HCV核心基因插入突变体编码蛋白对人肝癌细胞系(Huh-7)细胞基因表达的影响

目的用基因表达分析法鉴定丙型肝炎病毒(HCV)核心(Core，C)区基因插入突变体编码蛋白在人肝癌细胞系(Huh-7)表达，探讨该蛋白生物学功能及其基因表达改变与致病的关系。方法构建HCV-1bc基因插入突变体编码蛋白重组表达质粒，建立表达c基因插入突变体编码蛋白Huh-7细胞系，按Affymetrix公司实验程序制备探针、再与该公司H0u133A和Hg-u133b芯片杂交。对基因表达上调或下调≥3倍的基因，用NetAflk作进一步分析。并用半定量RT-PCR对其中3个上调基因进行鉴定。结果Microarray分析显示，HCV-1b C基因插入突变体编码蛋白比c蛋白引起更多的基因表达改变，主要集中在信号传导、蛋白酶活性、分子转运、免疫反应等，特别是免疫反应基因表达更加显著。C基因插入突变体编码蛋白表达可同时导致凋亡基因／抗凋亡基因表达上调或下调及致癌基因上调。半定量RT-PCR对有趣的致癌基因FHL2、抗凋亡基因PRKCZ和凋亡基因LGALSI的鉴定结果表明，FHL2、PRKCZ和LGALSI基因的表达比空载体转染对照组相同基因明显上调。结论Hcvc基因插入突变体编码蛋白在Huh-7细胞表达对其基因表达有很大影响，其中对免疫反应基因的影响更明显，这一结果对理解HCV C基因插入突变体编码蛋白在HCV致病过程中的作用及其研制抗HCV药物均有重大的参考价值。     

微创外科时代普通外科临床实习的实践与思考

微创外科从现代外科学脱颖而出，这是对传统外科学的技术革新，并迅速在全球范围传播、应用，外科学发展进入到了微创外科的时代。医学生进入临床实习，也受到了极大的震撼并感到了迷惑：他们在临床上接触到的术式、操作和理念与在学校里所学的大相径庭。为此，我们调整了临床实习计划与方案，以适应微创外科时代的特点，以帮助实习生更好地完成外科临床实习。     

人胎盘CD133+细胞具有高增殖潜能集落形成细胞特性

目的 通过对人胎盘CD133⁺细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析，证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞（HSPC）。 方法 采用机械法制备人胎盘组织（PT）单细胞悬液，用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC)，经磁式分选（MACS）富集CD133⁺细胞，培养28 d后观察HPP-CFC集落形成能力，用流式细胞仪（FCM）对分选的细胞组份和HPP-CFC进行表型分析，实验全程用脐带血（UCB）作平行比较分析。 结果 培养28 d后，PT-CD133⁺与UCB-CD133⁺细胞组份分别扩增了266和362倍，前者低于后者（P<0.01）；PT-CD133⁺与UCB-CD133⁺细胞中HPP-CFC分别为(32.4±11.2)/5×10³、(17. 7±5.7)/5×10³，前者形成的HPP-CFC数量明显高于后者（P<0.01）；PT-CD133⁺、UCB-CD133⁺细胞培养至28 d时，除UCB-CD133⁺组的CD133⁺CD34^-亚群比例无明显改变外，CD133⁺CD34⁺、CD133^-CD34⁺和CD133⁺CD34^-（PT-CD133⁺组）亚型均比培养前减少。 结论 人胎盘组织CD133⁺细胞中存在HPP-CFC，说明胎盘CD133⁺细胞群中存在早期HSPC。     

中国东北地区未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者HIV毒株的耐药基因变异研究

目的　研究我国东北地区未接受抗逆转录病毒治疗的HIV AIDS患者HIV毒株的逆转录酶和蛋白酶耐药变异情况 ,为开展大规模临床抗病毒药物治疗提供本底数据。方法　RT PCR和套式PCR扩增HIVpol区基因 ,双脱氧法测定逆转录酶和蛋白酶基因序列 ,与国际耐药数据库比对辨别耐药变异。结果　 (1) 5 3例患者毒株亚型分析结果 :B′亚型 4 7例 ,B′ C亚型 4例 ,A、B亚型各 1例 ;(2 )未发现逆转录酶和蛋白酶原发耐药变异存在 ,但发现存在逆转录酶抑制剂继发变异 :M4 1L(1.9% )、I6 3M (1.9% )、L74I (1.9% )、S6 8G (1.9% )、V75L (3.8% )、V10 6I (1.9% )、I135L T (5 .7% )、V179D (7.5 % )和V189I (1.9% ) ,无症状感染者RT继发耐药变异出现率为 11.8% ,而艾滋病患者为5 2 .6 % (P <0 .0 1)。存在大量蛋白酶耐药继发变异V77I (88.7% )、L6 3P (86 .8% )、E35D (81% )、A71V(2 4 .5 % )、R4 1K (15 .1% )、L10I (9.4 % )、R5 7K (9.4 % )、D6 0E (9.4 % )、N37D (5 .7% )、G16E (3.8% )、I15V (1.9% )、M36I (1.9% )、K5 5R (1.9% )和L89M (1.9% )。未发现明显的亚型特异性耐药变异。结论　在中国东北地区未接受抗逆转录病毒治疗的HIV AIDS患者中未发现毒株逆转录酶和蛋白酶耐药原发变异 ,但大量继发耐药变异的存在提     

