实时荧光定量PCR检测石蜡标本中麻风菌DNA

目的：评价实时定量荧光PCR(Real-time PCR)法检测石蜡标本中麻风菌DNA的应用价值。方法：根据基因库(GenBank)发表的M. leprae的全基因组序列,以一段重复序列(repetitive ele￣ment,RLEP)为扩增靶序列,合成引物和探针,构建质粒pGEMT-101作为标准品,用Real-time PCR对石蜡标本进行麻风菌DNA检测,并评价其敏感性。结果：对52例麻风患者的石蜡包埋组织标本麻风菌进行了检测,不同型别麻风(LL：8;BL：10;BT：28;TT：6)的石蜡标本检测阳性率分别为100％(8/8)、80％(8/10)、78.57％(22/28)、50％(3/6)。结论： Real-time PCR方法可在石蜡标本中快速灵敏的检测到麻风菌DNA。     

针刺对微循环血流影响的观察

近年来,国内外对针刺疗法的研究极为广泛和深入,而对针刺在微循环的影响方面的研究尚不多。我们采用激光微循环血流速度测定仪,对14例单纯用针刺治疗的病人,测量了针刺前、后微循环血流的改变,从而     

改进心电图诊断教学方法的一些体会

心电图诊断是诊断学基础中较难掌握的部分之一。以往我在这一部分的教学中虽然做过不少努力,但效果总是不够理想,主要表现在学生阅图能力差。在84级     

《推拿治疗学》教学改革之探讨

《推拿治疗学》是独具特色的中医临床学科之一。它集中医基础、诊断、推拿手法、功法、治疗于一体,通过手法来达到治疗疾病的目的,属于中医外治法的范畴。其治病范围广,对骨伤、内、妇、儿、五官等科疾病都有较好疗效,且操作简单、无药物的毒副作用及手术的创伤,易于被患者接受。因此《推拿治疗学》这门学科对针推专业的学生来说至关重要。改革《推拿治疗学》传统的教学方法,提高教学质量,是适应时代的发展,科学技术的进步,培养合格专业人才的迫切要求。1重视诊断能力培养诊断是疾病治疗的前提。推拿治疗涉及到临床各科疾病,病症复杂、面广,诊断相对困难。不仅要运用传统的中医理论进行辨证,更要结合现代医学的诊察手段,进行辨病。诊断水     

促红细胞生成素联合静脉铁剂治疗肾性贫血的疗效分析

目的观察并比较静脉注射科莫非(右旋糖酐氢氧化铁)联合促红细胞生成素治疗维持性血液透析(HD)患者铁缺乏的临床疗效。方法采用前瞻性、随机对照研究。选择44例慢性肾衰竭维持性HD患者,随机分为静脉注射右旋糖酐氢氧化铁组(静脉组)与口服琥珀酸亚铁组(口服组),静脉组21例,口服组23例,总疗程8周。检测治疗前后血清铁、红细胞相关指标及生化指标,观察疗效及促红细胞生成素的用量。结果共40例完成本研究,静脉组20例,口服组20例,两组患者年龄、性别、族别、维持透析时间、贫血程度、血清铁指标及基因重组红细胞生成素(rHuEPO)用量无显著性差异;治疗8周后贫血均有明显改善,静脉组血红蛋白(Hb)上升(61.45±25.58)%,红细胞压积(Hct)上升(67.22±31.66)%,口服组Hb上升(31.77±13.37)%,Hct上升(34.41±21.81)%,静脉组显著高于口服组(P<0.001);静脉组血清铁蛋白(SF)上升(272.38±502.54)%,口服组上升(186.78±304.55)%,静脉组转铁蛋白饱和度(TSAT)上升(45.6±33.6)%,口服组上升(11.4±12.11)%,静脉组明显高与口服组(P<0.001);静脉组rHuEPO的用量(7150.00±1565.25),口服组rHuEPO的用量(10600.00±2521.49),rHuEPO的用量静脉组低于口服组(P<0.001);治疗8周后两组血清白蛋白升高,静脉组血肌酐下降,其他指标无改变。结论促红细胞生成素联合静脉铁剂治疗肾性贫血的疗效优于口服组,且节省促红细胞生成素的用量,减少治疗费用,适合维持性血液透析(HD)患者铁缺乏的长期补铁的途径。     

