磷酸三钙／透明质酸／Ⅰ型胶原／骨髓基质胞复合物修复骨缺损与自体骨的比较

背景: 复合材料作为种子细胞的载体修复骨缺损较传统的自体骨移植具有创伤小、不存在供区限制的优点。目的: 观察由磷酸三钙人工骨 /透明质酸 /I 型胶原复合物作为诱导后的骨髓基质细胞载体修复兔桡骨骨缺损的能力及作为自体骨移植替代物的可能性。设计: 随机对照实验。单位: 武汉大学人民医院骨科。材料: 实验于 2003- 09/2004- 06 在武汉大学人民医院骨科进行。选择 6个月新西兰大白兔 31 只, 平均体质量 1.5～2.0 kg。随机分为对照组和实验组。对照组 4 只, 实验组 27 只。方法: ①31 只大白兔均做骨髓基质细胞体外诱导培养, 观察诱导后的骨髓基质细胞碱性磷酸酶染色的阳性细胞率。扫描电镜观察磷酸三钙人工骨 / 透明质酸 /Ⅰ型胶原复合物结构。②手术制造桡骨 2 cm 长骨缺损, 8周后实验组一侧以磷酸三钙人工骨 / 透明质酸 /Ⅰ型胶原复合物 / 骨髓基质细胞植入兔桡骨骨缺损模型处, 另一侧植入自体骨; 对照组空白植入。③实验组所有动物随机在术后 4, 8, 12 周 3 个时间点处死, 4、8 周各6 只, 12 周 15 只; 对照组动物在 12 周处死。分别进行大体观察、X 射线摄片、HE 染色、无机质含量测定、12 周时标本进行成骨面积及生物力学测试, 比较各组修复骨缺损的效果。主要观察指标: 诱导后的骨髓基质细胞碱性磷酸酶染色的阳性细胞率;磷酸三钙人工骨 / 透明质酸 /Ⅰ型胶原复合物结构; 大体观察; X 线摄片; HE 染色及无机质含量测定; 成骨面积及生物力学测试。结果: 31 只大白兔均进入结果分析。①诱导培养后碱性磷酸酶阳性细胞率达 75%。②扫描电镜观察显示 3 种材料均匀分布, 有大量的微孔结构。③复合物组与自体骨组 12 周时成骨面积分别为 (72.5±3.6)%;(76.7±6.2)%, (P > 0.05) 。④复合物组与自体骨组最大弯矩分别为(521.0±61.1) , (554.3±53.3) N·mm; 施力点最大位移分别为(0.816±0.071), (0.870±0.103) mm, 差异无显著性意义(P>0.05)。⑤复合物于4、8 和12周无机质含量测定分别为75% ,57% ,42%, 表明材料中的无机成分随时间的延长逐步降解。⑥大体观察X线片、组织病理学检查、生物力学测试结果显示, 随着时间的延长自体骨组和磷酸三钙人工骨 / 透明质酸/Ⅰ型胶原复合物/骨髓基质细胞填充组能修复骨缺损, 对照组不能修复。结论: 磷酸三钙人工骨/ 透明质酸/Ⅰ型胶原 /骨髓基质细胞复合物与自体骨具有相同的骨损修复能力, 可作为自体骨移植的替代物。     

Fas蛋白在鼠急性脊髓组织损伤中分布特点的初步研究

目的 :探讨大白鼠急性脊髓损伤后损伤区Fas蛋白的表达及其分布特点。方法 :Wistar雌性大鼠 4 2只 ,使用改良Allen氏法制作急性脊髓损伤模型 36只 ,采取HE、Nissl染色和免疫组化方法 ,检测损伤后 1 ,4 ,8,2 4 ,72h及 7d的脊髓组织。结果 :在损伤后 4h ,损伤段灰质可见Fas阳性细胞 ,8h表达达高峰。正常组未见Fas阳性细胞表达。高倍镜观察 ,阳性细胞具有凋亡细胞的特征。结论 :Fas蛋白可能在诱导脊髓损伤后神经细胞凋亡的过程中 ,发挥着重要作用     

