Sox9基因转染对骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响

目的 探讨Sox9基因转染对骨髓间充质干细胞(MSCs)成软骨分化的影响.方法 采用密度梯度离心和贴壁培养法分离兔骨髓MSCs,体外培养扩增.阳离子脂质体介导重组真核表达Sox9质粒转染骨髓MSCs,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹实验(Westem blot)的方法检测基因产物的表达,荧光显微镜和流式细胞术测定细胞转染效率;四甲基噻唑蓝(MTT)法测定基因转染对细胞增殖能力的影响,流式细胞术对转基因细胞进行细胞周期分析;通过Westem blot,RT-PCR和免疫组织化学染色的方法检测Sox9基因转染对MSCs成软骨分化的影响.结果 脂质体介导Sox9基因可以成功地转染兔骨髓MSCs;Sox9基因转染对细胞增殖能力无明显影响;基因转染后的细胞表达软骨分化特异性分子Ⅱ型胶原,Sox9,aggrecan等明显增加.结论 Sox9基因转染骨髓MSCs可以获得稳定表达,基因表达产物可以促进骨髓MSCs向软骨方向的分化.     

儿童脊柱侧凸非融合手术治疗的发展及现状

背景：儿童脊柱侧凸的治疗是脊柱外科的挑战之一,外科手术治疗尚没有满意的方法. 目的：综述儿童脊柱侧凸外科治疗方法的发展及现状,分析各种方法的利弊,展望儿童脊柱侧凸非融合手术治疗的发展. 方法：以“Scoliosis,Infantile scoliosis,Juvenile scoliosis,fusionless surgery,spinal implant”为英文检索词,“脊柱侧凸,少儿型脊柱侧凸,青少年型脊柱侧凸,脊柱内固定器,脊柱侧凸非融合手术”为中文检索词,检索Pubmed数据库、CNKI数据库2001至2012年发表的相关文献.共检索到113篇文献,排除无关重复的文献,保留36篇进行综述. 结果与结论：目前脊柱侧凸外科治疗主要方法中,撑开技术可以保证脊柱的生长但需要不断的后期延长,生长导向技术可以避免不断的延长手术,但脊柱的生长不能得到保证,也不能纠正脊柱的旋转畸形;而生长调节技术对脊柱畸形的纠正有一定的作用,但它对严重脊柱畸形的作用是不确定的;可生长三维矫形技术的动物实验证明既能保证脊柱的生长,同时能纠正脊柱的旋转,术后不需要不断地延长,理论上是较理想的治疗方法,需要临床研究验证.     

