母体血浆中胎儿游离DNA的研究现状及进展

据统计,我国每年约有100万缺陷儿出生,不但影响了人口素质,也给社会和家庭带来了沉重的经济和精神负担.进行产前筛查和诊断是减少和避免出生缺陷的有效干预手段.传统的产前诊断取材主要包括绒毛、脐血和羊水等,这些胎儿样本均要通过有创性技术获得,增加了感染、流产、早产甚至胎儿宫内死亡的风险.近年来的研究发现在妊娠母体的血浆中存在游离胎儿DNA(cell-free fetal DNA)且含量相对丰富,这一发现为开展无创性的产前诊断提供了新的途径.本文将针对母体血浆中胎儿游离DNA的生物学特性,尤其是在遗传性疾病产前诊断中的研究新进展作一综述.     

控制性超排卵Gn启动剂量

<正> 垂体分泌的卵泡刺激素(follicular stimulationhormone,FSH)自月经周期前几天[前一周期的黄体晚期,黄体生成素(LH)峰后12 d]开始上升,在早卵泡期阶段(相对28 d周期约一周时间)分泌达到最高水平即阈值,并维持一定时间段即窗口期,以促成那些已募集的从静息状态进入生长期的卵泡完成选择、卵泡优势发育过程。其中对FSH反应最敏感     

动物血清和无血清培养人外周血树突状细胞效率比较的研究

目的:无血清培养和动物血清培养DC的效率比较。方法:胎牛血清培养基和无血清培养基分别联合细胞因子rhGM-CSF(100ng/ml)、rhIL-4(50ng/ml)和rhTNF-a(100ng/ml)培养人外周血分离的单个核细胞,分别于第9d收获细胞。从细胞数和细胞表面标志方面对血清培养基和无血清培养进行比较。结果:经过9d诱导培养,无血清培养,替代血清培养和动物血清培养DC的效率之间存在统计学差异(P<0.05)。结论:血清对DC分化发育存在影响。动物血清的添加可能更有利于DC的获得。     

改良超长方案在卵巢储备功能低下高龄患者中的应用

目的:探讨改良超长方案行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的高龄(年龄≥40岁)且卵巢储备功能低下(窦卵泡3~7个)患者的治疗结局。方法:采用随机对照前瞻研究的方法,将行IVF-ET的120例高龄且卵巢储备功能低下患者随机分成:改良超长方案组(A组,n=55)和拮抗剂方案组(B组,n=65),比较A、B组间IVF-ET结局。结果:A组的Gn使用总量(3 955.2±1194.3 IU)、Gn使用天数(11.7±1.9 d)、hCG注射日E2水平(2 452.7±1 285.6 pg/ml),hCG注射日子宫内膜厚度(12.1±2.3 mm)均明显高于B组(分别为2 022.5±610.1 IU、9.1±1.7 d、1 257.7±696.0 pg/ml、11.3±2.0 mm),P<0.05;周期取消率、优质胚胎率、妊娠率、着床率、流产率、宫外孕发生率组间均无统计学差异(P>0.05)。A组hCG注射日LH水平(1.0±0.5 mIU/ml)及P/E2值(0.3±0.2)明显低于B组(3.4±2.4 mIU/ml及0.5±0.2),P<0.05。结论:改良超长方案经过GnRHa的预处理,使患者充分降调节,hCG注射日可以获得良好的LH水平、P/E2值及内膜厚度;而hMG的使用,既可降低患者费用,又可以适当补充LH,提高子宫内膜容受性。因此,对于高龄且卵巢储备功能低下的患者,改良超长方案是一个经济有效的治疗选择。     