羧甲基壳聚糖对体外培养许旺细胞增殖及核因子κB表达的影响

背景：研究表明羧甲基壳聚糖对多种细胞具有促增殖作用,但其对许旺细胞增殖的影响及具体作用机制有待进一步探索。 目的：观察羧甲基壳聚糖对许旺细胞的促增殖作用,以及其对许旺细胞内核因子κB表达及活性的影响。 方法：取对数生长期的SD乳鼠许旺细胞细胞悬液接种于96孔板,分别以PBS、0,10,50,100,200,500,1 000 mg/L羧甲基壳聚糖培养24 h,采用CCK-8法检测细胞增殖。取对数生长期的SD乳鼠许旺细胞,胰酶消化后制备成细胞悬液,接种于6孔细胞培养板内,分别加入50 mg/L羧甲基壳聚糖、100 mg/L羧甲基壳聚糖、200 mg/L羧甲基壳聚糖、PBS培养24 h,进行BrdU、Real-time PCR及Western blot法检测。 结果与结论：CCK-8及BrdU检测结果表明羧甲基壳聚糖在50-1 000 mg/L范围内可促进许旺细胞增殖,200-500 mg/L时促增殖效应最明显。Real-time PCR及Western blot结果表明50-200 mg/L羧甲基壳聚糖可促进许旺细胞内核因子κB mRNA及蛋白的表达,且具有浓度依赖性。表明羧甲基壳聚糖可促进体外培养许旺细胞的增殖及其核因子κB的表达。     

椎弓根螺钉固定三维矫治特发性脊柱侧凸的疗效观察

目的 探讨椎弓根螺钉固定在特发性脊柱侧凸矫形术中的治疗效果.方法 自2000年1月至2008年8月,对21例特发性脊柱侧凸患者行脊柱侧凸矫形术,术中采用徒手技术置入椎弓根螺钉行侧凸矫形,术后佩戴胸腰支具3～5个月.结果 随访8～36个月,平均22个月.切口均获得Ⅰ期愈合.患者术前Cobb角平均为67.1°,术后Cobb角平均为25.4°,畸形矫正率为62%,随访中角度丢失平均为3.3°,身高平均增加约6cm.所有病例术中术后均无脊髓神经根损伤表现,均获得满意的脊柱融合.结论 椎弓根螺钉固定能提供强大的三维矫正力,效果可靠、并发症少,应用椎弓根螺钉固定治疗特发性脊柱侧凸具有较好的临床效果.     

上颈椎不稳17例治疗体会

目的 探讨上颈椎不稳的手术治疗方式及疗效. 方法 对17例上颈椎不稳患者采用颅骨牵引,完善术前准备后分别予植骨融合、侧块椎弓根钉板固定术或枕颈融合术或者前路齿状突螺钉内固定术 .结果 17例术中未出现脊髓损伤、椎动脉破裂等并发症.所有患者均得到4～24个月的随访(平均14个月),无脊髓神经损伤加重征象及内固定松动、断裂现象,全部病例均获骨折愈合或骨性融合.结论 完善的术前准备、评估、恰当的手术方式是保证上颈椎不稳手术治疗疗效的基础.     

46例脊髓型颈椎病手术治疗观察

目的 探讨脊髓型颈椎病术式选择的基本原则和方法,观察其疗效.方法 根据每个患者影像学改变的特点分别采用前路开槽减压,植骨钛板内固定,以及前后路联合手术等多种方法进行治疗.经术后观察随访,对其取得的手术疗效进行分析总结.结果采用不同的方法对46例不同类型的颈椎病进行手术治疗,经过平均30个月的随访,满意率达到84.8%.结论 根据脊髓型颈椎病患者不同的影像学改变和症状体征选择不同的手术方式,多数患者均能通过颈前路的开槽减压内固定而取得满意效果;广泛性退变或椎管后方明显狭窄病例应结合后路减压扩大椎管才能达到有效治疗.     

三种脱细胞神经修复大鼠坐骨神经缺损效果的比较

目的 比较三种去细胞神经支架修复大鼠坐骨神经缺损效果差异.方法 取大鼠坐骨神经39条,分别用甘油(A组)、叠氮钠(B组)、三硝基甲苯(C组)萃取,每组13条.观察萃取神经结构.用A、B、C三组神经支架修复1.5 cm长的SD大鼠坐骨神经缺损,另设自体神经移植组(D组)和空白对照组(E组),每组10只,术后12周比较五者的修复效果.结果 萃取后A组90%细胞、B、C100%细胞消失,纤维性支架结构A组95%完整;而B、C组仅30%.修复后小腿三头肌湿重、神经电生理A、B、C三组修复大鼠坐骨神经缺损效果相当(P＞0.05),与D、E组比较(P＜0.05)、差异有统计学意义.结论 甘油、叠氮钠、三硝基甲苯等萃取神经可较好地修复坐骨神经缺损,但甘油处理神经最为简单.     

