卵母细胞体外成熟培养技术治疗多囊卵巢综合征患者的初步探讨

目的研究通过未成熟卵母细胞体外成熟（IVM）技术治疗多囊卵巢综合征（PCOS）患者的效果。方法对PCOS患者在月经周期3～4d开始给予小剂量（100—150IU）FSH刺激3d。周期8～10d，当出现直径为10—14mm卵泡，子宫内，膜厚度〉5mm，阴道B超引导下穿刺获取不成熟卵母细胞。将其行体外成熟培养28～31hrs，待排出第一极体后行常规单精子卵胞浆内显微注射（ICSI）-胚胎移植治疗。结果12例体外成熟培养周期中，3例获得临床妊娠，妊娠率为25．0％。结论未成熟卵母细胞体外成熟培养技术是使PCOS患者获得妊娠的可行方法。     

VLA-4和LFA-1参与HPP—EPC体内向缺血组织的归巢

目的研究极迟反应抗原（VLA-4）和淋巴细胞功能抗原（LFA-1）参与高增殖潜能内皮祖细胞（HPP—EPC）体内向缺血组织的归巢的情况。方法结扎股动脉构建裸鼠后肢缺血模型，移植经功能级别的VLA-4（或CD49d）和LFA-1（或CD11a）中和抗体阻断后的HPP-EPCs，观察肢体坏死长度和肢体脱失情况，用放射性核素方法检测缺血肢体血流恢复程度，组织学方法计数毛细血管密度和归巢到缺血区肌肉组织的荧光标记的内皮祖细胞数目。结果CD11a抗体组、CD49d抗体组及两种抗体联用组的肢体坏死长度都较同型对照抗体组为高（P〈0．05）。而且，两种抗体联用组比任一种抗体组的肢体坏死长度都要高（P〈0．05）。各抗体阻滞组血流恢复、毛细血管密度和归巢HPP—EPC细胞数目均较同型对照抗体封闭组低（P〈0．05）。而且，两种抗体联用组比任一种抗体组的肢体血流、毛细血管密度和归巢HPP—EPC细胞数目改善都明显（P〈0．05）。结论LFA-1和VLA-4参与了HPP—EPC体内向缺血组织的归巢过程。     

人类精液冷冻贮存及临床应用效果的初步报告

1981年11月开始了人类精液冷冻贮存的研究,使用两种不同的冷冻保护剂及两种冷冻方法。人类精液经保存30～145天,复温后的冷冻精子的生存率为30～60%。1982年运用于临床,5例试验者3例妊娠。     

荧光原位杂交技术检测不育男性精子染色体非整倍体

目的 :检测不育男性与正常男性的精子染色体非整倍体之间的差异 ,为宫腔内人工授精提供指导。方法 :1 2例不育患者 ,其中 1 0例为少、弱、畸精症患者 ( A组 ) ,2例精子数接近正常 ( B组 ) ,2例正常健康的献精者作为对照 ( C组 ) ,选用 X、Y和 1 8号染色体探针进行荧光原位杂交 ( FISH)检测精子的非整倍体。结果 :B组精子 X、Y、和 1 8号染色体的二体频率分别为 0 .3 0 %、0 .3 0 % ,与 C组 ( 0 .1 5%、0 % )相比差别无显著性 ;A组的X、Y和 1 8号染色体二体率分别为 1 .1 3 %、0 .96 % ,缺体率为 1 .1 3 %和 1 .6 % ,与其他两组相比 ,差别有显著性 ( P<0 .0 5)。估算 A组总的非整倍体率为 42 .44 % ,与 B组 6 .0 5%及 C组的 2 .59%比较 ,差别有显著性 ( P<0 .0 5)。结论 :不育男性精子的染色体非整倍体显著高于正常 ,对少、弱、畸精症患者的精液标本可进行洗涤优化处理后行宫腔内人工授精 ,达到助孕、优生的目的     

骨髓成纤维细胞条件培养液对巨核系细胞体外增殖和血小板体内生成的影响

目前,临床上化疗、放疗及造血干细胞移植已广泛开展,由于化疗和放疗对病人的造血系统,特别是巨核系产生严重损害,从而导致病人体内较长时期血小板数目减少、止血功能障碍,甚至危及生命[1]。因此,许多学者致力于研究、开发一些具有体内升血小板效应的药物。骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成部分,能分泌多种细胞因子调节造血[2],而纯的骨髓成纤维细胞能分泌SCF,IL-11,IL-1,IL-6,GM-CSF,FGF等因子刺激巨核细胞生长和成熟[3~5]。湘雅医学院血液生理研究室的前期工作表明,骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)对巨核系成熟细胞和祖细胞的体…     

