Se、VE、V、Cr对1型糖尿病小鼠脾脏细胞因子抗原表达的影响

目的 :　研究 1型糖尿病 (T1 DM)与脾脏淋巴细胞亚群及其表达细胞因子种类的关系及微量营养素拮抗 T1 DM作用。方法 :　应用链脲佐菌素 (STZ)小剂量 ,多次注射方法复制T1 DM小鼠模型 ,分别联合添加一定剂量的硒 (Se)、维生素 E(VE)、铬 (Cr)、钒 (V) ,应用流式细胞术检测脾脏 CD4、CD8、肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)、干扰素 - γ(IFN- γ)、白介素 - 4(IL- 4)、白介素 - 1 0(IL- 1 0 )阳性淋巴细胞百分比及活性氧产量。结果 :　T1 DM模型组小鼠脾脏 CD8阳性细胞百分比降低 ,活性氧产生量增加 ,联合补充 Se、VE、Cr、V明显提高了脾脏 CD8淋巴细胞数目 ,降低了脾组织活性氧含量和升高的血糖水平 ,但脾脏淋巴细胞表达细胞因子的种类各组间无统计学意义。结论 :　微量营养素分别通过抗氧化和免疫调节机制对 T1 DM时脾脏淋巴细胞抗原表达进行调控 ,对 T1 DM发生发展起一定程度的拮抗作用     

微量营养素对1型糖尿病小鼠血淋巴细胞细胞因子的调控作用

目的　研究 1型糖尿病 (DM)的发生与细胞因子作用的关系及微量营养素对细胞免疫失衡的调节作用。方法　应用小剂量、多次注射链脲佐菌素的方法诱导 1型DM小鼠模型。分别通过饮食、饮水方法添加不同组合微量营养素硒、维生素E、铬、钒。应用流式细胞仪检测外周血表达CD4 、CD8、TNF α、IFN γ、IL 4、IL 1 0淋巴细胞数百分比。结果　 1型DM模型小鼠外周血表达TNF α淋巴细胞数升高 (P <0 .0 5) ,表达IL 4、IL 1 0淋巴细胞百分比低于正常对照组 (P <0 .0 5)。不同组合添加微量营养素各组外周血表达TNF α淋巴细胞百分比不同程度低于 1型DM模型组 ,IL 4、IL 1 0淋巴细胞百分比高于 1型DM模型组 (P均 <0 .0 5)。结论　微量营养素可调节 1型DM小鼠发病过程中细胞因子水平 ,干预 1型DM发生发展。     

过量氟对大鼠肝细胞内钙水平和肝细胞凋亡的影响

目的 研究在大鼠过量摄氟后体内对肝细胞中游离钙([Ca~(2+)]i)水平和肝细胞凋亡的影响。方法 应用饮水加入氟化钠进行大鼠染毒实验,采用Fura-2/AM荧光指示剂测定慢性氟中毒大鼠肝细胞内[Ca~(2+)]i浓度的变化,同时利用流式细胞术测定肝细胞凋亡率。结果 过量氟可刺激肝细胞内[Ca~(2+)]i浓度增高,常食(高钙饮食)投氟组与常食对照组相比差异显著(P<0.05),偏食低钙投氟组高于低钙对照组,差异显著(P<0.05);肝细胞凋亡率在正常饮食加氟组与对照组相比差异无显著性(P>0.05),低钙饮食加氟组肝细胞凋亡率明显增高,与低钙对照组相比,差异显著(P<0.05);相关分析显示,低钙饮食投氟组肝细胞内[Ca~(2+)]i浓度增高与细胞凋亡率有相关性趋势(r=0.576)。结论(1)过量氟所致的大鼠肝细胞内[Ca~(2+)]i持续增高对肝细胞凋亡有不同程度的影响,可能在氟骨症病理过程中起重要作用;(2)投氟伴随低钙可加重细胞内[Ca~(2+)]i超负荷和细胞凋亡,提示钙营养与氟中毒发病有着重要联系;(3)肝细胞内[Ca~(2+)]i增高与肝细胞凋亡率之间有无相关性有待于进一步研究证实。     

抗肺炎克雷白杆菌单克隆抗体的制备

应用培养出的肺炎克雷白杆菌的制备单克隆的抗体来治疗难治性肺炎,将具有特异性,从而大大提高治疗效果,减少降低死亡率.     

