当归补血汤补血功效及其物质基础研究

目的 :以T淋巴细胞百分数为指标 ,探讨当归补血汤的有效部分。方法 :用极性由小到大的四种有机溶剂依次萃取全方水煎液 ,所得各供试部分给血虚模型小鼠灌胃。结果 :未发现某一供试部位对T淋巴细胞百分数恢复作用强度等同全方 ;各部分相互组合后作用增强 ,正丁醇部分与水层部分组合功能最强 ,与全方比较无显著性差别 (P >0 .0 5 )。结论 :全方有效物质基础主要存在正丁醇与水的极性区间。     

猪苓多糖联合卡介苗诱导的细胞外热休克蛋白对巨噬细胞功能的影响

目的 研究猪苓多糖联合卡介苗刺激T24膀胱癌细胞株后,细胞外HSP的表达及其对J774A.1巨噬细胞TLR2、TLR4,胞内钙离子(Ca2+)、一氧化氮(NO)和活性氧(ROS)表达的影响,探讨膀胱内灌注卡介苗治疗浅表性膀胱癌的免疫启动和免疫调节机制.方法 用ELISA的方法检测猪苓多糖和卡介苗联合刺激T24膀胱癌细胞后胞外HSP90、HSP70、HSP60、HSP27的表达,胞外HSP作用于J774A.1巨噬细胞后,用流式细胞术检测J774A.1巨噬细胞表面TLR4和TLR2的表达,应用激光共聚焦扫描技术,检测J774A.1细胞内Ca2+、NO和ROS的动态变化.结果 猪苓多糖和卡介苗联合作用组胞外HSP的表达明显高于猪苓多糖和BCG单独使用组(P＜0.05),48h时胞外HSP的表达至峰值,且胞外HSP70呈优势表达;胞外HSP可上调J774A.1巨噬细胞TLR4的表达(P＜0.05),对J774A.1细胞内Ca2+、NO和ROS有明显的调节作用(P＜0.05).结论卡介苗体外直接刺激人T24膀胱癌细胞后,可表达细胞外HSP90、HSP70、HSP60、HSP27,猪苓多糖和卡介苗联合使用可增加其表达.细胞外HSP对J774巨噬细胞有一定的免疫调节作用.     

四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的作用

背景：一些实验证明多糖在感染、炎症．细胞间黏附和信号传导、免疫识别、细胞增殖分化及维持细胞正常结构和功能生理、病理等方面均起重要作用。但植物多糖对胃肠道黏膜的保护作用有待进一步研究。目的：观察不同浓度的四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。设计：观察对比实验。单位：广东省中医院中心实验室。材料：①细胞株：正常大鼠小肠上皮细胞株IEC-6（ATCC Catalog No．RL-1592）由美国ATCC（American Type Culture Collection）购得，主要来源于小肠隐窝细胞。②试剂和药品：DMEM培养基，牛胰岛素，庆大霉素，胎牛血清，DPBS均为GIBCO公司产品；细胞增殖试剂盒（MTT）为Roche公司产品；消炎痛为Sigma公司产品。四君子汤总多糖按药典处方比例取党参，白术．茯苓和甘草适量，加水浸泡后，煮沸提取4h，重复1次，合并提取液，减压浓缩．高速离心除去不溶物，提取液置玻璃纸中逆向流水透析2h，再于提取液中加乙醇至浓度约80％．保存过夜后分取沉淀，合并所有沉淀，采用Sevag法除去粗多糖中的蛋白，冻干后得到的总多糖。方法：①将IEC-6细胞株于干冰中取出，迅速放入37℃水浴中解冻后．加入已装有DMEM培养液的T-150培养瓶后放入CO2培养箱中，于37℃，饱和湿度，体积分数为0．05的CO2环境下培养。细胞隔天换液1次．每5～7天进行传代．传代比例为1：7。第15-20代细胞用于实验。②IEC-6细胞以1&;#215;10^4／孔的浓度接种于96孔细胞培养板上，接种后6h，各培养孔内依次加入浓度为50，100．200mg／L四君子汤总多糖．即为四君子汤总多糖3个剂量组。每天定时取出1板，按试剂盒说明书以MTT法进行细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组．在相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。③将IEC-6细胞按1&;#215;10^4／孔的浓度接种于96孔细胞培养板中，接种后次日更换以无血清培养液DMEM，24小时后，各培养板中分别加入消炎痛以及四君子汤总多糖，其中，消炎痛使用浓度为40mmol／L，即为消炎痛组。四君子汤总多糖使用3个剂量分别为50，100，200mg／L．即为四君子汤总多糖50，100，200mg／L组。药物作用20h后，按试剂盒使用说明书进行MTT法细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组．在各相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。主要观察指标：MTT法测定四君子汤总多糖不同作用时间对IEC-6细胞生长的影响结果；MTT法测定四君子汤总多糖对消炎痛所致的IEC-6细胞生长抑制的影响结果。结果：四君子汤总多糖不同剂量于不同的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用；IEC-6细胞在给予消炎痛40mmol／L作用24h后，细胞增殖的吸光度明显低于正常对照组（0．17&;#177;0．02，0．31&;#177;0．03；P〈0．01）。当四君子汤总多糖使用浓度为100mg／L时，IEC-6细胞的吸光度明显高于消炎痛组（0．25&;#177;0．04，0．17&;#177;0．02；P〈0．01），虽然未达到正常IEC-6细胞吸光度的水平，但与正常组无明显差异（P〉0．05）。结论；四君子汤总糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用，它可能通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。     

