新生儿难治性惊厥STXBP1基因突变的研究

目的 探讨STXBP1 基因突变与不明原因新生儿难治性惊厥的关系。方法 应用直接测序法对11 例原因不明的新生儿难治性惊厥患儿进行STXBP1 编码区的突变检测。结果 11 例患儿中,1 例检测到STXBP1 基因突变。突变类型为错义突变,突变位点c.1439C>T（p.P480L）。结论 在新生儿难治性惊厥患儿中,可检测到STXBP1 基因突变,为该类疾病的深入研究提供了新的思路。     

黄芪改善他克莫司慢性肾毒性的活性成分筛选及其作用机制研究

摘要：目的:筛选黄芪改善他克莫司慢性肾毒性的活性组分,并初步阐明其作用机制。方法:将48只C57BL/6小鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、黄芪总提取物组、黄芪总黄酮组、黄芪多糖组和黄芪总皂苷组,每组8只。除空白对照组外,其余各组采用他克莫司诱导慢性肾毒性模型,各治疗组同时灌胃给予相应的治疗药物,qd,连续28 d。末次给药后,检测各组小鼠尿量、体质量、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）; HE和Masson染色观察肾组织病理改变,Western blot检测肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,应用试剂盒测定超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）水平。结果:与模型组相比,黄芪总提取物组、黄芪多糖和黄芪总皂苷可显著降低小鼠SCr、BUN、肾小管间质纤维化程度、TGF-β1、CollagenⅠ和α-SMA的蛋白表达（P<0.05或P<0.01）,增加抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px的活性（P<0.05或P<0.01）,显著降低MDA水平（P<0.05或P<0.01）,而黄芪总黄酮无明显作用（P>0.05）。结论:黄芪多糖和黄芪总皂苷可能是黄芪发挥肾毒性保护作用的活性组分,其作用机制可能与减少氧化应激相关。     

电针刺激三阴交穴对压力性尿失禁大鼠脊髓NMDA受体及α2受体表达的影响

目的观察电针刺激三阴交穴对压力性尿失禁(SUI)大鼠控尿能力及脊髓N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体、α2肾上腺素能受体表达的影响。方法采用随机数字表法将48只成年雌性SD大鼠分为3组,其中假手术组大鼠阴道内置入未注水球囊尿管,模型组大鼠行阴道内球囊扩张制作SUI模型,电针组大鼠待阴道内球囊扩张建模成功后,对其三阴交穴给予电针刺激。经1周干预后,3组大鼠均进行尿流动力学检查及腹压漏尿点压(LPP)测定,并同步进行尿道外括约肌肌电描记。另外本研究还分别采用PCR及Western blot方法比较各组大鼠脊髓L₆-S₁节段NMDA受体及α2受体表达变化。结果3组大鼠各项尿流动力学指标组间差异均无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠腹压LPP、尿道外括约肌肌电频率及振幅均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠腹压LPP显著提高(P<0.05),尿道外括约肌肌电频率及振幅均显著增加(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠L₆-S₁脊髓节段NMDA、α₂受体mRNA及蛋白表达均明显上调(P<0.05)。结论阴道球囊扩张是制作SUI大鼠模型的有效方法;电针刺激三阴交穴在改善SUI模型大鼠控尿能力同时,还不会影响大鼠正常排尿功能,其治疗机制可能与上调脊髓中NMDA及α2受体水平、增强尿道外括约肌活性有关。     

基于分子对接和靶标特异性打分函数的化合物hERG心脏毒性预测

目的 开发基于机器学习的人类快速延迟整流性钾通道基因(the human Etherh-à-go-go-Reloted Gene,hERG)特异性打分函数(RF-hERG-Score),用于预测化合物对hERG的抑制活性(pIC₅₀)。方法 采用随机森林算法,以AutoDock Vina(传统打分函数)分子对接生成的1 847个化合物-hERG复合体结构和实验测定的半抑制浓度(pIC₅₀)数据作为训练集进行训练。结果 在十倍交叉验证中,RF-hERG-Score比RF-Score(通用打分函数)和AutoDock Vina更准确,其预测的pIC₅₀与实验值的皮尔逊相关系数(Rp)为0.603、斯皮尔曼等级相关系数(Rs)为0.623、均方根误差(RMSE)为0.849。在两组外部测试集中,RF-hERG-Score的Rp、Rs和RMSE也高于其他2种方法,并且优于相应文献报道模型的预测性能。结论 RF-hERG-Score提高了hERG抑制剂结合亲和力的预测准确度,为利用计算模拟方法实现药物心脏毒性的较准确预测提供一种新的方案。     

肝细胞中一种高通量二维细胞识别技术方法的建立

目的:建立一种新颖的高通量二维细胞识别、定位技术,为肝癌干细胞的鉴定、异质性分化细胞分类等提供技术平台,方法:收集原发性肝细胞癌患者手术标本1例,每个标本分别石蜡包埋,以1μm的厚度连续切5片,每张切片取第一片做常规HE染色,病理诊断,其余4张切片分别以肝癌组织中目前已报道的8个可能的肝癌干细胞标志物进行了免疫荧光标记...     