小鼠胚胎成纤维细胞条件培养液的蛋白质组学初步分析

目的：运用双向电泳、质谱技术对小鼠胚胎成纤维细胞饲养层条件培养液进行蛋白质组学分析,寻找其中可能具有抑制分化作用的蛋白因子。方法：用60Co γ-射线照射昆明白小鼠胚胎成纤维细胞,制成饲养层,置于ITS（胰岛素-转铁蛋白-硒钠盐）培养液中培养24h,收集条件培养液。用冷冻干燥、凝胶过滤层析、冷丙酮沉淀的方法从条件培养液中提取蛋白质样品,经双向电泳和银染得到双向电泳图谱,用Image master elite 2.0软件进行图像分析。取蛋白点进行酶解,再用CapLC-ESI-Q-TOF质谱进行分析,使用Mascot软件在NCBInr数据库中进行搜索。结果：双向电泳得到（221±67）个蛋白点的银染图谱,初步分析鉴定13个蛋白点。结论：昆明白小鼠胚胎成纤维细胞条件培养液中含有β-半乳糖苷结合蛋白、半胱氨酸富集的酸性分泌蛋白（SPARC）等成分。     

一例新发生的5p部分单体合并隐匿18p微小重复

目的 对1例临床表型严重的疑似猫叫综合征患者的核型进行确诊,为评估该家庭的再发风险提供依据.方法 采用高分辨G-显带核型分析患者及其父母,应用猫叫综合征关键区基因位点特异性探针(5p15.2,D5S23/D5S721)、Tel 5p/5q、Tel 18p/18q亚端着丝粒探针和18号染色体涂染探针进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测患者及其父母,SNP-Array对患者全基因组DNA进行扫描分析.结果 高分辨G-显带核型分析发现患者5p末端有微小缺失.应用猫叫综合征关键区基因位点特异性探针荧光原位杂交结果发现患者D5S23/D5S721位点缺失.高密度的SNP-Array芯片检测结果显示该患者5号染色体短臂末端存在15 Mb片段的缺失合并18号染色体短臂末端存在约2 Mb的重复.应用5p亚端着丝粒探针和18p亚端粒探针进行FISH进一步确定了患者携带一条源于5p和18p易位而来衍生的5号染色体.最终确定其染色体核型为46,XY,der(5)t(5;18)(p15.1;p11.31)dn.结论 SNP-Array结合FISH技术确诊了患者为新发生的5p部分缺失合并隐匿的18p部分重复,在其家庭复发风险低.SNP-Array能检出微细的染色体不平衡改变,对于染色体的病因学分析及复发风险评估具有重要价值.     

我国人类辅助生殖技术机构伦理委员会操作规程(建议稿)

目的:为规范我国ART医疗机构伦理委员会的伦理监督行为,建立我国ART伦理委员会操作规程或指南提供参考;方法:条文归纳法.按科学实施的要求将委员会职责行为规范以条文依次归纳概括;结论:该建议(稿)以伦理委员会实践探索为基础,适当接轨国际惯例和借鉴国外经验,具有较强操作性和借鉴意义.     

人卵体外受精时在受精培养基中分泌的类固醇激素

用克罗米芬(CC)人绝经期促性腺激素/人绒毛膜促性腺激素(hMG/hCG)或hMG/hCG超排处理28名妇女,得到了48个卵母细胞-放射冠细胞-丘细胞复合体(OCCC),按OCCC的丘细胞及放射冠细胞的分散程度将卵母细胞分型。经24h左右受精培养后,在受精培养基中出现大量孕酮和雌二醇,其中以中间型卵母细胞的分泌量最高,成熟型次之。未发现这些激素的分泌量与该卵受精成功有明显关系。     

ART医学伦理调控与医疗机构伦理委员会

解决ART应用中引发的伦理问题、难题的基本对策之一是加强医学伦理调控，推进医学伦理精神对医学过程的渗入，这是医学伦理学的一项重要使命。ART医学伦理调控的主要形式有伦理调节、导向、教育、辩护、制约等。医学伦理委员会是医学伦理调控体制化的表现和实现这种调控的重要途径。建立ART医疗机构伦理委员会对相关医学过程进行伦理监督已成为国际惯例，我国ART的应用及其健康发展，呼唤医疗机构伦理委员会伦理调控作用的有效发挥。