自体外周血单个核细胞对原代肝癌细胞生长的影响及芦荟多糖对其干预作用

目的 观察、探讨自体外周血单个核细胞(PBMC)对原代肝癌细胞生长的影响及芦荟多糖AP11的干预作用.方法 以手术切除肝癌组织为标本,胰酶短暂消化加吹打、单细胞悬液培养法原代培养肝癌细胞.通过倒置显微镜观察其形态学特征.于分离培养第2天,加芦荟多糖AP11、芦荟多糖AP11干预及未干预的PBMC于癌细胞中,倒置显微镜观察其对癌细胞形态的影响,MTT法观察其对癌细胞生长的影响.结果 采用胰酶短暂消化加吹打分离、单细胞悬液原代培养的方法,可成功获取原代肝癌细胞;与空白对照组相比,芦荟多糖组癌细胞在形态上无明显差别,MTT实验结果表明其对癌细胞的生长无明显影响;与空白对照组相比,芦荟多糖AP11干预与未干预PBMC组癌细胞形态均有较大变化,MTT实验结果表明,其对癌细胞的生长有显著抑制作用.结论 芦荟多糖AP11无直接体外抗肿瘤活性,其抗肿瘤活性可能是通过与PBMC的相互作用,通过调节机体的免疫系统而达到的.     

骨癌通泰方对人成骨肉瘤耐药细胞R-KHOS MRP基因表达的影响

目的:通过检测其动物血清对人成骨肉瘤耐药细胞R-KHOSMRP基因表达的影响,从而探讨其耐药逆转的机制。方法:采用RT-PCR法检测含药动物血清干预下MRP基因在R-KHOS、KHOS细胞中的表达,同时进行统计学处理。结果:骨癌通泰方对人成骨肉瘤耐药细胞R-KHOS在MRP基因表达中减少有显著差异(P<0.05),结论:建立在补肾健脾活血法上的骨癌通泰方具有补肾健脾活血的作用,能明显减少人成骨肉瘤耐药细胞R-KHOS的MRP基因表达,为其能对骨肿瘤化疗减毒增效的作用提供实验室理论依据。     

当归补血汤实验研究进展

查阅十年来国内有关中医药研究的学术刊物,从免疫调节功能、循环系统作用,立方基础、抗氧化、保肝、配伍比例研究等几个方面概述当归补血汤的研究结果。当归补血汤具有提高机体免疫功能、改善异常循环状态,并有保肝和抗氧化等药理作用。今后应进一步开展其作用机理和物质基础的研究。     

The regulatory effects of polyporus polysaccharide on the nuclear factor kappa B signal pathway of bladder cancer cells stimulated by Bacillus Calmette-Guerin

Objective  

To detect the effects of Polyporus polysaccharide (PPS), Bacillus Calmette-Guerin (BCG), and their combination on the nuclear factor kappa B (NF-κB) signaling pathway associated-gene expression and investigate the molecular mechanisms of the toxic-reducing effect of PPS in coordination with BCG against bladder cancer.     

人参多糖与人参皂苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞造血细胞因子表达的作用比较

目的 了解骨髓多能间充质干细胞(BM-MSC) 主要造血因子mRNA表达水平,比较人参多糖和人参皂苷对BM-MSC造血因子mRNA表达的影响。 方法 采用Real-time PCR技术,观察人参多糖(20 μg/mL)或人参皂苷(20 μg/mL)作用于大鼠BM-MSC 12、24、36 h时间点造血因子IL4、Csf2、Kitlg、Csf1、IL6、Lif、Csf3、IL11、Epo和IL3等10个基因mRNA相对表达水平。 结果 正常大鼠BM-MSC未检测到IL4和Csf2 mRNA表达,以内参基因Gapdh mRNA作参比, Kitlg、Csf1、IL6、Lif、Csf3、IL11、Epo和IL3等mRNA相对表达量依次减弱。Epo和IL3 mRNA表达在人参多糖与人参皂苷作用后各个时间点均无明显影响(P>0.05)。人参多糖在12 h和36 h时间点对BM-MSC的Csf1、IL6、Lif、Csf3和IL11等5个造血因子mRNA表达有显著促进作用(P<0.05),在24 h时间点对Csf1、IL6、Lif、Csf3和Kitlg等5个造血因子mRNA表达有显著促进作用(P<0.05)。人参皂苷在12、24和36 h时间点对BM-MSC有促进表达的基因分别为1个(Csf3),3个(Csf3、IL6和Lif),5个(Csf3、IL6、Lif、IL11和Kitlg)。