中西药合用对帕金森病大鼠神经细胞凋亡的影响

目的:观察滋补肝肾、通络解毒中药与美多巴合用对帕金森病大鼠神经细胞凋亡的影响。方法:实验于2003-03/2004-06在上海中医药大学科研实验中心完成。①选用雄性Wistar大鼠58只,7～8周龄。将其中40只大鼠用于制备帕金森病模型(以6-羟基多巴胺注射于大鼠脑右侧黑质,10d后腹腔注射阿朴吗啡0.5mg/kg诱发大鼠向一侧旋转,以开始旋转至30min内旋转圈数平均每分钟超过7次者为合格帕金森病模型),造模成功18只,随机分为2组:模型组、中西药治疗组,每组9只;另纳入9只正常大鼠为正常对照组(只固定大鼠,不进行任何处理),9只大鼠注射含0.2g/L抗坏血酸的等量生理盐水(其余条件与造模手术相同大鼠)为假手术组。②然后,正常对照组、假手术组、模型组:灌胃生理盐水2mL。中西药治疗组:灌胃中西药混悬液2mL[滋补肝肾、通络解毒中药:汤药内含熟地、桑寄生、枸杞子、天麻、钩藤、僵蚕、丹参、莪术、白芍、生南星,按既定工艺煎煮成汤药,每毫升含原药材2.961g,由上海中医药大学附属龙华医院制剂室制备;蝎蜈胶囊内含全蝎、蜈蚣,0.3g/粒,由上海中医药大学附属龙华医院提供,批号:010813。按比例将胶囊混匀于汤药中,使浓度为3.006g/mL;含美多巴(上海罗氏制药公司产品,批号:052000,250mg/片)135mg/kg),1次/d,共45d。③实验结束后,每组取6只大鼠,处死,取出中脑组织,甲醛固定,梯度脱水,常规石蜡包埋,冠状切片,每块脑组织5张切片;每组取3只大鼠进行心脏灌注固定,后分离中脑黑质,制作电镜标本。用原位末端标记法染色和透射电镜(×9000)的方法观察中西药合用对神经细胞凋亡的影响。④组间比较采用方差分析。结果:造模失败22只,由于造模失败脱失22只,进入结果分析36只,每组9只。①模型组标本中均能检测到原位末端标记法染色阳性细胞核,细胞核呈棕褐色,但主要集中在损毁侧黑质区内,细胞核体积缩小,或明显皱缩,形态呈圆形或不规整。模型组神经细胞凋亡数明显多于正常对照组、假手术组和中西药治疗组[(37.83±6.46),(1.67±1.9),(1.83±1.92),(1.28±4.75)个,P<0.01]。中西药治疗组也能检测到凋亡细胞核,但与模型组比较,凋亡细胞数较少,单个散在分布。②电镜检查结果显示中西药合用组神经细胞病理变化明显比模型组轻,细胞膜稍有皱缩,细胞体积略缩小,线粒体等细胞器形态正常,细胞核稍呈皱缩状态,染色质有轻度凝聚成块并有边聚倾向,核膜基本完整。结论:中西药合用对帕金森病大鼠神经元细胞凋亡有明显抑制作用。     