囊虫病和棘球蚴病免疫接种的研究进展

虽然世界各地采取服用抗蠕虫药和改变人们行为的方法来防治囊虫病和棘球蚴病,并取得了一定的效果,但疫苗的研究仍是必要的,它有可能在防治工作中起到非常重要的作用。作者在本文主要介绍在绵羊中抗棘球蚴病和在绵羊、牛和猪体中预防囊虫病的一些有实用价值的疫苗。有资料表明,重组疫苗对动物实验感染的保护率可高达80％以上,这些有潜力的疫苗在动物身上的成功,对于人体用疫苗预防囊虫病和棘蚴病的研究工作受到很大鼓舞。     

新生儿难治性惊厥的临床特征及预后相关因素

目的 探讨新生儿难治性惊厥的病因和临床特点,分析影响预后的因素. 方法 选取2000年1月1日至2011年7月31日在北京大学第一医院新生儿病房住院的临床诊断难治性惊厥新生儿46例,选取同期收治非难治性惊厥的新生儿惊厥患儿42例作为对照组,比较2组的病因、临床特点及预后.难治性惊厥患儿预后正常11例,预后不良35例,比较2组的病因及临床特点.应用卡方检验比较组间差异;应用Logistic多元回归分析发展为难治性惊厥的危险因素和影响难治性惊厥患儿预后的危险因素. 结果 (1)难治性惊厥患儿常见的病因为严重的围产期脑损伤(8/46,17.4％),脑结构发育异常(7/46,15.2％)和先天性代谢性疾病(3/46,6.5％).难治性惊厥患儿每日均有惊厥发作者占91.3％(42/46),脑电图重度异常者占55.6％(25/45),存在惊厥持续状态者占17.4％(8/46),预后不良者占76.1％(35/46),均明显高于非难治性惊厥患儿,分别为57.1％(24/42)、5.4％(2/37)、0.0％ (0/42)和21.4％(9/42),差异均有统计学意义(x2分别为13.665、23.123、Fisher精确概率法、26.236,P均＜0.01).脑电图重度异常(OR=16.384,95％CI:3.421～78.472,P=0.000)和每日均有惊厥发作(OR=3.811,95％CI:1.019～14.258,P=0.047)是发展为难治性惊厥的独立危险因素.(2)难治性惊厥患儿预后不良者苯巴比妥治疗无效的比例为80.0％(28/35),明显高于预后正常者的4/11,差异有统计学意义(Fisher精确概率法,P=0.010).苯巴比妥治疗无效也提示难治性惊厥患儿预后不良(OR=12.444,95％CI:2.530～61.217,P=0.002).结论 新生儿难治性惊厥的常见病因为严重的围产期脑损伤、脑结构发育异常及先天性代谢性疾病.其临床表现以频繁发作、易存在惊厥持续状态及脑电图重度异常为特点,常预后不良,对苯巴比妥的治疗反应欠佳提示预后不良.     

肝细胞癌中一种高通量二维细胞识别技术方法的建立

目的:建立一种新颖的高通量二维细胞识别、定位技术,为肝癌干细胞的鉴定、异质性分化细胞分类等提供技术平台.方法:收集原发性肝细胞癌患者手术标本1例,每个标本分别石蜡包埋,以1μm的厚度连续切5片.每张切片取第一片做常规HE染色,病理诊断.其余4张切片分别以肝癌组织中目前已报道的8个可能的肝癌干细胞标志物进行了免疫荧光标记,利用试剂Hoechst 33342(蓝色)标记细胞核定位,异硫氰酸荧光素(fluoresce iniso thio cyanate,FITC),四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethy l rhodamine isothiocyanate rhodamine)双荧光标记待测抗体,荧光显微镜检测荧光位置及强度.结果:以4个切片中均能识别的细胞核做定位,确定每个切片1个1×100显微镜视野中有效细胞的个数,作出4个切片合并的细胞图谱,建立了一种新颖的二维细胞识别技术.检测得到有效细胞为2772个.检测的8个抗体均在肝癌细胞中表达,并且不同肝癌细胞中肝癌干细胞标志物的表达情况不同,同一肝癌细胞可同时表达多个肝癌干细胞的分子标志,且可见8个抗体均阳性的肝癌细胞.其中2772个有效细胞中有2453个细...     

新生儿难治性惊厥的研究进展

<正>惊厥是神经元过度去极化及同步异常放电引起的运动、行为和自主神经系统功能的异常。新生儿期的惊厥发作是由于神经递质发育的特殊性及不成熟的脑组织对损伤的易感性所致,很多原因都会使新生儿期的惊厥表现为反复、持久发作的特点。而现有的抗惊厥药物对这类惊厥的治疗又常缺乏有     

慢性乙型肝炎患者肝纤维化无创诊断模型的建立和验证

肝纤维化是许多慢性肝病的共同病理过程.大量临床研究表明肝纤维化可减轻或逆转.肝纤维化的早期诊断,对判断慢性肝病的疾病进展、临床结局、选择抗肝纤维化治疗药物及其疗效考核具有重要临床意义.目前肝穿刺病理检查仍然是诊断肝纤维化的金标准.但肝穿刺是一种有创检查,有一定的并发症发生率,患者依从性较差;存在抽样误差和观察者误差;且仅取到五万分之一的肝组织.可能会低估真实病情[1].血清学检查具有无创、易检测、重复性好、价格适宜等特点.近十年的各类研究表明血清学多指标联合检测可明显提高诊断准确性.