人白细胞介素—2单克隆抗体的制备及临床应用

IL-2免疫小鼠脾细胞与NS-1细胞杂交后,获得19株分泌McAb的细胞株,经3次克隆后,获得100％阳性结果,取5株细胞进行核型分析证实为杂交瘤核型。免疫球蛋白亚型分析除一株为lgM外,其余均为IgG1。IL-2与MoAb作用后有特异性吸收作用。2D_8,细胞株连续传代40代仍能稳定地分泌抗体。本实验建立了检测IL-2的ELlSA     

人抵抗素对脂肪细胞摄取葡萄糖的影响及其机制研究

构建人抵抗素基因表达载体转染细胞,研究其对脂肪细胞摄取葡萄糖、细胞增殖及分化的影响.结果 表明,人抵抗素通过促进前脂肪细胞增殖和抑制脂肪细胞分化来降低葡萄糖摄取.二甲双胍能拈抗人抵抗素对成脂的抑制作用.     

人脾免疫核糖核酸(iRNA)对实验性家兔肝脏损害的防护和治疗作用

<正> 本室用热酚法由人脾组织液中抽提人脾iRNA。经实验室及动物实验证实,人脾iRNA无毒性、无抗原性,是安全可靠的免疫增强剂。经本院一年来的临床观察,人脾iRNA对提高机体免疫功能状态、对肝炎等多种疾病有较好的疗效。(见另文)。为进一步证实人脾iRNA对肝脏病治疗作用的机理,本室采用10％四氯化碳麻油液造成家兔肝脏损害模型的方法,观察人脾iRNA对实验性家兔肝损害的防护和治疗作用。现整理报告如下:     

shRNA表达质粒抑制耐阿霉素的人乳腺癌细胞株(MCF-7/AdrR)绿色荧光蛋白表达的研究

目的：探讨靶向增强型绿色荧光蛋白（EGFP）小发夹结构RNA（Short hairpin RNA，shRNA）对耐阿霉素的人乳腺癌细胞（MCF-7／AdrR）中EGFP基因表达的抑制作用。方法：构建针对EGFP基因的shRNA表达载体，与pcDNA3．0 EGFP质粒共转染MCF-7／AdrR细胞，分别用激光共聚焦扫描显微镜（Laser confocal scanning microscope，LCSM）和流式细胞术检测干扰效果。结果：瞬时共转染pSilencer^TM3．1-H1 neo EGFP shBNA质粒和pcDNA3．0 EGFP质粒后，荧光显微镜观察结果显示MCF-7／AdrR细胞中发出荧光的细胞数量减少，荧光强度明显降低。流式细胞术检测阳性细胞百分率降低至35．6％，差异有显著性。结论：靶向EGFP的shRNA表达质粒能有效而特异抑制EGFP在MCF-7／AdrR中的表达，MCF-7／AdrR细胞中存在RNA干扰现象，为进一步利用RNA干扰技术逆转乳腺癌多药耐药性的研究奠定基础。     

异常凝血酶原含量的测定及其在肝癌诊断中的临床应用

目的：探讨血浆中异常凝血酶原（Ａｂｎｏｒｍａｌ ｐｒｏｔｈｒｏｍｂｉｎ,ＡＰＴ）含量对肝癌的诊断意义,提高原发性肝癌早期诊断的敏感性。方法;采用双抗体酶联免疫法在３３１人中进行血浆ＡＰＴ含量的测定,并与ＡＦＰ免疫测定相比较。结果：１６６例肝癌患者中阳性率达到９０．４％,高于ＡＦＰ检测,结论：血浆中ＡＰＴ含量增高对肝癌有诊断意义,本研究所建立的ＡＰＴ含量检测方法对肝癌诊断特异性强,灵敏度高,是理想的     

尿激酶型纤溶酶原激活剂单克隆抗体的制备及对癌症诊断的临床应用

目的：获得特异的鼠抗人尿激酶型纤溶酶原激活剂的单克隆抗体,以建立特异、灵敏、准确的癌症临床诊断方法。方法：以纯化的尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）为抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,制备单克隆抗体。结果：利用小鼠杂交瘤技术,建立４ 株分泌ｕＰＡ 抗体的杂交瘤细胞系６Ｇ９、６Ｇ１０、５Ｅ１２、６Ｈ２,经鉴定其抗体类别均为ＩｇＧ,它们均能特异识别ｕＰＡ,与其它因子无交叉反应。结论：提示癌瘤组织中ｕＰＡ 含量对临床诊断及预测转移的可能性具有临床意义