TLR2基因稳定沉默膀胱癌细胞株T739-TLR2△建立及生物学特征鉴定

目的 通过载体表达的RNA干扰技术(RNAi)阻断小鼠膀胱癌T739细胞TLR2基因的表达,建立TLR2基因稳定沉默的细胞株.方法 构建3种pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2重组质粒,脂质体法转染T739细胞,用RT-PCR法筛选干扰效果最强的重组质粒.再将该重组质粒转染T739细胞,用杀稻瘟菌素筛选抗性细胞克隆,即获得TLR2受体及其mRNA稳定表达最低的稳转细胞株,并鉴定其生物学特征.结果 测序结果显示设计合成的DNA片段已正确插入载体,将沉默效果最强的重组质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2转染T739细胞,筛选出有效沉默T739细胞TLR2基因表达的细胞株T739-TLR2△.TLR2 mRNA和受体表达分别下降95%和90%以上;T739-TLR2△细胞增殖指数降低、群体倍增时间延长,未发现明显凋亡细胞.结论 构建pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2重组质粒能稳定抑制T739细胞TLR2表达,可用于研究TLR2基因在T739细胞的功能与作用.     

氧化苦参碱对LoVo细胞Bcl-2、OCLN、TUBA1A mRNA表达的影响

目的探讨氧化苦参碱(OM)抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡的分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法以及免疫组化法检测OM对LoVo细胞凋亡相关以及细胞骨架相关的B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、微管蛋白1A(TUBA1A)、咬合蛋白(OCLN)的基因及蛋白表达的影响。结果 OM能显著抑制LoVo细胞增殖;可明显抑制LoVo细胞Bcl-2的mRNA以及蛋白的表达(P<0.05),抑制TUBA1A mRNA表达,同时上调OCLN蛋白的表达,但并不能明显上调OCLN mR-NA的表达。结论 OM抑制LoVo细胞增殖,可能与下调LoVo细胞Bcl-2、TUBA1A表达以及上调OCLN表达有关。     

不同浓度芦荟多糖对外周血单个核细胞和HepG2 生长的影响

目的:为芦荟多糖的抗肿瘤作用研究提供实验用细胞模犁,筛选最佳干预药物及其浓度.方法:采用人淋巴细胞分离液,Ficoll Hypaque密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),Alamar Blue法观察芦荟多糖对PBMc生长的影响,四唑氮蓝(Methylthiazolctrazolium,MTT)法观察芦荟多糖对HepG2生长的影响.结果:密度梯度离心法成功分离PBMC.芦荟多糖AP11在200μg·mL-1时已较明显促进和维持PBMc的生长(P<0.01).各不同浓度芦荟多糖对HepG2的生长无显著影响(P>0.05).结论:芦荟多糖AP11(200μg·mL-1)可作为开展抗肿瘤作用机理的理想实验用药.     

四君子汤总多糖及单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞迁移作用的比较研究

目的：研究四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞研究迁移的影响。方法：以IEC-6细胞为研究对象，采用体外细胞迁移模型，观察四君子汤总糖及各单味多糖对该细胞迁移的影响。结果：各多糖作用存在差异，茯苓多糖具有明显抑制细胞迁移的作用，白术多糖作用不显著，甘草多糖和党参多糖具有明显促进细胞迁移的作用。当各单味药多糖与总多糖相比时，总多糖的效用优于各单味药多糖。结论：四君子汤总多糖的作用可能是各单味药多糖综合作用的结果，也提示中药复方用药具有一定的合理性。     

芦荟多糖干预的PBMC对肝癌细胞生长的影响

目的:研究芦荟多糖(AP)干预的外周血单个核细胞(PBMC)对体外肝癌细胞(HepG2)生长的影响,从免疫学角度探讨AP的抗肿瘤机理。方法:Alamar Blue法检测AP及其联合Anti-CD3mAb与rhIL-2对体外培养的PBMC生长的影响;以各组干预后的PBMC为效应细胞,HepG2为靶细胞,MTT法观察各组效应细胞对靶细胞杀伤活性的影响;流式细胞术PI单染法检测各组效应细胞对靶细胞细胞周期及凋亡率的影响。结果:AP及其联合Anti-CD3mAb与rhIL-2可显著促进PBMC的增殖;各组效应细胞可显著抑制靶细胞的生长,降低S期比例,提高G1比例和凋亡率。其中AP联合Anti-CD3mAb与rhIL-2干预的PBMC对靶细胞生长的抑制率可达46.30%,靶细胞S期比例,G1期比例和凋亡率明分别为24.37%,75.63%和30.37%。结论:AP及其联合Anti-CD3mAb与rhIL-2可提高PBMC抑制肝癌细胞生长的活性。     

临床药学工作在我院的实践与体会

本文介绍了我院临床药学工作的发展现状。其中主要涉及药学信息服务与合理用药咨询、建立药师查房制度、治疗药物监测、开展细菌耐药性的监测、药物不良反应的监测、处方分析、临床药学科研工作等方面，并谈了作者的一些体会和想法。     

当归补血汤补血功效及其物质基础研究(二)

目的：以血红蛋白含量为指标，探讨当归补血汤发挥补血功效的有效部分。方法：用极性由小到大的四种有机溶剂依次萃取全方水煎液，所得各供试部分给急性失血性血虚模型小鼠灌胃。结果：未发现某一供试部位对Hb恢复作用强度等同全方；正丁醇部分与乙酸乙酯部分组合与全方比较无显性差异。结论：全方补血药效物质基础主要存在正丁醇与乙酸乙酯的极性区间。     

香脂冷杉精油抗肿瘤作用的机理

姬松茸Agaricus blazei是可食用的担子菌纲蘑菇，作者研究了其子实体(CJ-01)热水提取物对神经递质受体、转运蛋白及肝药酶的作用。     

凤仙草不同提取物对三种皮肤真菌抑制作用的实验研究

1　实验材料　①菌株 :导致手足癣病、甲癣病的主要 3种致病真菌 :红色毛癣菌、石膏样毛癣菌、白色念珠菌 ,购于广州市皮肤病研究所 ;②培养基 :沙搏氏培养基 (杭州微生物试剂厂 ,批号 :990 4 2 6 ) ;③药物与试剂 :凤仙草 (南京中药饮片厂 ,出厂日期 :990 6 14 ) ,经鉴定为凤仙花科植物凤仙 (ＩｍｐａｔｉｅｎｓｂａｌｓａｍｉｎａＬ .)。达克宁 (西安杨森制药有限公司 ,批号 :0 0 0 6 0 12 57) ,喷脚灵 (四川联发医疗保健品有限公司 ,批号 :2 0 0 0 0 6 0 4 ) ,氯仿 (广州新成精细化工厂 ,批号 :2 0 0 0 0 32 3) ,正丁醇(广州化学试剂二厂…     

凤仙花研究进展

凤仙花该药名最早见于《救荒本草》。它是凤仙花科中最大一个属—凤仙花属的植物凤仙 Impatiens balsamina L.的花瓣。主要分布在热带及亚热带山区 ,少数产于北温带 ,在中国主要产于西南地区。在各个地方及不同本草书中的名字各异 ,如《本草纲目》称“好女儿花”,《江西民间草药》称“金童花”,《草木便方》称“指甲花”等。凤仙花性寒、味甘微苦 ;具有祛风除湿、活血定痛之功效。主治风湿偏废 ,腰腿疼痛 ,妇女经闭腹痛 ,产后瘀血未尽 ,跌打损伤 ,痈疽 ,鹅掌风 ,灰指甲等。到目前为止对凤仙花的主要研究在临床运用、药理、化学成分等几个方…