硫化氢对氧糖剥夺/复氧诱导小鼠脑皮层神经元损伤的体外观察

目的 探讨硫化氢（H₂S）对氧糖剥夺/复氧（OGD/R）诱导神经元损伤的影响。方法 小鼠皮层神经元用无糖厄尔氏平衡盐溶液（EBSS）于2% O₂、5% CO₂、93% N₂ 37℃培养4h,换用neurobasal + B27培养基于37℃ 5%CO₂培养箱中继续培养12h,建立OGD/R模型。以硫氢化钠(NaHS)作为H₂S的供体,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率;用fura-2/AM和显微荧光成像系统检测神经元胞质钙离子浓度（［Ca ²⁺ ］i）;利用比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）释放率;碘化丙啶（PI）染色检测细胞损伤。 结果 200、300与600 μmol/L NaHS预处理30min再OGD/R,神经元存活率显著提高（n=4）;300 μmol/L NaHS预处理后再OGD/R,［Ca ²⁺］i（n=5）、LDH释放率（n=4）和细胞损伤率（n=6）均低于OGD/R组,且使用10 μmol/L钙螯合剂BAPTA也降低OGD/R诱导的LDH释放率和细胞损伤率。 结论 H₂S减轻OGD/R所致皮层神经元损伤,其机制与H₂S抑制OGD/R诱导神经元钙超载有关。     

CD133和CD44在胃腺癌中的表达及其与E-cadherin的关系

目的探讨原发性胃腺癌（gastric adenocarcinoma, GAC）组织中CD133、CD44和E-cadherin蛋白表达的关系及临床病理
意义。方法应用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测145例胃腺癌组织和30例正常胃黏膜组织中CD133、CD44和E-cadherin
蛋白的表达。结果在正常胃黏膜组织中,CD133、CD44和E-cadherin蛋白的阳性表达率分别为10.0%、3.3%和100%;在GAC
组中,CD133、CD44 和E-cadherin 蛋白的阳性表达率分别为46.9%、47.6%和42.8%,两组之间,差异均有显著性（P<0.05）。
CD133、CD44和E-cadherin蛋白的表达水平均与肿瘤的大小、分化程度、淋巴结转移与否、浸润深度、临床分期及术后生存期有
关（全部P<0.05）;CD133的表达与CD44的表达呈正相关（P<0.05）,CD133和CD44的表达均与E-cadherin的表达呈负相关（P<
0.005）。Kaplan-Meier 生存分析表明,CD133 和CD44 蛋白表达阳性的患者其生存率明显低于其阴性表达患者（P<0.001）;
E-cadherin蛋白表达阳性的患者其生存率明显高于其阴性表达患者。Cox回归分析：CD133、CD44和E-cadherin的表达是影响
GAC患者术后生存率的独立预后因素。结论CD133、CD44和E-cadherin的表达水平在GAC组织中与肿瘤组织的大小、分化
程度、临床分期、浸润深度、淋巴结转移与否及预后等均有关;在GAC组织中联合检测CD133、CD44和E-cadherin对判断预后
有价值。
     

分子病理指导下脑恶性胶质瘤个体化治疗的临床疗效研究

目的 观察对比在分子病理指导下脑恶性胶质瘤的个体化治疗与凭经验治疗的临床疗效.方法 选择2008年1月-2010年1月凭经验治疗的胶质瘤患者60例为对照组,2010年1月-2012年1月在分子病理指导下治疗的脑恶性胶质瘤患者60例为治疗组,根据WHO推荐标准分别观察有效率、无进展生存时间及总生存时间,并进行统计学分析.结果 治疗组有效率为56.67%,对照组有效率为36.67%,2组差异有统计学意义(P＜0.01).第6周期末治疗组的未进展存活率为86.67%,是对照组的1.24倍,2组差异有统计学意义(P＜0.05).生存质量(Kamofsky score,KPS)评分治疗组平均值是(86.83±12.66)分,对照组是(74.02±11.81)分,2组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 分子病理指导下的个体化治疗较凭经验治疗有更高的有效率,生存时间长.     

