基于二代测序技术的常染色体隐性遗传性多囊肾病家系胚胎植入前遗传学分析

目的 探讨二代测序(NGS)技术在常染色体隐性遗传性多囊肾病(ARPKD)家系胚胎植入前遗传学检测(PGT)中的应用价值.方法 选取1个ARPKD家系,采用Sanger测序调查家系成员多囊肾/多囊肝病变1(PKHD1)基因突变情况.以PKHD1基因编码区为目标区域,在基因上下游2 M区域内选择120个高密度紧密连锁的单...     

五个完全性雄激素不敏感综合征家系雄激素受体基因突变的研究

雄激素受体（ＡＲ）是介导雄激素在靶细胞中作用的关键大分子,ＡＲ结构与功能异常是造成雄激素不敏感综合征（ＡＩＳ）或雄激素抵抗征的主要原因。ＡＩＳ为Ｘ连锁的隐性遗传病,分为完全型（ＣＡＩＳ）和不完全型,表现为程度不同的男性假两性畸形。迄今国外已报道了几十...     

人卵巢癌细胞雄激素受体测定及性激素对细胞增殖的影响

以人工合成的雄激素［１７ａ－甲基＾３Ｈ］－三烯醇酮（＾３Ｈ－Ｒ１８８１）为配体，采用完整细胞受体测定法，测定人卵巢癌ＨＯ－８９１０细胞的雄激素受体（ＡＲ），并观察不同浓度（０．０１－１μｍｏｌ／Ｌ的雌二醇、孕酮琢睾酮对ＨＯ－８９１０细胞增殖的影响。     

糖皮质激素对糖皮质激素受体α和β mRNA表达的调节作用

目的：研究糖皮质激素对人类糖皮质激素受体α和β mRNA表达的调节作用。方法：采用定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测受体mRNA。结果：人骨肉瘤细胞系、卵巢癌细胞系及外周血白细胞中除有糖皮质激素受体α mRNA表达外，还有糖皮质激素受体β mRNA的表达；糖皮质激素对糖皮质受体α和β mRNA的表达均具有明显的降调作用，且具有剂量依赖性和时间依赖性特点。结论：糖皮质激素受体β在人类多种组织细胞中均有表达，而且其表达受糖皮质激素的调节。     

前列腺癌中发现的4种雄激素受体突变体在PC3细胞中转录激活功能的研究

目的 :雄激素受体 (AR)基因突变在前列腺癌 (PC)的发生、发展中具有重要作用。本实验室曾应用PCR -SSCP法 ,从 5 0余例PC患者肿瘤组织中筛选出 4种AR基因点突变 (G14 2V、D2 2 1H、E872Q、M886I) ,它们均位于AR重要的功能区中。本实验拟观察在雄激素的激动剂二氢睾酮 (DHT)以及其他甾体激素 (雌二醇及孕激素 )作用下 ,这 4种突变体在前列腺癌细胞系PC3中转录激活功能的变化 ,为阐明AR基因突变对AR功能的影响及其在前列腺癌发生、发展和治疗中的作用提供理论依据。方法 :将野生型AR(wtAR)或AR突变体的表达载体与报告基因 (p…     

成纤维细胞在炎症反应中具有“岗哨细胞”的作用

长期以来人们认为成纤维细胞的作用只是维持组织结构和参与损伤修复,是一种比较惰性的细胞。但近年来的研究令人惊喜地发现;成纤维细胞与淋巴细胞相似,也是具有异质性和组织特异性的细胞群,而且也能被细菌产物、损伤组织释放的产物及促炎细胞因子等激活。激活的成纤维细胞可出现新的功能,如产生细胞因子和暂时性地合成并分泌趋化因子,招引调动白细胞杀灭细菌,启动炎症反应等,因此被称为“岗哨细胞”（ｓｅｎｔｉｎｅｌ ｃｅｌｌｓ）。此外,成纤维细胞还能产生前列腺素,调节免疫细胞活性及控制细胞外基质的合成。由于许多组织中都…     

对癫痫患儿的药学服务

癫痫是神经内科的一种常见疾病，据报道我国癫痫的患病率为0.7％，儿童和青少年为高发人群，大多数病人在10岁以前发病。目前，癫痫已成为儿童的常见病和多发病。癫痫病人需长期或终生服用抗癫痫药物(antiepileptic drugs，AEDs)，AEDs在癫痫的预防和控制发作治疗上起着至关重要的作用。由于AEDs在儿童体内代谢与成人有明显差异，     

糖皮质激素抑制人前列腺癌PC-3细胞系增殖的可能机制

目的:观察地塞米松对前列腺癌PC-3细胞中转录因子NF-κB及其下游靶基因cyclinD1的调节作用,探讨其抑制PC-3细胞增殖的可能机制.方法:MTT法检测地塞米松对PC-3细胞增殖的影响;转染和报告基因的方法比较多种肿瘤细胞中NF-κB的基础转录活性并检测地塞米松对PC-3细胞NF-κB转录活性的调节;Western 印迹法检测地塞米松对PC-3细胞cyclinD1蛋白表达的影响.结果:地塞米松抑制PC-3细胞的增殖;PC-3细胞中NF-κB处于组成型激活状态,地塞米松抑制PC-3细胞中转录因子NF-κB的转录活性;地塞米松下调PC-3细胞中cyclinD1蛋白的表达.结论:地塞米松抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,这可能与其抑制转录因子NF-κB的转录活性及其下游的靶基因cyclinD1的蛋白表达有关.     

利用载体介导的RNA干扰技术抑制人骨肉瘤细胞HOS-8603内维生素D3受体的表达及功能

目的:构建由载体介导的抑制人维生素D3受体(VDR)表达的RNA干扰载体,并在人骨肉瘤细胞中初步研究其对VDR表达及功能的影响.方法:通过在线筛选设计了两段针对人VDR的RNAi序列,并与载体pSilencer-2.1-U6连接,获得了表达载体pSilencer-2.1-U6-VDR1与pSilencer-2.1-U6-VDR2.利用脂质体转染法分别转入人骨肉瘤细胞系HOS-8603细胞中,通过Western 印迹法检测其对内源性VDR蛋白表达、对1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]激活PKC作用的影响,利用细胞计数和MTT的方法检测其对1,25(OH)2D3抑制HOS-8603细胞增殖作用的影响.结果:在分别转染pSilencer-2.1-U6-VDR1/2的HOS-8603细胞中,与对照细胞比较,内源性VDR蛋白的表达、1,25(OH)2D3对细胞的增殖抑制作用以及1,25(OH)2D3快速诱导PKC磷酸化的作用均有显著降低.结论:构建的表达载体pSilencer 2.1-U6-VDR1与pSilencer 2.1-U6-VDR2均能在细胞水平显著抑制内源性VDR基因的表达,并能有效阻断一些由VDR介导的1,25(OH)2D3生物学作用,为进一步研究VDR与维生素D3的功能提供了一个有用工具.     

应用CMA技术诊断Williams-Beuren综合征的临床特征分析

目的 探讨和研究Williams-Beuren综合征(Williams-Beuren syndrome,WBS)的临床及遗传学特点,提高对本病的认识,从而为本病的诊断及遗传咨询提供参考依据.方法 应用染色体微阵列分析技术(chromosome microarray analysis,CMA)诊断出26例WBS,对其临床...