探讨地西他滨短时刺激对RAK细胞免疫表型及抗癌活性的影响北大核心CSCD

目的:探讨地西他滨(DAC)对重组人纤维连接蛋白活化杀伤细胞(RAK)增殖、免疫表型及抗肝癌效应的影响。方法:采用RetroNectin、CD3单抗及rhIL-2诱导外周血单个核细胞以培养RAK细胞,培养第1天加入不同浓度的DAC(0、50、500、1 000、2 000、3 000 nmol/L)刺激24 h后,全量换液。培养第4、7、10、12天,采用血球计数仪进行细胞计数,CFSE检测细胞增殖水平;流式细胞术检测不同培养时间各浓度DAC刺激的RAK细胞的免疫表型;Annexin-Ⅴ/PI检测细胞凋亡水平;以CD107a、IFN-γ、穿孔素、颗粒酶-B表达水平评估各组RAK细胞的抗肝癌效应。结果:随着培养时间延长,DAC浓度越高,细胞增殖抑制越明显(P<0.05)。与对照组相比,DAC短时刺激的RAK细胞在培养10 d后,高浓度DAC组(≥1 000 nmol/L)RAK细胞CD4比例显著增加,CD8比例及CD4+和CD8+的中央记忆细胞(TCM)比例呈下降趋势(P<0.05)。培养第12天NKT水平显著升高(P<0.05),随着DAC浓度增高细胞凋亡水平显著升高(P<0.05)。与其他DAC浓度组相比,1 000 nmol/L DAC刺激组CD107a、IFN-γ、穿孔素表达显著升高(P<0.05)。结论:RAK细胞经1 000 nmol/L DAC短时刺激后,可提高CD4、CD4+TCM及NKT比例,增强对肝癌细胞的细胞毒效应。     

蛋白质谱技术预测大鼠心脏移植后急性排斥反应

目的 探讨蛋白质谱技术对大鼠心脏移植后急性排斥反应的预测.方法 建立颈部异位异种大鼠心脏移植模型.(1)急性排斥A和B组,供受体不作预处理.(2)治疗A和B组,受体术前1d腹腔注射环孢素A(CsA) 20 mg/kg,术后每天10 mg/kg.A和B组分别在术后5d和7d取血液标本及移植物(供心)标本.(3)空白组,取大鼠移植前血液及心肌组织作标本.应用蛋白质谱技术对各组的血清及心肌组织蛋白质样本进行质谱测定,统计分析各组之间的差异蛋白质,并比较分析差异蛋白质的峰强度.结果 与空白组血清比较,急性排斥A组与之存在7个差异蛋白质峰,急性排斥B组与之存在11个差异蛋白质峰.急性排斥A组与治疗A组比较,有4个差异蛋白质峰,急性排斥B组与治疗B组比较,有6个差异蛋白质峰.与空白组心肌组织蛋白质比较,急性排斥A和B组与之分别存在7个和13个差异蛋白质峰.以上比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 正常与急性排斥反应后不同时相点血清及心肌组织中的蛋白存在明显差异,这种差异蛋白可能与急性排斥反应相关.     

Grb2的抑制对K562细胞侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨Grb2的抑制对K562细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 pSilence-4.1CMV-Grb2原核表达载体的构建并应用脂质体介导法将其转染至人慢性髓细胞性白血病细胞K562,后以潮霉素筛选稳定表达siRNA的细胞克隆.应用Western blot和RT-PCR技术,检测转染Grb2 siRNA重组质粒的K5...     

单倍体相合细胞移植诱发小鼠移植物抗肿瘤效应的分析***★

目的：异基因造血干细胞移植是治疗恶性肿瘤的一种有效方法，但在异基因造血干细胞移植时，如何在减轻移植物抗宿主病的同时保留并加强移植物抗肿瘤效应是目前临床面临的一大课题。观察输注经与未经60Co照射的单倍体相合细胞治疗CB6F1小鼠肝癌模型中移植物抗宿主病临床表现，探讨输注经照射单倍体相合细胞在治疗实体瘤中减轻移植物抗宿主病的作用。 方法：实验于2006-03/2007-03在福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室和福建省疾病预防控制中心动物房完成。①实验材料：来源于BABL/C小鼠的肝癌H22细胞株由武汉大学中国典型培养物保藏中心提供。SPF近交系小鼠由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：以皮下接种肝癌细胞（H22）的CB6F1（BABL/C×C57BL/6杂交鼠，简称F1）雌性小鼠为受体鼠，经环磷酰胺腹腔化疗后，取C57BL/6小鼠的新鲜骨髓及脾脏细胞作为供体细胞，供体细胞分为经60Co照射和未经60Co照射。将F1小鼠随机分为3组：单纯化疗组、化疗+未经60Co照射细胞组、化疗+经60Co照射细胞组。观察3组小鼠移植物抗宿主病表现，并给予临床评分。③实验评估：于移植后第17天取小鼠皮肤、肠、肝、脾组织制备病理切片，观察移植物抗宿主病病理学改变所反应的情况，并检测小鼠瘤重和抑瘤率。 结果：①化疗+经60Co照射细胞组小鼠移植物抗宿主病的临床表现明显轻于化疗+未经60Co照射细胞组（P < 0.05）。②化疗+经60Co照射细胞组小鼠的皮肤、肠、肝、脾组织移植物抗宿主病的细胞病理学改变轻于化疗+未经60Co照射细胞组。③单纯化疗组与化疗+未经60Co照射细胞组、化疗+经60Co照射细胞组瘤重比较差异显著[（1.34±0.45） g，（0.6±0.38） g，（0.28±0.15） g，P < 0.05]。化疗+未经60Co照射细胞组抑瘤率为55.22%，化疗+经60Co照射细胞组抑瘤率为79.22%。 结论：供体细胞经7.5Gy 60Co照射的单倍体相合移植能诱发荷H22实体瘤小鼠产生移植物抗肿瘤效应，同时降低移植物抗宿主病的程度。     