持续性植物状态患者体感脑磁图表现(附2例报导)

持续性植物状态(Persistent Vegetative State PVS)指植物状态持续一个月以上，可由多种原因引起，如脑卒中、脑外伤、CO中毒、电击伤等。据西方一些国家统计，其发病率为0．01—0．03‰，推测我国可能有15万植物状态病人。其高额的医疗费用给家庭和社会造成沉重负担，因此近年来引起了医学界和社会的广泛关注。对：PVS病人的客观诊断依据，特别是判定预后的指标是当今研究的热点和难点。     

医疗保险住院病人医疗费用结算的程序设计

本文依据青岛市医疗保险住院病人费用结算的有关政策规定，在“军卫一号”软件的基础上，使用Power Builder编写了自动结算及费用清单打印程序，使之成为“军卫一号”住院收费软件的补充。     

757例体检人群血脂水平调查分析

目的 :了解“健康”体检人群不同年龄组的血脂水平。方法 :对75 7例体检人群的血清甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (TC)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C) ,按年龄分组 ,采用SPSS10 .0软件进行统计分析。结果 :2 0～ 2 9岁组的TG (1.2 8± 0 .63mmol/L)与 3 0～ 3 9岁组(1.5 6± 0 .78mmol/L)和 40～ 49岁组 (1.5 1± 0 .79mmol/L)均有显著性差异 (P <0 .0 1) ;其它各组间无显著性差异。 2 0～ 2 9岁组的TC (4 .5 8± 0 .88mmol/L)与 3 0～ 3 9岁组 (4 .97± 0 .97mmol/L)、40～ 49岁组 (5 .0 0± 1.0 3mmol/L)、5 0～ 5 9岁组 (5 .0 0± 1.0 4mmol/L)、60～ 69岁组 (5 .0 7± 0 .96mmol/L)均有显著性差异 (P <0 .0 1);其它各组间无显著性差异。HDL C水平 70～ 77岁组均显著高于其它各年龄组 ,而其它各年龄组间无统计学差异。TG ,TC ,HDL C的异常率分布在各年龄组间无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :75 7例体检人群血脂水平呈升高趋势 ,中青年人群更为明显 ,应当提倡文明饮食和健康的生活方式 ,加强健康教育     

多巴胺D2受体基因启动子多态性与帕金森病的关联研究

目的 探讨中国汉族人群多巴胺D2受体基因启动子多态性在帕金森病（Parkinson's disease,PD)遗传易感性中的作用。方法 采用病例－对照关联分析，聚合酶链反应－限制性片段长度多态性方法分析了123例PD患者（PD组）与124名健康成人（对照组）多巴胺D2受体基因启动子多态性。结果 PD组－141△C等位基因频率为8．5％，对照组为11．7％；两组差异无显著性（P＞0．05）；中国汉族人PD组组和对照组－141△C等位基因频率明显高于意大利南部人群，差异有显著性（P＜0．05）。结论中国汉族人群多巴胺D2受体基因启动子多态性与PD的遗传易感性无关，该多态性有明显的种族差异。     

53例慢性髓系白血病细胞遗传学和bcr/abl融合基因检测

目的了解我院慢性粒细胞白血病(慢粒)染色体变异及融合基因表达与临床诊断和分期间的关系。方法染色体制备采用骨髓或外周血短期培养法,G显带,分析核型;融合基因检测则用逆转录-聚合酶链反应法(PCR法)。结果发现慢粒急变期的染色体,除具典型的Ph染色体外,还有 8、 9、i(16)q、i(17)q、-18等其它染色体改变。bcr/ab l融合基因显示慢粒急变期的患者,同时具有165bp和90bp扩增带。结论我们宜将细胞遗传学和PCR法结合,对慢粒白血病进行检测,即有助于对其诊断、预测急变、判断疗效及预后情况的深入了解。     

α2-巨球蛋白基因I1000V多态性与散发阿尔茨海默氏病的关联研究

目的近年来有研究发现α2-巨球蛋白基因(α2-macroglobulin，A2M)Ile1000Val多态与阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease，AD)发病有关联，但也有相悖的研究结果报道。因此．我们利用较大的样本，观察了A2M基因Ile1000Val多态在广州及成都地区汉族老年人中的分布，并探讨其与散发AD的相关性。方法以广州地区257例散发AD患者和242名正常老年人、成都地区112例散发AD患者和113名正常老年人为对象进行病例一对照研究。用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法分析A2M基因11000V多态性和载脂蛋白E基因(apolipoprotelnE，apoE)多态性。结果(1)在两地合并样本中，AD患者与对照组中等位基因A2M-1000V的频率分别为7．7％与8．7％，广州与成都地区AD患者与对照组中A2M基因I1000V多态的分布差异无统计学意义。(2)散发AD无论按是否伴有apoE—ε4或按发病年龄分成不同亚组后，A2M基因I1000V多态的分布在病例组与对照组之间差异无统计学意义。结论广州与成都汉族人群中A2M基因I1000V多态与散发AD不具有关联。