双歧杆菌对小鼠急性实验性结肠炎作用的研究

目的 研究双歧杆菌在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性溃疡性结肠炎小鼠模型中的作用.方法 将80只BALB/C小鼠均分为8组,每组10只.除正常对照组、单纯0501菌株组、单纯c122菌株组外,其他5组动物均给予5%DSS造模7 d.在造模开始前2 d,阴性对照组用0.9%氯化钠液灌肠、阳性对照组用柳氮磺胺吡啶(SASP)20 mg/ml灌肠、DSS+0501菌株组用1×109 CFU/ml 0501菌液灌肠、DSS+c122菌株组用1×109 CFU/ml c122液菌灌肠.9 d后处死动物取结肠标本,行H-E染色,观察镜下结肠病理变化,并用免疫组化染色、RT-PCR技术分析结肠黏膜中白细胞介素(IL)-10 mRNA及蛋白表达.结果 DSS造模过程中给予双歧杆菌灌肠小鼠(0501菌株组和c122菌株组)的结肠炎性反应程度较模型组加重,结肠黏膜IL-10表达减少.而单纯给予双歧杆菌灌肠小鼠(单纯0501菌株组和单纯c122菌株组)未见结肠炎表现.结论 双歧杆菌的某些菌株在结肠黏膜屏障功能受损情况下,可加重溃疡性结肠炎小鼠的结肠黏膜损伤.     

血浆D-二聚体在肝硬化并自发性细菌性腹膜炎患者中的临床意义

背景:D-二聚体是纤溶过程中的一种降解产物,其异常反映了体内凝血和纤溶系统的过度激活,在感染等非血栓性疾病中明显增高。目的:探讨血浆D-二聚体在肝硬化并自发性细菌性腹膜炎患者中的临床意义。方法:选取32例肝硬化并自发性细菌性腹膜炎患者(A组)、64例肝硬化并单纯腹水患者(B组),以34名健康体检者作为对照(C组),采用免疫比浊法检测血浆D-二聚体水平,并分析肝硬化患者血浆D-二聚体水平与Child-Pugh评分的关系。结果:A组血浆D-二聚体水平高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组、B组患者血浆D-二聚体水平与Child-Pugh评分均相关(r=0.388,r=0.250;P均<0.05)。结论:血浆D-二聚体应作为肝硬化患者,尤其是并发自发性细菌性腹膜炎患者的重要观察指标。     

小鼠去信号肽AFP/DC疫苗体外抗肝癌免疫活性的检测

目的构建Balb/c小鼠具有分泌性信号肽的AFP1cDNA和去掉信号肽的AFP2cDNA真核表达载体,分别在小鼠树突状细胞(DCs)中表达,观察其抗肝癌的免疫活性。方法构建AFP1cDNA和AFP2cDNA,真核表达载体,体外转染DC,制备AFP1-DC和AFP2-DC疫苗,以ELISA、MTT方法等检测其免疫活性。TUNEL法检测肝癌细胞凋亡情况。结果所构建的真核表达质粒PcDNA3.1( )/AFP1和PCDNA3.1( )/AFP2在小鼠树突状细胞中获得稳定高效表达,其中PcDNA3.1( )/AFP2明显刺激T细胞增殖,刺激指数(SI)明显高于空质粒组,AFP2/DC疫苗诱导出肿瘤特异性杀伤肝癌细胞活性明显高于空质粒组。结论成功地构建了真核表达载体PcDNA3.1( )/AFP1和PcDNA3.1( )/AFP2,AFP2/DCS能够诱导较强的特异性抗肝癌免疫效应,其机制可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。     

