转录因子、细胞周期素、细胞因子相关蛋白、糖脂类物质代谢相关酶及细胞信号转导相关因子等,RT-PCR验证参与肝纤维化过程中的几种存在表达差异的基因,其中STAT1和MAPK1表达明显上调,与基因芯片分析结果一致。结论hHGF转染肝癌细胞系存在基因表达差异,可能影响细胞周期的调控、物质代谢相关过程及细胞信号转导系统,hHGF可能通过激活JAK/STAT通路和MAPK通路发挥其抗肝纤维化作用。 相似文献
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目的 探讨腔镜治疗分化型甲状腺癌的可行性和有效性.方法 回顾性分析我科行腔镜治疗的12例分化型甲状腺癌.甲状腺组织行全切或一侧腺叶全切除加峡部及对侧次全切除,双侧颈部淋巴结清扫术按中央区颈淋巴结清扫术式进行.12例均接受术后甲状腺素片替代治疗.结果 12例无手术死亡,术后并发症2例为声音嘶哑,1例手足麻木,1例暂时性甲状旁腺功能减退.清除淋巴结0~13枚,平均7.6枚/例,1例双侧淋巴结均阳性,5例一侧淋巴结阳性,6例双侧淋巴结均阴性.病理结果均为乳头状癌.12例均获30~62个月(平均50.4个月)随访,均存活,无复发.结论 分化型甲状腺癌行腔镜甲状腺切除联合颈部中央区淋巴结清扫术有一定的安全性,在一定程度上能兼顾手术彻底性和颈部的美容效果. 相似文献
88.
良性胆管狭窄形成机制的实验研究 总被引:8,自引:1,他引:8
目的:探讨良性胆管狭窄形成机制。方法:通过制作犬胆管损伤修复模型,术后采用免疫组化SP法法对巨噬细胞(MΦ)、TGF-β1及α-SMA在胆管愈合过程不同时期组织中的表达和分布进行研究。结果:MΦ、TGF-β1及α-SMA愈合过程中表达较强,且持续较长时间。MΦ阳性表达于粘膜固有层;TGF-β1主要表达于肉芽组织、成纤维细胞、MΦ及血管内皮细胞。α-SMA表达于肌纤维细胞胞浆。结论:MΦ、TGF-β1及α-SMA高表达是造成胆道愈合过程成纤维细胞增殖旺盛、细胞外基质过度沉积、胆道瘢痕性挛缩的重要因素。 相似文献
89.
目的探讨中晚期原发性肝癌(HCC)经门静脉、肝动脉双重介入治疗使肿瘤缩小后切除的疗效及意义。方法30例中晚期肝癌患者(肿瘤直径8.0~20.0cm,平均10.2cm)在超声引导下行门静脉化疗及经皮穿刺肝动脉化疗栓塞(TACE),观察肝功能,AFP,各肝叶体积及不良反应,并择期手术切除肿瘤。结果手术前肿瘤平均直径缩小至4.9cm,末次TACE距手术时间为1~3个月,平均1.6个月。25例AFP阳性中9例转正常。30例患者中,行肝段、联合肝段或肝部分切除25例,左半肝切除4例,左外叶切除1例。切除肿瘤中各有60%~100%坏死,其中12例100%坏死。1、3、5年生年率分别为80%、68%、59%。结论术前经门静脉、肝动脉双重介入治疗可为一期不能切除的中晚期肝癌患者提供二期手术机会,提高手术的安全性,对预防转移、延迟复发、改善预后有肯定意义。 相似文献
90.
低位直肠癌腹腔镜辅助下经肛门拖出式吻合保肛术的临床研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨腹腔镜经肛门拖出式吻合保肛术治疗低位直肠癌的可行性、安全性、根治性及近期临床疗效。方法回顾性分析我院2002年1月-2006年12月行低位直肠癌根治术65例的临床资料。其中,行腹腔镜低位直肠癌拖出式吻合保肛术28例(腹腔镜组),直肠癌低位前切除术37例(开腹组)。分析比较两组的手术方式、手术学指标、肿瘤学指标和近期疗效。结果腹腔镜组中转开腹1例。两组在手术时间、切除标本长度、清扫淋巴结数量、肠管远切缘长度方面无显著性差异(P〉0.05)。腹腔镜组术中平均出血量少、肠道功能恢复快,显著优于开腹组(P〈0.05)。两组平均随访35个月。腹腔镜组和开腹组术后并发症发生率分别为5.9%和6.5%;复发率和总生存率分别为3.6%、5.4%和96.4%、94.6%,均无显著性差异(P〉0.05)。结论腹腔镜经肛门拖出式吻合保肛术治疗低位直肠癌能够严格地遵守肿瘤学根治性原则,安全、可行,并具有出血少、住院时间短等优点。 相似文献