6-羟基多巴胺制备帕金森病大鼠模型的神经行为学特点

目的:采用在大鼠脑右侧黑质注射6-羟基多巴胺制备帕金森病模型,观察帕金森病模型大鼠神经行为学的特点。方法:实验于2001-03/12在上海中医药大学病理学实验室完成。将62只Wistar大鼠随机分为3组。模型组:采用6-羟基多巴胺(溶于含0.2g/L抗坏血酸的生理盐水中,浓度为2g/L,以1.0mm/min速度缓慢进针,3μL/孔,注射速度为1μL/min,注射完毕后留针5min,然后以1.0mm/min速度缓慢退针)。注射于大鼠脑右侧黑质造成偏侧帕金森病模型。假手术组:注射含0.2g/L抗坏血酸的等量生理盐水,其余条件与模型组相同。正常对照组:不进行任何处理。在模型制备后第10天,以腹腔注射阿朴吗啡0.5mg/kg诱发大鼠向一侧旋转,记录开始旋转至30min内的旋转圈数,以旋转圈数平均每分钟超过7次者为合格的帕金森病模型。并观察各组大鼠在第45天的旋转行为。结果:62只大鼠中有23只大鼠造模不成功,39只大鼠进入结果分析。①正常对照组、假手术组无旋转行为。模型组在腹腔注射阿朴吗啡后0.5～4min,均开始出现旋转行为,即以左侧后肢为支点原地旋转,头尾相接,身体成环状,同时还伴有觅食、嗅探动作。②42只模型组大鼠中,造模成功19只,成功率为45%(19/42)。向左旋转的大鼠显著多于向右旋转及向左一圈,右一圈旋转的大鼠[14只,4只,1只,(P<0.05)]。③模型组在第45天的旋转圈数与第10天时接近[(526.10±173.96),(538.52±187.88)圈/h,(t=1.448,P>0.05)]。结论:①模型大鼠具有典型的神经行为学特点,主要表现为以健侧后肢为支点原地旋转。②该模型不能自行恢复,是研究帕金森病的稳定、可靠模型。     

羚蝎胶囊对局灶性脑缺血-再灌注大鼠模型循环内皮细胞的影响

目的 :观察羚蝎胶囊对脑缺血再灌注损伤模型大鼠循环内皮细胞 (CEC)的影响 ,探讨其治疗脑梗死的可能机制。方法 :36只 SD大鼠随机分为假手术组、模型组和羚蝎胶囊治疗组 ,用大脑中动脉栓塞 (MCAO)法复制大鼠局部脑缺血再灌注模型 ,观察各组大鼠神经功能缺损评分及血浆 CEC的变化。结果 :羚蝎胶囊组再灌注后 3h神经功能缺损评分〔(2 .30± 0 .34)分 )〕显著低于模型组同期〔(3.10± 0 .2 3)分〕;羚蝎胶囊组血浆CEC水平〔(5 .5 7± 0 .89)个 / 0 .9μl〕较模型组低〔(6 .38± 0 .91)个 / 0 .9μl,P<0 .0 5〕。结论 :羚蝎胶囊能降低局部脑缺血再灌注损伤模型大鼠的 CEC数量 ,这可能是该方治疗脑梗死的机制之一。     

大承气汤对实验性肺水肿家兔肺病理改变影响的研究

目的：探讨大承气汤改善阳明腑实喘满证中肺通气功能和肺组织病变的机制。方法：将实验家兔随机分为对照组、肺水肿模型组和大承气汤治疗组。从兔耳缘静脉注入油酸建立家兔实验性肺水肿模型。大承气汤由胃管灌入，观察动物一般情况，分析制模后7小时和3日肺形态学改变。结果：油酸可以致家兔实验性肺水肿，以肺水肿、肺出血、毛细血管微血栓和肺泡内透明膜形成为主要标志。大承气汤具有改善肺水肿、促进肺泡上皮特别是Ⅱ型上皮细胞增生、促进损伤修复的作用。结论：大承气汤的治疗作用可能与其促进肺泡上皮增生特别是Ⅱ型上皮细胞增生及修复、改善肺泡通气／血流比等多种作用有关。     

羚蝎胶囊对实验性脑出血大鼠的影响

以胶原酶合肝素为诱发剂，制成实验性脑出血大鼠模型，观察羚蝎胶囊（由羚羊角，全蝎，三七、水蛭组成，实验分组为A组）对该模型神经症状积分。脑含水量和脑组织形态学的影响，同时设正常组（B组0、模型组（C组）、脑血康口服液组（D组）作对照。结果：神经症状积分：造模后24小时，A组低于D组（P<0.05),脑含水量，造模后第4天，A组和D组显低于C组（P<0.05),但高于B组（P<0.001),A组和D组之间无显差异（P>0.05)，脑组织形态：A组病理学改变较D组轻，提示羚蝎胶囊有降低实验性脑出血大鼠脑含水量，促进血肿吸收，减轻神经细胞损伤，促进细胞增生的作用，疗效优于脑血康口服液。     

