基于AMPK/Sirt1信号通路探讨身痛逐瘀汤含药血清对膝骨性关节炎大鼠软骨细胞的保护作用

目的 研究身痛逐瘀汤含药血清对膝骨关节炎（KOA）大鼠软骨细胞氧化应激及凋亡的保护作用。方法 50只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量（1.73、3.46、6.92 g·kg^-1）和硫酸氨基葡萄糖（0.3 g·kg^-1）,连续给药2周后收集血清。构建KOA模型,分离软骨细胞,随机分为正常组、模型组、身痛逐瘀汤含药血清低、中、高剂量组及硫酸氨基葡萄糖组。软骨细胞培养过程中添加磷酸腺苷（AMP）依赖的蛋白激酶（AMPK）抑制剂Compound C（10 μmol·L^-1）,分为正常组、模型组、身痛逐瘀汤含药血清组、Compound C+身痛逐瘀汤含药血清组。5-乙炔基-2''-脱氧尿苷（EdU）染色检测细胞增殖;原位末端标记法（TUNEL）测定凋亡;DCFH-DA探针检测活性氧（ROS）水平;比色法测定谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、MMP-13、胶原酶Ⅱ型（Col Ⅱ）和聚集蛋白聚糖（Aggrecan）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Weatern blot）检测磷酸化（p）-AMPK及沉默信息调节因子1（Sirt1）蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组软骨细胞增殖率、GSH活性、Col Ⅱ与Aggrecan mRNA表达、p-AMPK和Sirt1蛋白水平显著降低（P<0.01）,而ROS水平、MDA含量、TUNEL阳性细胞率、MMP-3与MMP-13 mRNA表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较,身痛逐瘀汤含药血清能提高KOA大鼠软骨细胞中EdU阳性细胞数、GSH活性、Col Ⅱ和Aggrecan mRNA表达水平、p-AMPK和Sirt1蛋白水平（P<0.05,P<0.01）,而TUNEL阳性细胞率、ROS水平、MDA含量、MMP-3和MMP-13 mRNA表达水平则明显降低（P<0.05,P<0.01）。与身痛逐瘀汤含药血清组比较,Compound C+身痛逐瘀汤含药血清组细胞p-AMPK和Sirt1蛋白表达、GSH活性、Col Ⅱ和Aggrecan mRNA水平明显降低（P<0.01）,TUNEL阳性细胞率、ROS水平、MDA含量、MMP-3和MMP-13 mRNA水平显著升高（P<0.01）。结论 身痛逐瘀汤含药血清能减弱KOA大鼠软骨细胞氧化损伤,降低细胞凋亡,其保护作用可能与激活AMPK/Sirt1信号通路有关。     

瘢痕疙瘩组织中胶原合成情况的研究

目的 探讨瘢痕疙瘩中胶原过度积累的形成原因。方法 用透射电镜观察瘢痕疙瘩的超微结构。用ABC法免疫组化检测瘢痕疙瘩中新合成的胶原。用地高辛标记的人Ⅰ型前胶原al(Ⅰ）cDNA探针与从瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中提取RNA进行斑点杂交。结果 在超微结构上,多数瘢痕疙瘩成纤维细胞拥有丰富的高度发达的粗面内质网。斑点杂交结果显示瘢痕疙瘩组织中Ⅰ型胶原mRNA水平升高。免疫组化染色显示瘢痕疙瘩中成纤维细胞有丰富的Ⅰ型前胶原表达。结论 在活跃增生的瘢痕疙瘩中,成纤维细胞胶原合成功能处于活化状态,胶原合成增加是瘢痕疙瘩中胶原过度积聚的重要原因。     

脑血管病及其病因病CBA检测的临床研究

应用CBA，CV-300型脑血管动力学检测仪对脑血管病及其病因病进行检查，发现阳性率均在92.5％，98.46％，其脑血管动力学参数（CVDI）的临床意义特点：脑出血和脑梗塞在急性期均出现明显异常，脑出血的CP增高、脑梗塞的动脉硬化发生率为其特点。同CT对比，CVDI异常与CT定位大多数相一致，且比CT出现得早，存在早期诊断价值，高血压糖尿病的CVDI特点为双侧对称性异常，出现明显不对称性异常，可视为卒中前改变。     

同时做2项药物过敏试验致过敏性休克1例

同时做２项药物过敏试验致过敏性休克１例１病例报告患者，男，２５岁，因“鼻中隔偏曲”于１９９２—０２一２４收入我科。入院后于２月２７日１０：１５时按常规给患者做青霉素Ｇ钠皮试（左手）及普鲁卡因皮试（右手），两侧同时进行。１５ｍｉｎ后，左右两侧均显阴性，...     

家兔臂旁内侧核在“人中”穴呼吸效应中的作用研究

Experiments were performed on 27 rabbits, bivagotomized, gallamine triethiodide immobilized and artificially ventilated. The effects of electric stimulation of "Renzhong" (Du26) area, NPBM separately, and "Renzhong" area and nucleus parabrachialis medialis (NPBM) simultaneously, on phrenic nerve discharge were observed before and after electolytic and chemical lesion of NPBM. Evoked potential (EP) could be recorded in NPBM during the electric stimulation "Renzhong" area. Electric stimulation of the same site of NPBM where the EP was recorded could induce respiratory response and change the effect of electric stimulation of "Renzhong" area on respiration. But after electrolytic and chemical lesion of NPBM, stimulation of NPBM could no longer induce the respiratory response mentioned above and could not change the "Renzhong" effect on respiration either. These results suggest that NPBM might take part in respiratory effects of "Renzhong" area stimulation, but is not essential to it.     