羟基喜树碱内酯环形式与其抗癌活性的关系

目的：研究10－羟基喜树碱（HCPT）的内酯环形式与抗癌活性之间的关系。方法：采用MTT和台盼蓝排染法测定两种内酯环形式的HCPT在体外对多种肿瘤细胞的作用,并在体内（0．5、1．0和2．0mg/kg,ip）评价它们对S180肉瘤和HepS肝癌的抑瘤效果;应用HPLC方法观察了HCPT内酯环在肿瘤细胞内的转化情况。结果：两种形式的HCPT对同一种肿瘤细胞均显示类似的细胞毒性（P＞0．05）;但在体内实验中,闭环HCPT（C－HCPT）的抑瘤率明显高于（约两倍）开环HCPT（O－HCPT）。采用HPLC方法分析证明,两种类型的HCPT能在一定条件（如pH改变等）下相互转化。因此,O－HCPT体内、外作用的明显差异可归因于其在偏酸性环境（包括肿瘤细胞体外培养时）可较多地转化成C－HCPT,而在偏碱性环境（如正常体液pH约为7．40）中多呈开环形式。结论：闭环和开环HCPT羟基喜树碱均具有抗癌活性,但前者的活性较强;开环HCPT可在一定条件下转化成闭环形式。     

MRFQ SYBR Green I-PCR结合融解曲线快速检测产ESBLs菌耐药基因

目的 探讨SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法快速检测常见超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药基因的可行性。方法选取经测序验证携带有tern、shy、ctx—m-1组、ctx-m-9组耐药基因的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作为阳性菌株,建立细菌耐药基因SYBRGreen1实时荧光定量多重PCR检测体系,这四种耐药基因的扩增产物片段长度和融解温度（Tm值）都不同,可通过结合融解曲线分析加以区别。用此体系检测110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌,根据特异性Tm值的有无和差别判断是否携带有耐药基因及携带耐药基因型别。结果与耐药表型、琼脂糖电泳、测序结果对照。结果经SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析,分别有47株（42．7％）大肠埃希菌和34株（36．2％）肺炎克雷伯菌携带有这四种常见的ESBLs耐药基因,与表型确证实验和电泳结果比较达到100％的一致性;根据Tm值的不同,对耐药基因进行鉴别,携带单个耐药基因菌株的检测与电泳结果和测序结果比较达到100％的一致性;对携带多个耐药基因菌株的检测不能达到较好的分辨性。结论SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法可以快速筛查常见超广谱β-内酰胺酶（EsBI曲耐药基因,对携带单个耐药基因的细菌的基因型能进行准确鉴定。这对指导临床医生合理使用抗生素进行临床治疗和对耐药细菌的流行病学监测具有重要价值。     

连续性血液净化治疗急性肾损伤合并老年多脏器衰竭预后影响因素

目的分析合并急性肾损伤(AKI)的老年多脏器衰竭(MOF)患者,接受连续性血液净化治疗(CRRT),预后的影响因素。方法回顾性分析老年AKI合并MOF接受CRRT治疗患者94例。观察患者首次治疗前的24 h尿量,24 h液体正平衡量,血清肌酐,尿素氮,B型尿钠肽(BNP),血中性粒细胞凝胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、急性生理学和慢性健康状况评估(APACHE)Ⅱ评分、AKI的KDIGO分级、多脏器功能障碍评分(LODS)。结果 90 d生存组与死亡组患者相比,首次治疗前各项指标差异均有统计学意义(P0.05)。多因素回归分析发现:CRRT前的血NGAL、APACHEⅡ评分、BNP是影响90 d死亡率的独立风险因素。受试者工作特征(ROC)曲线发现NGAL、APACHEⅡ评分、BNP三项联合后对死亡终点事件的预测作用ROC曲线下面积(AUC)最大,为0.953,截断值0.353(敏感度90.5%,特异度88.5%)。结论对于合并AKI的老年MOF患者,应早期即开始CRRT治疗,具体介入时机可参考APACHEⅡ评分、NGAL、BNP组成的方程判定。