海马内注射脂多糖导致痫性发作及其机制

目的 研究脂多糖海马内注射激活胶质细胞免疫反应引起大鼠痫性发作及海马硬化的作用机制。方法 随机将36只成年雄性Wistar大鼠分为脂多糖组(LPS组)、海人酸组(KA组)、生理盐水组(NS组)。立体定位在大鼠CA3区分别注射脂多糖5μg/μL、生理盐水、海人酸0.4μg/μL各1.5μL,记录大鼠的行为学、脑电图;行海马区HE染色观察神经元形态;采用免疫组化法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达。结果 海马内注射NS后大鼠未见痫性发作,脑电图呈基本节律。注射LPS或KA后2h内大鼠出现不同程度的痫性发作和脑电图异常改变(尖波或棘波),KA组发作等级高于LPS组,部分LPS和KA组大鼠在给药后3～4周仍可见痫性发作。与NS组比较,LPS和KA组给药后急性期海马各区星形胶质细胞活化,神经元nNOS活性增高,慢性期星形胶质细胞增生,神经元数量减少,呈海马硬化表现。结论 海马内注射脂多糖可激活胶质细胞的固有免疫反应,并导致大鼠痫性发作和海马硬化。     

肿节风总黄酮对阿糖胞苷所致血小板减少动物模型骨髓基质细胞和巨核细胞的影响

目的:利用阿糖胞苷建立化疗所致血小板减少症小鼠模型,研究肿节风总黄酮对模型小鼠血小板以及骨髓微环境中基质细胞和巨核细胞的影响。方法:将60只小鼠依据外周血小板数目随机均分为空白对照组、阿糖胞苷模型组、肿节风总黄酮31.50、63.00、94.50 mg/kg剂量组和阳性药物醋酸泼尼松龙组。除正常组外,每只小鼠腹腔注射阿糖胞苷建立化疗所致血小板减少小鼠模型,同时给予相应药物干预。动态检测外周血小板数目,实验结束时检测骨髓有核细胞活力,观察体外培养骨髓基质细胞生长状况,观察统计骨髓石蜡切片中巨核细胞数目及多倍体比例,免疫组化检测骨髓中基质细胞TPO以及巨核细胞相应受体C-mpl的表达量。结果:与模型组相比,肿节风总黄酮63.00 mg/kg和94.50 mg/kg剂量组显著提升模型动物外周血小板数目,显著提高骨髓有核细胞活力和骨髓基质细胞体外生长贴壁情况,显著提高骨髓中巨核细胞数目,肿节风总黄酮94.50 mg/kg剂量组显著提高多倍体巨核细胞比例;肿节风总黄酮63.00、94.50 mg/kg剂量组极显著促进骨髓内巨核细胞周围基质细胞TPO以及巨核细胞中相应受体C-mpl的表达。结论:肿节风总黄酮能显著提升阿糖胞苷诱导血小板减少症动物外周血小板数目,可能是影响了骨髓基质细胞生长状况,以及促进其产生有利于巨核细胞增殖分化的细胞因子,经过TPO-C-mpl通路促进巨核细胞增殖、分化和形成血小板。     

从κ-阿片受体信号转导系统探讨针刺改善心肌顿抑机制研究的新思路

通过梳理回顾心肌顿抑的发生发展机制和针刺改善心肌缺血性损伤以及针刺与κ阿片受体的相关性研究现状,提示针刺极有可能作用于心肌细胞κ阿片受体系统,再经κ阿片受体及其受体后信号转导通路,直接参与改善心肌顿抑引发的心肌功能障碍,同时也可抑制心肌上主要功能受体——β1肾上腺素能受体信号转导通路,间接参与介导改善缺血性心肌损害的作用。笔者提出从κ-阿片受体信号转导通路角度探讨针刺防治心肌顿抑的作用机制,为针刺改善心肌缺血性疾病的潜在机制提出新的研究思路。     

白藜芦醇通过TRPC1抑制血管平滑肌细胞增殖作用研究

目的研究白藜芦醇(Resveratrol,RSV)通过瞬时受体电位C1通道(transient receptor potential canonical-channel 1,TRPC1)来抑制血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的机制。方法采用血管环培养法观察RSV对胎牛血清(fetal calf serum,FBS)诱导的血管壁损伤的影响;MTT法检测RSV对VSMCs增殖的影响;q PCR法检测RSV对TRPC1 m RNA表达的影响;Western Blot法检测RSV对TRPC1蛋白表达的影响。结果与模型组比较,RSV在20~200μmol·L~(-1)范围内,可改善高血清诱导的血管壁损伤和管壁增厚现象;RSV可降低FBS诱导的VSMCs增殖(P0.01),以200μmol·L~(-1)浓度最为显著,此作用可被TRPC1抑制剂SKF96365所阻断;RSV各浓度组的TRPC1 m RNA及蛋白相对表达量显著降低(P0.01)。结论 RSV抑制VSMCs的增殖可能通过影响TRPC1靶点来实现。     

