脐血干细胞分化的巨核细胞信号转导基因表达的分析

目的研究脐血干细胞向巨核细胞分化后信号转导基因表达的改变。方法分别收集同一份脐血分化培养前CD34＋细胞和培养后CD41＋细胞,提取总RNA。用基因芯片技术比较两组之间的基因表达差异,并用RT-PCR技术验证芯片结果。结果芯片分析结果显示,共筛选出3522个差异基因,其中上调1705个,下调1817个。3522个差异基因中,与细胞信号相关的基因有343个,与转录调节相关的有150个,与分化相关的有21个。其中,CD61基因的表达增加了369.83倍,CD41基因的表达增加27.38倍,PF4基因的表达增加24.06倍;MAPKs、GPCRs（G蛋白偶联受体）、RAS家族相关的基因多数表达上调;与STAT通路相关的基因中,SOCS1、JAK2表达上调,STAT5A表达下调。结论TPO等造血生长因子可能主要通过GPCRs-Ras-MAPK途径,促进脐血干细胞向巨核细胞系增殖、分化。     

蛋白质组学技术在肺癌研究中的应用

蛋白质组学是继人类基因组计划之后，生命科学领域又一研究热点．目前已广泛应用于肺癌的发病机制、早期诊断、病理分型及分期、预后判断等方面。近年来，随着高通量和结合生物信息学为特点的蛋白质组学分析技术的发展及应用，蛋白质组学技术在肺癌研究方面已取得了可喜的进展。该文就蛋白质组学研究技术，尤其是新兴蛋白组学技术及其在肺癌研究中的应用进行综述。     

骨髓细胞梗死心肌移植对心肌细胞结蛋白的影响

目的　探讨骨髓细胞梗死心肌移植对心肌细胞结蛋白表达的影响。方法　体外提取、纯化骨髓细胞、羟酸乙酸盐琥珀酸脂 (CFSE)荧光标记。骨髓细胞经局部注射移植入心肌梗死区域 ,1、2、4、8周后取心肌标本 ,行组织形态学检查 ,免疫组织化学检测心肌细胞结蛋白表达。结果　移植后 4周和 8周 ,电镜观察到不同分化阶段的幼稚心肌细胞 ,并与成熟心肌细胞以闰盘相连接。移植组和对照组梗死区心肌细胞结蛋白表达都明显高于正常区域心肌细胞 (P <0 .0 1) ,移植组术后 1、2、4、8周 ,梗死区心肌细胞结蛋白表达 (灰度值 )分别为 114 .0 6± 4.80、12 0 .3 1± 5 .10、118.3 7± 4.5 1、12 1.3 5± 3 .86。对照组梗死区心肌细胞结蛋白排列紊乱 ,未见肌小节显示。 1周、2周时移植组梗死区所见与对照组基本相同 ,但 4周和 8周时部分心肌细胞结蛋白已恢复排列并重见肌小节。结论　骨髓细胞梗死心肌移植对梗死区心肌组织结构起到保护作用 ,使部分心肌细胞结蛋白的分布恢复正常 ,但对梗死区心肌细胞结蛋白的表达量无影响。     

恙螨生物系统分类的研究

恙螨幼虫是恙虫病的传播媒介.恙螨的分类均以幼虫的外部形态作为分类依据.随着恙螨幼虫种类发现的日益增多,许多近缘种、姐妹种因其形态非常接近,测量数据常常重迭造成种间复盖而给分类造成很大困难.尤其是具有医学意义的纤恙螨属中种类繁多,问题尤为严重. 目前国内外学者都在着手这方面的解决办法的研究,试图解决正确定种的问题.有的以幼虫在实验室内饲养获得成虫,从成虫形态获得辅助分类的特征,有     

BABL/C×C57BL/6杂交F1代小鼠H22肝癌实体瘤模型的建立

目的探讨H22细胞在BABL/C×C57BL/6杂交F1代小鼠的成瘤性,为研究移植物抗肿瘤效应和移植物抗宿主病提供实验对象。方法BABL/C来源的H22肝癌细胞接种于杂交F1小鼠皮下,观察成瘤状况,并用流式细胞仪检测H22细胞的主要组织相容抗原复合物分子。结果每只F1小鼠接种2×106个H22细胞时,成瘤率为100%,无自发缓解;接种第14天,肿瘤体积的变异系数23%~34%;H22细胞的H-2Kd表达率(75.70±9.32)%。结论H22细胞可成功地接种于F1小鼠皮下成瘤,建立杂交F1代实体瘤动物模型。     

