柱层析——分光光度法测定益母草中总黄酮含量

目的建立益母草药材总黄酮含量测定方法,并对药材资源进行初步考察。方法以芦丁为对照品,样品经聚酰胺柱分离纯化,三氯化铝试剂显色后,采用紫外分光光度法在412 nm波长处测定总黄酮含量。结果芦丁在4.8~29.0μg/m l范围内与吸光度有良好线性关系,r=0.9996,平均回收率为102%,RSD=3%。结论该方法操作简单、准确,可作为益母草药材的质量分析方法。     

黄芪保心汤对缺血心肌心功能及心肌细胞超微结构的影响

目的：通过结扎冠状动脉造成大鼠急性心肌缺血损伤模型,探讨复方黄芪保心汤对缺血心肌心功能及心肌细胞超微结构的影响。方法：结扎冠状动脉造成大鼠急性心肌缺血损伤模型,以目前治疗冠心病疗效确切的复方丹参滴丸作对照,试图观察黄芪保心汤对缺血心肌心功能（病理生理）及心肌超微结构（病理解剖）的影响。结果：实验性心肌缺血大鼠的心功能明显下降,心肌结构改变显著,黄芪保心汤和复方丹参滴丸均能增强大鼠的心肌收缩功能,改善心肌形态学和细胞超微结构的改变,与模型组相比,有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）,但二者相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：以益气活血化痰立法的黄芪保心汤具有良好的抗心肌缺血作用,其作用机理可能与增强心肌收缩力、抑制心肌细胞的坏死和凋亡有关,提示中药复方制剂在防治心肌缺血方面大有潜力。     

益心口服液预处理对急性心肌缺血大鼠CEC、血浆ET、CGRP及心肌病理形态学的影响

目的 研究益心口服液预处理对急性心肌缺血大鼠心血管的保护作用。方法 设假手术组、模型对照组、维拉帕米组、益心口服液组,建立急性心肌缺血模型。造模后2h时采血测血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、循环内皮细胞(CEC)计数,并进行心肌病理形态学观察。结果 益心口服液和维拉帕米均可降低急性心肌缺血大鼠血浆ET(P<0.05)和CEC(P<0.01)水平,减轻心肌病理形态学改变。维拉帕米组血浆CGRP低于模型对照组(P<0.05).益心口服液组和维拉帕米组间上述三指标无显着性差异。结论 益心口服液预处理可减轻心肌及血管内皮细胞损伤,调节急性心肌缺血时所发生的ET、CGRP分泌失衡。     

滋补肝肾通络解毒中药对帕金森病大鼠旋转行为的影响

目的：阐明滋补肝肾通络解毒中药治疗帕金森病的作用机制。方法：采用6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)注射于脑右侧黑质造成偏侧帕金森病(Parkinson’s disease，PD)模型，并用滋补肝肾通络解毒中药进行治疗，同时设立正常对照组、假手术组，观察中药对PD大鼠旋转行为的影响。结果：正常对照组、假手术组在治疗前后均未发现动物有旋转行为。而模型组和中药组在治疗前两组的旋转圈数分别为269&;#177;99和253&;#177;50，差异无显著性意义(t=0．649，P&;gt;0．05)；治疗后两组的旋转圈数分别为263&;#177;87和164&;#177;35，差异有显著性意义(t=4．748,P&;lt;0．01)。其中，与模型组比较，中药组的旋转圈数明显减少(t=9．544,P&;lt;0.01)。     

Lipopolysaccharide ＂Two-hit＂ Induced Refractory Hypoxemia Acute Respiratory Distress Model in Rats