上消化道Dieulafoy病变的临床与内镜特点分析

【目的】分析上消化道Dieulafoy病变的临床与内镜特点。【方法】对37例上消化道Dieulafoy病变出血患者其临床与内镜特点进行回顾性总结。【结果】本组37例上消化道Dieulafoy病变出血患者中,男女比为4.3∶1。平均年龄52.7岁。临床上以突发性、间歇发作的呕血、黑便为主要特点。病灶位于胃食管连接处以下6cm范围内占51.4%,位于胃大部分切除术后胃空肠吻合口占24.3%。内镜下病变主要呈现为孤立性圆形或椭圆形黏膜缺损者占89.2%,其大小介于2~3mm之间,黏膜缺损的中央可见突出的小动脉,或于裸露血管上可有血痂、渗血或见搏动性出血。【结论】上消化道Dieulafoy病变是引起上消化道大出血的原因之一,临床上以突发性、间歇发作的呕血、黑便为主要特点。该病不仅好发于胃食管连接处以下6cm区域,也好发于胃大部分切除术后的胃空肠吻合口。本病的内镜表现多种多样,最常见的内镜表现是孤立性圆形或椭圆形黏膜缺损,黏膜缺损的中央可见突出的小动脉,或于裸露血管上可有血痂、渗血或见搏动性出血。     

乙型肝炎病毒L60V、I97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响

目的研究L60V、I97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响。方法构建变异核壳蛋白融合表达载体pEGFP-V60和pEGFP-L97和变异按壳蛋白阳性HepG2细胞椿；荧光显微镜和western blotting检测按壳蛋白表达；以TNF-α、Act—D谤导HepG2细胞株凋亡。0、16、32h和48h采用流式细胞术检测细胞凋亡，32h时采用共聚焦检测细胞凋亡比例。结果成功建立融合蛋白表达载体和融合变异极壳蛋白表达细胞系，各细胞株核壳蛋白表达量基本相同；16、32、48h时，pEGFP-WT、pEGFP-V60和pEGFP-L97表达细胞椿凋亡率均明显低于pEGFP-C1细胞株（P〈0．05）；32h和48h时。pEGFP-V60和pEGFP-L97细胞株凋亡率均明显高于pEGFP-WT细胞椿（P〈0．05）；32h时激光典聚焦检测结果一致。结论乙型肝炎病毒L60V、I97L变异按壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响与野毒株按壳蛋白不同。L60V、I97L变异可能是慢性肝炎活动的原因之一。     

p16、CDK_4及Rb在结肠病变中的表达研究

采用免疫组化法分析６０例结肠癌、结肠息肉及结肠炎标本Ｒｂ、ＣＤＫ４和ｐ１６的蛋白表达。ｐ１６表达随细胞分化程度降低而减少，结肠炎组织ｐ１６表达随细胞分化程度降低而减少，结肠炎组织ｐ１６表达高于癌和息肉组。Ｒｂ在癌组织和息肉组织中表达明显减少。ＣＤＫ４在三种病变组织中表达无显著差异。推测结肠癌变与ｐ１６／ＣＤＫ４复合物降低，对Ｒｂ磷酸化抑制减少，使细胞分裂增殖增加有关。     

青春双歧杆菌和嗜酸乳酸杆菌对急性期和恢复期结肠炎小鼠Th1/Th2亚群的影响

Objective To observe and analyze the effect of B. Adolescentis and L. Acidophilus on the proportion of Th cell Th1/Th2 in peripheral blood of UC-mice in acute stage and recovery stage. Method 40 BABL/c mice were induced by 3% DSS water for 7 clays free drinking and then with distilled water for 10 days. They were randomly allocated in 4 groups: NS group, SASP group, BF0624 group and LT0637 group, also the fifth group-10 normal animals. The blood of mice were collected by removing their eyes at day 8 and day 18, and then the mononuclear cells were iso]atecl. The proportion of Th1/Th2 was analyze through flow eytometry,hy labeling the specific antibody ot Th cellular membrane with the CD4 antibody, and the cytoplastie antigen of Thl or Th2 with IIA antibody or IF'N-γ antibody. Result The proportion of Th1/Th2 in normal mouse was 0. 84 -0. 94,and it raised up in DSS-mice at both acute stage and recovery stage. It decreased unequally after 7 or 17 days'B, adoleseentis, L. Acidophilus and SASP treatment, but that of all three groups were lower than NS group (2.21±0. 83). Even the proportion got close to the normal animals after 17 days'L. Acidophilus -treated. Conclusion The proportion of Thl/Th2 increased at the acute stage and recovery stage of DSS-mice. Both B. Adoleseentis and L. Acidophilus had more effective than SASP on decreasing the proportion of Th1/Th2 at two stages,ospecially L. Acidophilus.