MICA第5外显子微卫星多态性与食管癌相关性研究北大核心CSCD

目的:研究MICA第5外显子微卫星多态性与食管癌相关性。方法:采用PCR-STR微卫星基因分型技术检测103例食管癌患者和84例正常对照MICA基因5外显子多态性。构建食管癌标本中高频率出现的MICA等位基因的真核表达载体,转染293T细胞株,LDH法检测NK细胞对不同MICA等位基因转染的293T细胞的杀伤作用,效靶比20∶1。ELISA法检测转染的293T细胞上清中s MICA含量。结果:食管癌患者第5外显子检测到5种等位基因,频率分别为:MICA-A4(9.71%),MICA-A5(22.3%),MICA-A5.1(40.8%),MICA-A6(15.5%),MICA-A9(11.7%),其中MICA-A5.1与对照组对比差异有统计学意义(P<0.05)。MICA等位基因转染293T细胞株后,相对于其他第5外显子A5.1组对NK杀伤的敏感性较低[(30.4±6.3)%,P<0.05],上清可溶性MICA分泌增加(135.7±6.2)pg/ml。结论:食管癌与MICA第5外显子多态性A5.1显著性相关,其危险性高于其他等位基因。     

慢病毒介导的CARMA1稳定沉默抑制K562细胞的侵袭和转移能力

目的研究RNAi技术稳定沉默caspase募集结构域膜相关鸟苷酸激酶蛋白1(CARMA1)基因后对K562细胞增殖、克隆形成和侵袭转移的影响。方法应用慢病毒介导的RNAi技术构建稳定沉默CARMA1基因的K562细胞,反转录PCR和Western blot法分别检测CARMA1 mRNA和蛋白的抑制情况。应用台盼蓝拒染法分析细胞增殖情况,克隆形成实验观察细胞克隆形成,TranswellTM实验(含Matrigel或不含Matrigel)检测体外迁移与侵袭能力的改变。反转录PCR和Western blot技术分析相关信号通路分子的改变,并探讨可能机制。结果成功构建6株细胞株:其中1株为阴性对照(K562/sh-eGFP),另5株为CARMA1基因沉默的细胞株。K562/shCARMA 1-93对CARMA1的抑制效果最好,利用该模型进行后续研究。台盼蓝拒染法和克隆形成实验表明,K562/shCARMA 1-93的生长和克隆形成能力受到明显抑制(P0.01)。与空白对照K562和阴性对照K562/sh-eGFP相比,细胞生长抑制率分别为29.3%和28.6%;克隆形成抑制率分别为37.6%和34.1%。体外迁移和侵袭转移实验证实,与对照组相比,K562/shCARMA1-93穿膜细胞数明显减少,有统计学差异(P0.01)。CARMA1受抑制后,信号通路分子核转录因子-κB(NF-κB)及早期生长反应基因1(EGR1)的表达也随之下降。结论 CARMA1的稳定沉默会抑制K562细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移,这可能与NF-κB、JNK/EGR-1信号通路受抑制有关。     

急性心梗后骨髓细胞心肌内移植促进心肌细胞再生的实验研究

目的 研究急性梗死心肌内移植骨髓细胞的促进心肌再生作用。方法 局部注射将骨髓细胞移植入大鼠急性心肌梗死模型的急性心肌梗死区域，1、2、4、8周后处死动物，取心肌标本行组织形态学检查和梗死面积测量。结果 梗死区心肌标本观察到带荧光的骨髓细胞，部分已分化成肌源性细胞，电镜观察到不同分化阶段的新生心肌细胞。与成熟心肌细胞以闰盘相联。骨髓细胞移植组梗死心肌面积明显小于对照组。结论 在梗死心肌内移植的骨髓细胞具有心肌再生能力，并能缩小梗死心肌面积。     

乳腺癌病人外周血T细胞亚群的变化及意义

目的 分析乳腺癌病人外周血T细胞亚群的变化情况，探讨乳腺癌病人机体的免疫状况。方法 应用流式细胞仪测定33例乳腺癌病人与20例健康女性外周血CD3 、CD4 、CD8 百分比，CD4 ／CD8 比率。结果(1)乳腺癌病人外周血CD3 、CD4 显著低于对照组(P＜0．05)。(2)Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌了细胞亚群无明显改变，且与对照组无明显差异；Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌CD3 、CD4 、CD4 ／CD8 显著低于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0．05)，CD8 百分率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0．05)。(3)乳腺癌腋淋巴结转移组(L )CD3 、CD4 、CD4 /CD8 显著低于无转移组(L-)(P＜0．05)，CD8 L( )组显著高于L(-)组(P＜0．05)。结论 外周血T细胞亚群的检测，对判断乳腺癌患者的病情、临床分期、预后以及机体的免疫功能的观察有一定意义。     

RT-PCR技术检测乳腺癌血行转移的研究进展

乳腺癌是我国女性常见的恶性肿瘤，大部分临床上可发现的乳腺肿瘤(最高可达90％)限于乳腺以及临近的腋窝淋巴结。尽管这些病人术后没有常规方法可测量的病灶，仍然有30％～40％的人在10年内出现转移性病灶。发生治疗失败的主要原因是在肿瘤发生发展过程中乳腺癌细胞的全身播散。通常认为瘤细胞进入外周血中的微转移是肿瘤远处转移的必需步骤。随着分子生物技术的发展，