51例微波内镜疗法的临床应用

用微波内镜腔内加热疗法治疗51例不同病种的患者,结果显示,食管、胃、肠道息肉的治愈率为97.3%(36/37);食管癌吞咽困难缓解率为33%(1/3),且以息肉样隆起型疗效较好。灼除广基息肉时用“顶部法”,而对有蒂息肉则用“基底两侧法”为佳。微波对组织的作用强度与组织承受天线的压力、仪器的功率、天线接触组织的时间关系密切。该疗法显示出价廉、简便、安全、实用,无严重并发症等优点。     

氧化低密度脂蛋白功能性调节人内皮细胞的生长调节致癌基因α

目的　探讨oxLDL对人内皮细胞的CXC亚家族趋化因子GROα的调节作用及生理意义。方法　超高速离心得LDL ,氧化后得oxLDL。逆转录PCR分析人内皮细胞系ECV30 4细胞GROαmRNA。GAPDH被用作PCR中正常改变的对照物。酶联免疫检测仪测定ECV30 4细胞表面连接及分泌到溶液中的GROα蛋白。静态细胞粘附试验测定ECV30 4细胞表面连接的GROα蛋白的生理意义。结果　正常ECV30 4细胞不表达GROαmRNA ;OxLDL显著调节其表达 ,诱导效应首先出现在处理后 1h ,最大在 2h ,在 4h时下降。相比较 ,LDL对其mRNA表达没有影响。正常ECV30 4细胞低水平表达细胞表面的GROα蛋白。OxLDL呈浓度依赖性、时间依赖性地上调其表面的GROα蛋白。相比较 ,LDL对其表面表达的GROα蛋白无调节作用。OxLDL对ECV30 4细胞分泌到细胞溶液中GROα蛋白很少有影响。 4 0 μg/mloxLDL处理ECV30 4细胞 2 4h ,造成显著的人单核细胞系U937细胞粘附到ECV30 4细胞数目的增加。用GROα抗体预处理oxLDL刺激的ECV30 4细胞 ,可显著减低U937细胞粘附到ECV30 4细胞的U937细胞数目 (大约 2 / 3)。结论　oxLDL可能功能性上调内皮细胞GROα的表达。     

水蛭提取物对大鼠脑血栓后脑组织MDA，SOD和NO含量的影响

目的　探讨光化学法诱导大鼠脑血栓形成中丙二醛(MDA) ,NO和 SOD含量的变化及水蛭提取物 (EFH )对其脑组织保护作用的机理 .方法　采用光化学法诱导大鼠大脑中动脉 (MCA)脑血栓形成模型 ,观察脑缺血后及药物作用后 4h,2 4h脑组织匀浆中 MDA,SOD和 NO的含量变化 .结果　大鼠脑缺血后 4h时 MDA的含量增高 ,2 4h明显增高 ;2 4h时 EFH治疗组 MDA含量明显降低 ,由 (4 .77± 0 .2 4) mol·L- 1降为 (2 .5 1± 0 .44 ) mol· L- 1 (P<0 .0 5 ) ,与模型组相比2 4h时 SOD的活性明显增高 (P<0 .0 5 ) . NO含量在脑缺血后 4h降低 ,2 4h时与假手术组相比明显升高 (P<0 .0 1) .结论　光化学诱导大鼠脑血栓形成 ,其脑组织的损伤与 MDA及 NO的神经细胞毒性作用有关 ,EFH可清除 MDA的生成 ,减少 SOD消耗 ,降低 NO的毒性 ,对缺血脑组织有保护作用     

胆囊十二指肠瘘32例临床分析

．胆囊十二指肠瘘是胆肠内瘘的一种较为特殊的临床病理类型,临床诊断不易,治疗方法复杂,结合我院1983～1999年收治并经手术治愈的胆囊十二指肠瘘32例及有关文献资料,总结如下。     

阑尾粘液囊肿转移腹肺粘液囊腺瘤1例报告

1　病例介绍患者,男,50岁,于10年前行阑尾切除时,发现阑尾呈椭圆形囊状改变,约2×2ｃｍ2大小,壁薄,游离肿物时不慎挤破,有胶冻样物流出,冲洗干净。病理回报:阑尾粘液囊肿。两年后再次发现右下腹肿块且出现肠梗阻表现。术中发现回盲部肿物约4×3ｃｍ大小,有囊性感,且与肠管广泛粘连,疑有恶变,行囊肿和部分肠管切除术。术后病理回报:粘液囊腺瘤。近两年在体检中又先后发现左右肺占位,术中见肿物均约乒乓球大小,表现光滑,有完整包膜,呈囊性感。切开见内含浓稠粘液。囊内壁光滑。术后病理报:粘液囊腺瘤。治愈出院,定期全身复查,未发现肿块,现病…