恙螨生物系统分类的研究

恙螨幼虫是恙虫病的传播媒介.恙螨的分类均以幼虫的外部形态作为分类依据.随着恙螨幼虫种类发现的日益增多,许多近缘种、姐妹种因其形态非常接近,测量数据常常重迭造成种间复盖而给分类造成很大困难.尤其是具有医学意义的纤恙螨属中种类繁多,问题尤为严重. 目前国内外学者都在着手这方面的解决办法的研究,试图解决正确定种的问题.有的以幼虫在实验室内饲养获得成虫,从成虫形态获得辅助分类的特征,有     

BABL/C×C57BL/6杂交F1代小鼠H22肝癌实体瘤模型的建立

目的探讨H22细胞在BABL/C×C57BL/6杂交F1代小鼠的成瘤性,为研究移植物抗肿瘤效应和移植物抗宿主病提供实验对象。方法BABL/C来源的H22肝癌细胞接种于杂交F1小鼠皮下,观察成瘤状况,并用流式细胞仪检测H22细胞的主要组织相容抗原复合物分子。结果每只F1小鼠接种2×106个H22细胞时,成瘤率为100%,无自发缓解;接种第14天,肿瘤体积的变异系数23%~34%;H22细胞的H-2Kd表达率(75.70±9.32)%。结论H22细胞可成功地接种于F1小鼠皮下成瘤,建立杂交F1代实体瘤动物模型。     

SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展

SELDI蛋白芯片技术全称为表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF—MS）是近年用来研究蛋白质组学的一项新的技术平台，具有高通量、高效率、高灵敏度等特点，可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成，在基础医学研究、临床疾病诊断以及药物研发方面显示出广阔的应用前景及临床意义。文章就其技术组成、原理、特点和在肿瘤早期诊断中的应用及发展前景作一综述。     

骨髓细胞移植对梗死区心肌基本结构及左心室功能的影响

目的 探讨骨髓细胞移植对梗死区心肌基本结构及左心室功能的影响。方法 骨髓细胞注射人心肌梗死区域，1、2、4、8周后取心肌标本，组织切片染色观察组织结构；术后1、2、4、8周通过微机生物信号记录分析系统测定左心室功能指标。结果 移植组梗死区心肌观察到带荧光的骨髓细胞，部分已分化成肌源性细胞，电子显微镜观察到不同分化阶段的新生心肌细胞，并与成熟心肌细胞以闰盘相联接。HE染色显示对照组梗死区结构紊乱，而移植组梗死区内细胞呈有序排列；VG染色显示移植组胶原纤维融合较少，排列基本处于有序状态。移植组左心室功能的恢复明显优于对照组，且其恢复随时间的延长而增加。结论 骨髓细胞移植后对梗死心肌的基本结构起到了保护作用，并可促进左心室功能的恢复。     

晚期肝癌的化学免疫治疗

我们采用静脉或口服化疗和免疫效应细胞(CTL)输注为主体的化学免疫疗法治疗晚期原发性肝癌18例,与单纯化疗相比,疗效明显提高.自1995年11月～1996年9月收治38例晚期原发性肝癌,均经临床和CT证实,其中18例采用化学免疫疗法(甲组),同期收治的晚期肝癌患者,除对症处理外,单用静脉化疗或肝动脉插管化疗21例,列为对照组(乙组)、诊断和分期符合全国肝癌防治研究协作会议标准(1977,上海).化学免疫疗法采用口服优福定或静脉滴注FuDR同时输注免疫效     

MICA分子在NK细胞杀伤乳腺癌中的作用

目的 观察乳腺肿瘤细胞膜MHC Ⅰ链相关分子A(MHC class Ⅰ chain-related gene A,MICA)及血清中可溶性MICA表达,探讨MICA在NK细胞杀伤乳腺癌中的作用.方法 流式细胞术检测膜型MICA(mMICA)及NK细胞表面NKG2D表达,观察膜型MICA、可溶性MICA(sMIcA)对NKG2D表达的影响;免疫组织化学检测膜型MICA及可溶性MICA的表达及分布;抗体封闭法观察膜型MICA与NKG2D相互作用.结果 乳腺细胞膜型MICA在正常组织不表达,在良性肿瘤表达量为(38.5±7.5)%,恶性肿瘤表达量为(53.2±5.6)%.可溶性MICA含量在健康成年人为阴性,在乳腺良性肿瘤患者血清中含量(76.8±22.3)pg/mL,在恶性肿瘤患者中含量(205.36±71.27)pg/mL.经NKG2D或MICA抗体封闭后,NK细胞的杀瘤活性显著减弱.含可溶性MICA的血清可明显下调NKG2D的表达.结论 大部分乳腺肿瘤细胞膜都有MICA的表达,可作为乳腺肿瘤相关性抗原.膜型MICA与NKG2D的相互识别在介导NK细胞抗乳腺癌中起重要作用,而可溶性MICA通过下调NKG2D表达介导肿瘤免疫逃逸.