基于黄疸模型的栀子根与栀子果实保肝作用探讨

目的:基于黄疸模型比较栀子根与栀子果实的保肝作用,为扩大栀子的药用部位提供药理学依据,为其资源的综合利用提供理论支撑。方法:将KM小鼠随机分为9组,每组10只,分别为正常组,模型组,阳性药联苯双酯组(150 mg·kg-1),栀子果实和根部位不同剂量给药组(各设高、中、低3个剂量),提前灌胃给药5 d后采用α-萘异硫氰酸酯(ANIT)复制小鼠黄疸型肝炎模型,继续给药,造模48 h后处理动物测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),γ-谷氨酰转移酶(γ-GT),总胆红素(TBIL),总胆汁酸(TBA),肝脏中超氧化物歧化酶(SOD),还原型谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肝脏组织病理学变化,逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)技术测定肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),转运体胆盐输出泵(BSEP),钠离子-牛磺胆酸协同转运多肽(NTCP)和胆固醇12α羟化酶(Cyp8b1)mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组血清中ALT,AST,γ-GT,TBIL,TBA水平显著升高,组织中SOD,GSH-Px,GSH的活性显著降低,NTCP,Cyp8b1 mRNA的表达显著降低,TNF-α,IL-6,BSEP mRNA的表达显著升高(P0.01);与模型组比较,栀子果实与根提取物中、高剂量组均能明显降低血清中ALT,AST,γ-GT,TBIL,TBA,明显增强肝组织中SOD,GSH-Px,GSH的活性,对肝脏病理损伤有减轻作用,且能明显增加NTCP,Cyp8b1 mRNA的表达,明显降低TNF-α,IL-6,BSEP mRNA的表达(P0.05,P0.01);而低剂量组仅对单项指标或几项指标有一定的改善作用。结论:栀子果实和根部位对ANIT诱导的黄疸模型小鼠有一定的保护作用,2个部位各剂量对不同指标有不同影响,栀子果实保肝机制可能主要与抗氧化作用和抑制炎症反应有关,而栀子根保肝作用可能主要与胆汁酸代谢有关。     

自拟续骨活血方联合西医固定术对骨折延迟愈合的治疗分析

目的:观察自拟中药汤剂续骨活血方联合西医内固定术治疗骨折延迟愈合的临床疗效。方法:选取我院接诊的86例骨折延迟愈合患者为研究对象,根据患者住院先后顺序随机分为对照组与观察组,每组43例。患者入院后根据症状采用内固定术治疗,观察组在对照组治疗基础上,于术后第2天服用中药汤剂续骨活血汤,连续服药3个月,疗程结束后比较两组骨折愈合情况,并评估两组中医证候积分,记录两组骨折临床愈合时间,并比较不良反应。结果:对照组总有效率72. 1%,显著低于观察组90. 7%(P0. 05);治疗后观察组头晕耳鸣、关节刺痛,及舌、脉象积分、总积分依次是(1. 2±0. 3)分、(1. 4±0. 2)分、(0. 4±0. 1)分、(2. 7±0. 6)分,均显著低于对照组(1. 6±0. 2)分、(2. 1±0. 4)分、(0. 7±0. 2)分、(4. 3±1. 2)分(P0. 05);对照组术后3个月骨折愈合率9. 3%,显著低于观察组27. 9%,其临床愈合时间(8. 7±2. 2)月,显著高于观察组(6. 8±1. 7)月(P0. 05)。对照组不良反应总发生率13. 9%,显著高于观察组2. 3%(P0. 05)。结论:自拟续骨活血汤联合西医内固定术可显著缩短骨折不愈合患者骨折愈合时间,并减少不良反应,临床疗效较好。     

基质胶的生物学活性研究进展

基质胶（Matrigel）的发现有利于在实验室研究细胞外基质的结构和功能。本文拟就Matrigel的生物学活性研究进展作一综述。包括：Matrigel的概述;Matrigel生物学功能,包括：促进细胞分化的作用,测定血管形成中的应用; Matrigel的作用机制等研究。这些研究为细胞外基质在组织工程和组织修复中的研究提供了实验依据,有广泛的应用前景。