羚蝎胶囊对实验性脑出血大鼠脑细胞的保护机制

目的 :探讨羚蝎胶囊对实验性脑出血大鼠脑细胞的保护机制。方法 :( 1 )采用胶原酶与肝素复合法制造大鼠脑出血模型。动物分成正常、假手术、模型、清开灵、羚蝎胶囊等五组 (各 1 0只 )。 ( 2 )胰蛋白酶法制备大鼠脑细胞悬液 ,Ｆｕｒａ- 2 /ＡＭ(终浓度为 5μｍｏｌ/Ｌ)负载。用日立Ｆ - 450 0型双波长荧光分光光度计测定大鼠脑细胞内Ｃａ2 的浓度。 ( 3)采用黄嘌呤氧化酶法测定大鼠脑组织内ＳＯＤ的活力 ;硫代巴比妥酸(ＴＢＡ)法测定大鼠脑组织ＭＤＡ的含量。 ( 4 )用高效液相色谱仪测定大鼠海马组织中ＥＡＡ的含量。结果 :( 1 )在细胞外Ｃ…     

Present Situation and Prospects of TCM Treatment of Parkinson＇s Disease

Parkinson‘s disease (PD) is a chronic degenerative disease of the nervous system marked by tremor, muscle rigidity, hypokinesis, abnormal posture, and pathologically, selective loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra of the midbrain and obvious decrease of dopamine content in the striatum It is encountered mostly in the middle-aged and old persons and is one of main causes inducing their deformity.     

不同治则治法对大鼠心肌缺血再灌注损伤的心肌超微结构和Ca~(2+)分布的比较研究

用大鼠冠状动脉结扎──再通法制造缺血再灌注损伤模型，观察三组中药对此模型的心肌细胞保护作用，探索中药对心肌超微结构变化和Ca2+分布特点的作用机理。结果三组中药（尤其活血化瘀法）能使心肌超微结构明显改善，减轻心肌细胞钙的沉积，同时也降低了CPK的含量。提示：中药复方改善心功能，其中一个主要机理为减轻细胞内Ca2+的超载，增强了细胞的生理功能。     

不同治则方药对大鼠局部脑缺血-再灌注模型脑组织能量代谢的影响

目的：了解熄风开窍、通腑化痰、清热熄风通络、活血化瘀等不同治则方药对脑缺血-再灌注大鼠脑组织能量代谢的影响。方法：用大脑中动脉闭塞(MCAO)法复制大鼠局部脑缺血-再灌注模型，分别灌服熄风开窍合剂、通腑合剂、羚蝎胶囊、中风回春丸，检测脑组织ATP酶的变化。结果：与模型组相比，羚蝎胶囊组、中风回春丸组Na^ -K^ -ATP酶、Ca^2 -ATP酶和Mg^2 -ATP酶活性均显著升高，熄风开窍合剂组Ca^2 -ATP酶、Mg^2 -ATP酶活性均显著升高，而通腑合剂组各ATP酶升高不显著。结论：以清热熄风通络、活血化瘀和熄风开窍治则为主立方的方药具有提高大鼠局部脑缺血-再灌注模型脑组织ATP酶活性的作用。     

大黄虫丸对大鼠脑组织NO ET T-AOC含量的影响

目的:观察大黄虫丸对胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型脑组织一氧化氮(N0)、内皮素(ET)、总抗氧化能力(T-AOC)含量的影响。方法:将大鼠随机成分4组,正常组、假手术组、模型组、中药组,选择胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型,在造模2h后,中药组大鼠给予大黄虫丸的混悬液2.5mL灌胃,正常组、假手术组、模型组予等量的生理盐水灌胃,每天1次,3天后断头处死取脑,观察各组大鼠脑组织一氧化氮(N0)、内皮素(ET)、总抗氧化能力(T-AOC)含量。结果:造模后,模型组脑组织中的N0、ET含量较假手术组明显升高(P<0.05),而中药大黄虫丸组能明显的降低造模后脑组织中N0、ET的上升,与模型组相比有显著性差异(P<0.05),模型组脑组织中的T-AOC含量较假手术组明显降低(P<0.05),中药大黄虫丸组能提高造模后脑组织中T-AOC的降低(与模型组相比,P<0.05)。结论:中药大黄虫丸能降低胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型脑子组织中N0、ET的上升,提高造模后脑组织中T-AOC的含量,从而发挥对大鼠脑出血损伤的保护作用。