To establish a stable and reliable model of refractory hypoxemia acute respiratory distress syndrome （ARDS） and examine its pathological mechanisms, a total of 144 healthy male Wistar rats were randomized into 4 groups： group Ⅰ （saline control group）, group Ⅱ （LPS intravenous ＂single-hit＂ group）, group Ⅲ （LPS intratracheal ＂single-hit＂ group） and Group IV （LPS ＂two-hit＂ group）. Rats were intravenously injected or intratracheally instilled with a large dose of LPS （10 mg/kg in 0.5 mL） to simulate a single attack of ARDS, or intraperitoneally injected with a small dose of LPS （1 mg/kg） followed by tracheal instillation with median dose of LPS （5 mg/kg） to establish a ＂two-hit＂ model. Rats in each group were monitored by arterial blood gas analysis and visual inspection for three consecutive days. Arterial blood gas values, lung wet/dry weight ratio and pathological pulmonary changes were analyzed to determine the effects of each ALI/ARDS model. Concentrations of TNF-α, IL-1 and IL-10 in the bronchoalveolar lavage fluid （BALF） and blood plasma were meastired by using enzyme-linked immunosorbent assays （ELISA）. Our resulsts showed that single LPS-stimulation, whether through intravenous injection or tracheal instillation, could only induce ALl and temporary hypoxemia in rats. A two-hit LPS stimulation induces prolonged hypoxemia and specific pulmonary injury in rats, and is therefore a more ideal approximation of ARDS in the animal model. The pathogenesis of LPS two-hit-induced ARDS is associated with an uncontrolled systemic inflammatory response and inflammatory injury. It is concluded that the rat ARDS model produced by our LPS two-hit method is more stable and reliable than previous models, and closer to the diagnostic criteria of ARDS, and better mimics the pathological process of ARDS.     

大承气汤治疗大鼠内毒素性ARDS的疗效分析及免疫调节机制研究

目的： 探讨大承气汤对内毒素“二次打击”致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的防治作用,为中西医结合防治呼吸道疾病提供有效依据。方法: 48只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组:生理盐水对照组、ARDS模型组、大承气汤治疗组、地塞米松治疗组,每组12只。采用大肠杆菌脂多糖(LPS) “二次打击”建立大鼠ARDS动物模型,结合动脉血气分析、肺湿/干重(W／D)比值及肺组织病理学观察和评分,评价大承气汤的药理作用;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆与支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）、IL-10水平,探讨大承气汤的药理作用和免疫调节机制。结果: (1)大承气汤可以显著提高ARDS大鼠动脉血氧分压,增加血氧饱和度,降低肺湿/干重比值和肺病理损伤,减轻肺水肿和肺部炎症反应,因而具有改善肺通气、抑制肺部炎症反应、减轻肺损伤功能。(2)大承气汤可使血浆促炎细胞因子（TNF-α、IL-1）和抗炎细胞因子（IL-10）水平同时降低,使BALF中TNF-α、IL-1水平降低同时IL-10水平却升高,因而表现出对全身炎症反应和局部炎症反应不同的免疫调节机能。结论: 大承气汤抑制肺部炎症反应除与下调全身炎症反应水平有关,同时还与促进肺部抗炎介质产生、调节肺部促炎介质/抗炎介质的平衡有关。     

羚蝎胶囊对局灶性缺血再灌注大鼠脑组织病理形态学的影响

目的:探讨羚蝎胶囊防治大鼠急性缺血性中风的作用机制。方法:将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、羚蝎胶囊组。采用穿线法行大脑中动脉栓塞术复制大鼠脑缺血再灌注模型,术前第7天至术后24 h分别给予相应的干预措施。术后24 h检测各组大鼠患侧脑组织含水量,并观察患侧脑组织形态学变化。结果:造模后24 h,羚蝎胶囊组和模型组大鼠患侧脑含水量较假手术组显著升高(P0.05,P0.01),羚蝎胶囊组较模型组明显下降(P0.05)。羚蝎胶囊组大鼠脑组织结构损伤明显较模型组减轻。结论:羚蝎胶囊能显著减轻脑缺血再灌注大鼠脑水肿及脑组织损伤。     