Repairing peripheral nerve defects with tissue engineered artificial nerves in rats

Objective： To observe the effect of tissue engineered nerves in repairing peripheral nerve defects （ about 1. 5 cm in length） in rats to provide data for clinical application.
Methods： Glycerinated sciatic nerves （2 cm in length） from 10 Sprague Dawiey （SD） rats （aged 4 months） were used to prepare homologous dermal acellular matrix. Other 10 neonate SD rats （aged 5-7 days） were killed by neck dislocation. After removing the epineurium, the separated sciatic nerve tracts were cut into small pieces, then digested by 2.5 g/L trypsin and 625 U/nd collagenase and cultured in Dulbecco＇ s modified Eagle＇ s medium （DMEM） for 3 weeks. After proliferation, the Schwann cells （SCs） were identified and prepared for use. And other 40 female adult SD rats （ weighing 200 g and aged 3 months） with sciatic nerve defects of 1.5 cm in length were randomly divided into four groups： the defects of 10 rats bridged with proliferated SCs and homologous dermal acellular matrix （the tissue engineered nerve group, Group A）, 10 rats with no SCs but homologous dermal acellular matrix with internal scaffolds （Group B ）, 10 with autologous nerves （Group C ）, and the other 10 with nothing （the blank control group, Group D）. The general status of the rats was observed, the wet weight of triceps muscle of calf was monitored, and the histological observation of the regenerated nerves were made at 12 weeks after operation.
Results： The wounds of all 40 rats healed after operation and no death was found. No foot ulceration was found in Groups A, B and C, but 7 rats suffered from foot ulceration in Group D. The triceps muscles of calf were depauperated in the experimental sides in all the groups compared with the uninjured sides, which was much more obvious in Group D. The wet weight of triceps muscle of calf and nerve electrophysiologic monitoring showed no statistical difference between Group A and Group C, but statistical difference was found between Groups A and B and Groups B and     

医源性肢体骨折骨不连83例原因分析及治疗

目的:探讨83例医源性四肢骨折骨不连的发生原因及治疗方法,预防骨不连的发生。方法:复习83例骨不连患者的临床资料,对骨折的类型、X线片、及手术方式、固定方式等综合分析,判断导致骨不连的原因。对不同原因的骨不连选择不同的手术治疗。结果:固定物选择错误致固定后骨折端不稳定导致的骨不连占64%;固定后对患者康复的不正确指导占25%;其他综合原因占11%。手术治疗后79例患者于术后3～8个月骨折愈合。结论:骨折早期处理中遵循骨折固定的基本原则和手术后正确的康复训练是预防医源性骨不连的关键。及时诊断骨不连和正确的手术治疗可以使其达到理想的疗效。     

羧甲基壳聚糖对体外培养许旺细胞环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响

背景：已有研究证实羧甲基壳聚糖对许旺细胞增殖、分泌具有促进作用,但其对许旺细胞内环磷腺苷介导蛋白激酶A信号通路的影响仍需要进一步研究。 目的：观察羧甲基壳聚糖对大鼠许旺细胞内环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响。 方法：取第2代新生大鼠许旺细胞,以1×109 L-1的细胞浓度接种于6孔板,分4组培养,空白对照组加入PBS,实验组分别加入50,100,200 mg/L的羧甲基壳聚糖溶液培养。培养24 h后,检测许旺细胞内环磷腺苷浓度、蛋白激酶A活性及环磷腺苷反应元件结合蛋白mRNA的表达。 结果与结论：与空白对照组比较,羧甲基壳聚糖呈剂量依赖性提高许旺细胞内环磷腺苷浓度(P < 0.05),呈剂量依赖性增强许旺细胞内蛋白激酶A活性(P < 0.05),呈剂量依赖性提高许旺细胞内环磷腺苷反应元件结合蛋白mRNA的表达(P < 0.05)。表明羧甲基壳聚糖可增加许旺细胞内环磷腺苷浓度、促进蛋白激酶A活性,从而激活环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程