自体骨膜复合骨髓间充质干细胞移植修复免关节软骨缺损

背景:自体骨髓间充质干细胞及骨膜移植等方法可促进关节软骨缺损的修复,但其各自的成软骨能力有限,治疗效果欠佳.目的:观察自体骨膜复合向软骨细胞诱导的骨髓间充质干细胞移植修复软骨缺损的疗效.设计、时间及地点:随机分组对照动物实验,于2005-08/2007-03在山西医科大学第二医院骨科实验室完成.材料:6～8月龄新西兰白兔18只,按随机数字表法分为3组,即骨膜复合骨髓间充质干细胞组、单纯骨膜组及空白对照组,每组6只12个膝关节标本.方法:骨膜复合骨髓间充质干细胞组采用胰酶消化法采集骨髓间充质干细胞进行贴壁培养,加入转化生长因子β1向软骨细胞进行诱导分化,同时进行PKH-26细胞膜免疫荧光标记.在全部兔双侧股骨内侧髁造成直径3 mm,深度3 mm的全层软骨缺损,骨膜复合骨髓间充质干细胞组、单纯骨膜组取同侧胫骨上段内侧骨膜,骨膜生发层朝向骨髓腔覆盖软骨缺损,骨膜复合骨髓间充质干细胞组先期缝合3针,向缺损区注入1×109L-1骨髓间充质干细胞细胞悬液20μL,植入细胞后缝合最后1针.单纯骨膜组只进行单纯骨膜覆盖缺损处理;空白对照组只钻孔不作任何处理.主要观察指标:术后6,12周时,对缺损部位进行大体观察、组织学观察、Wakitani评分以及Ⅱ型胶原免疫组化及原位杂交检测.结果:所有缝合骨膜未发现脱落,骨膜复合骨髓间充质干细胞组6周时,软骨缺损已由透明软骨样修复组织填充,12周时修复组织进一步改建,且修复组织中细胞主要为带有PKH-26荧光标记的植入细胞.单纯骨膜组缺损区修复组织为乳白色,表面光滑稍微凹陷,与周围正常软骨组织之间界限清晰;空白对照组缺损区多数比较凹陷,或缺损部位形状不规则,周围软骨组织断裂.术后6,12周时,骨膜复合骨髓间充质干细胞组Wakitani组织学评分均优于单纯骨膜组和空白对照组(P＜0.05),单纯骨膜组的评分优于空白对照组(p＜0.05).同时,骨膜复合骨髓间充质干细胞组修复组织内细胞周围基质Ⅱ型胶原免疫组化及原位杂交染色阳性,证实修复组织内的细胞为植入细胞.结论:自体骨膜复合向软骨细胞诱导的骨髓间充质干细胞移植可形成透明软骨样修复组织修复关节软骨缺损.     

可注射性硫酸钙/羟基磷灰石骨替代材料的性能研究

目的:探讨可注射性硫酸钙/羟基磷灰石骨替代材料的可行性。方法:用Gillmore双针法,万能力学测试机,注射器推注法测定含40%重量羟基磷灰石(HA)的α-半水硫酸钙与固化液欧乃派克混合后的凝固时间,抗压强度和可注射能力。结果:含40%重量HA的α-半水硫酸钙在37℃生理盐水条件下初凝时间和终凝时间分别为15和25 min,抗压强度为(10.7±0.6)MPa,可注射的平均时间为(5.8±0.4)min。结论:含40%重量HA的α-半水硫酸钙可以满足临床操作的要求,作为一种可注射性骨替代材料是可行的。     

YKL-40在骨关节炎发病中的作用

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是临床常见病和多发病,随着社会的老龄化其发病率越来越高。由于OA影像学改变比OA症状出现要迟,传统依据影像学改变加临床症状来诊断OA的方法不能及时早期诊断OA,故OA的早期诊断仍是骨科领域疑难问题之一。随着分子生物学发展,体液中的部分生物标志物(biomarker,BM)在OA诊断方面的作用日益受到国内外学者的重视,如透明质酸[1]、YKL-40。YKL-40是体液中可反映OA病情的BM之一。本文就YKL-40在OA诊断方面的研究做一综述。1YKL-40的来源、结构、分布和功能YKL-40是属于壳质酶蛋白家族的一种糖蛋白,但…     

TRPV4和PIEZOs介导软骨细胞力转导的研究进展EI北大核心

软骨细胞转导机械力信号的力转导过程在关节软骨生长、发育和骨性关节炎(OA)过程中发挥着重要作用。在关节软骨中,细胞外基质代谢活动调控着软骨细胞的基质力学微环境。因此,理解软骨细胞感受基质力学微环境的力转导机制能够通过精准靶向机械力感受器有效建立OA治疗策略。近十几年,大量研究证实力敏感离子通道TRPV4和PIEZOs在关节软骨细胞中大量表达,而且介导机械力相关的软骨重塑和损伤响应。本文综述了软骨细胞感受基质力学微环境过程中TRPV4和PIEZOs介导的力感受和力响应方面的相关研究,同时也介绍了TRPV4和PIEZOs介导炎症信号调控骨性关节炎方面的进展。本文为理解关节软骨发病机制和寻求可能药物靶点,以及设计细胞诱导性生物材料提供了新思路。