内毒素“二次打击”顽固性低氧血症大鼠ARDS模型建立与评价

目的： 研究经内毒素“一次打击”和“二次打击”后致急性肺损伤(ALI)大鼠,建立稳定和可靠的急性呼吸窘迫综合征（ARDS）动物模型,并探讨其意义和理论依据。方法: 大肠杆菌脂多糖(LPS) 较大剂量（10 mg/kg）静脉注射或气管滴入致伤大鼠,复制“一次打击”ARDS模型;LPS小剂量（1 mg/kg）腹腔注射致伤大鼠后,再予中等剂量LPS（5 mg/kg）气管滴入,建立“二次打击”ARDS模型。连续3 d动脉血气分析,结合肺湿重/干重比值(W／D)及肺组织病理观察,评价3种ALI/ARDS模型异同。测定血浆与支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1、IL-10水平,探讨LPS二次打击法可能致病机制。结果: (1)单次LPS打击（无论是静脉注射或气管滴入）仅引发大鼠ALI和一过性低氧血症, LPS二次打击法可以引发大鼠更为持久的低氧血症和特异性肺损伤,是较为理想的ARDS的动物模型。(2)LPS二次打击法引发的ARDS发病机制与全身失控性炎症反应与肺的特异性损伤有关。结论: LPS二次打击法可建立更为稳定可靠的符合诊断指标的大鼠ARDS模型,并能更好地反映肺损伤的病理变化。     

活血潜阳方对血瘀阳亢痰浊型SHR大鼠胰岛素抵抗及胰岛素信号通路的影响

目的:探讨活血潜阳方治疗高血压和改善胰岛素抵抗可能的作用机制。方法:将自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR对照组、血瘀阳亢痰浊模型组及活血潜阳方治疗组,另设雄性京都大鼠(WKY)为正常对照组。治疗组予灌胃活血潜阳方混悬液(15 ml·kg-1·d-1,每毫升约含生药4.22 g),其余各组灌胃等量生理盐水,连续8周。检测各组大鼠血压、血脂、血糖及胰岛素代谢情况;RT-PCR测定胰岛素信号通路关键基因的mRNA表达水平,并用免疫印迹加以验证。结果:治疗组SHR大鼠的血压、三酰甘油、胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数均较SHR模型组显著下降(P0.01);且治疗组大鼠血浆葡萄糖激酶(GCK)、6-磷酸葡萄糖酶催化亚基(G6PC)表达明显上调(P0.01),丙酮酸脱氢酶激酶4(Pdk4)明显下调(P0.05)。结论:活血潜阳方可改善血瘀阳亢痰浊型SHR大鼠的血压、血脂、胰岛素抵抗的进行性发展,其机制可能与提高胰岛素PI3K信号通路GCK、G6PC的表达及降低Pdk4的表达有关。     

大黄(庶虫)虫丸对大鼠脑出血模型脑组织IL-1βmRNA、iNOSmRNA表达的影响

目的:观察大黄(庶虫)虫丸对大鼠脑出血模型脑组织IL-1βmRNA、iNOSmRNA表达的影响.方法:以雄性Sprauge-Dawley大鼠为实验动物,共分4组,正常组、假手术组、模型组、中药组.模型组和中药组选择胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型,中药组予大鼠大黄(庶虫)虫丸的混悬液2.5ml灌胃,每天1次,正常组、假手术组、模型组予等量的生理盐水灌胃,每天1次,3天后将大鼠断头处死,快速取出血肿周围组织约100mg,以RT-PCR法测定脑组织中IL-1βmRNA、iNOSmRNA表达.结果:正常组、假手术组脑组织中IL-1βmRNA、iNOSmRNA仅有少量表达,模型组、中药组组织的IL-1βmRNA、iNOSmRNA表达明显上调,和正常组、假手术组有明显的差异(P<0.05).但中药大黄(庶虫)虫丸能明显的下调脑出血大鼠脑组织IL-1βmRNA、iNOSmRNA的表达,和模型组相比(P<0.05).结论:胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型血肿周围脑组织IL-1βmRNA、iNOSmRNA表达增高,大黄(庶虫)虫丸对脑出血大鼠脑组织IL-1βmRNA、iNOSmRNA的表达增加有下调作用.