畸形精子症患者精子染色体非整倍体的研究

目的:研究畸形精子症患者精子染色体的非整倍体率。方法:应用18号、X和Y染色体着丝粒探针,采用荧光原位杂交(FISH)技术比较畸形精子症患者(畸精组,n=18)和生育力正常且精子正常形态率、浓度、活力等均正常男性(对照组,n=5)精子中18号、X和Y染色体的非整倍体率。结果:畸精组共计数精子58 178条,对照组共计数精子16 369条。畸精组和对照组杂交效率分别为97.5%和98.3%;染色体非整倍体类型主要有二体(XX18、YY18、XY18、Y1818和X1818)和二倍体(1818XX、1818YY、1818XY)。畸精组和对照组的18号染色体二体率分别为0.29±0.16%和0.03±0.02%,性染色体二体率分别为0.65±0.24%和0.05±0.02%,二倍体率分别为0.14±0.12%和0.04±0.03%。18号、X和Y染色体非整倍体率组间均有统计学差异(P<0.05)。结论:与生育力和精液各参数均正常男性相比,畸形精子症患者18号、X和Y染色体非整倍体率明显升高。     

体外受精／卵胞浆内单精子注射周期中子宫内膜厚度与妊娠关系的研究

自辅助生殖技术（ART）开展30多年来,人们在生殖领域中已取得了一定的共识：良好的内膜和高质量的胚胎及二者的同步性是取得助孕成功的关键。而子宫内膜作为胚胎种植和发育的“土壤”,其在助孕中起着举足轻重的作用。目前已有很多关于子宫内膜厚度对妊娠影响的研究,但结论颇具争议。本研究探讨了体外受精／卵胞浆内单精子注射（IVF／ICSI）周期中子宫内膜厚度等因素与妊娠率的关系,为助孕前内膜的评价及干预措施提供依据。     

黄素化未破裂卵泡综合征的发生及相关治疗

黄素化未破裂卵泡综合征(luteinized unruptured follicle syndrome, LUFS)是一种无法排出卵子的特殊临床症候群,占不孕症妇女的25%～43%。其发生可能与卵巢周期各种激素水平调控和卵巢内各种因子调控异常有关。子宫内膜异位症、盆腔环境、各种药物的使用以及患者本身精神因素亦可导致LUFS的发生。由于机制尚未完全阐明,目前多根据各种可能病因进行相关治疗。     

Notch信号对视网膜前体细胞分化的作用

目的：观察Notch信号对体外培养的SD大鼠视网膜前体细胞分化的影响。方法：从胎龄16 d的SD大鼠分离视网膜神经上皮,采用悬浮法培养视网膜前体细胞。实验分Notch信号抑制组和对照组两组。第14天行免疫细胞化学法分析细胞类型、Notch信号的表达及变化。结果：视网膜前体细胞大部分表达Notch1胞内段及其下游转录因子Hes1,少量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1;自发分化后大量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1,少量细胞表达Notch 1胞内段和Hes1。Notch信号抑制组Nestin,GFAP阳性率显著低于对照组,β-tubulin阳性率显著高于对照组,而Recoverin阳性率与对照组差异无统计学意义。结论：Notch1信号在体外可能参与了对视网膜前体细胞分化的抑制,抑制Notch信号可部分促进视网膜前体细胞向神经元分化,同时抑制了神经胶质细胞的分化。     

4种全能性基因转入人胚胎成纤维细胞诱导 多能性干细胞系的建立及其鉴定

目的：利用人类胚胎成纤维细胞(human embryonic fibroblast cells, hEFs)获得诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)系并对其全能性进行鉴定。方法：本研究采用慢病毒感染的方法将含有Oct4,Sox2,Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导hEFs,获得iPSCs,并对其进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色,以及检测表面标记,端粒酶活性,EB分化和畸胎瘤形成等,同时进行核型分析以及短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分析。结果：所获得的iPSCs表达多能性细胞的表面标记,具有高的端粒酶活性,可在体内体外向内中外三胚层分化,与hESCs相似。经STR分析证实,iPSCs确实来源于hEFs而非胚胎干细胞的污染。结论：4种全能性基因转入hEFs可诱导获得与胚胎干细胞相似的iPSCs,有助于进一步的表观遗传学重编程以及干细胞多能性维持的研究。