荧光原位杂交技术在检测胎儿染色体亚显微结构异常中的应用

目的探讨荧光原位杂交（FISH）技术在诊断培养后的羊水细胞染色体亚显微结构异常中的应用价值。方法对1例18孕周,经典细胞遗传学羊水染色体核型分析结果与B超检查结果有不符合的胎儿,应用FISH的18号、X、Y染色体着丝粒探针和13、21号染色体位点特异性探针,对培养后的羊水中期细胞标本进行检测。结果共分析了22个独立细胞克隆的分裂象,发现胎儿染色体存在两种核型嵌合,结果记为：mos45,X[20]/46,XY[2];FISH检测发现此胎儿核型存在Y染色体亚显微小片段易位。结论 FISH技术结合传统细胞遗传学核型分析,对于诊断染色体亚显微结构异常非常重要。     

Duchenne型肌营养不良171例临床表型与基因型特征分析

目的 探讨Duchenne型肌营养不良(DMD)患儿临床表型与基因型的特点.方法 收集2014年1月至2020年6月经临床及基因检查确诊为DMD的171例患儿的临床资料,对其临床表现和基因变异结果进行分析.结果 171例患儿中男165、女6例;中位年龄4.1(1.7～7.0)岁,其中<1岁21例,～3岁41例,～7岁6...     

冠心病患者与健康人血浆同型半胱氨酸水平比较观察

近２０年来，一些发达国家通过流行病学的研究证明除高血脂、高血压、糖尿病、吸烟等心血管病的危险因素外，高同型半胱氨酸血症也是动脉硬化性心血管病，特别是早发性和遗传性心血管病的独立危险因素。为了探索北京地区高同型半胱氨酸是否是动脉硬化性疾病的危险因素，我...     

股骨头骨折2例报告

１　病例介绍【例１】程某,男,３３岁,驾驶员。开车高速行驶中与对面的车相撞,致伤左髋部。曾在当地医院行Ｘ线摄片检查诊断为左股骨头骨折并左髋关节脱位而行左胫骨结节牵引治疗。１周后转入我院,患者一般情况可,左髋部肿胀,压痛明显,左下肢末梢血液循环、感觉尚好。Ｘ线片、ＣＴ片示左股骨头骨折,折块位于髋臼内,股骨头大部分向后上方脱出髋臼,髋臼后缘有一小骨折块,无明显移位。【例２】崔某,男,４５岁。被砖车后滑撞伤右髋部。急来我院,患者右髋部肿痛剧烈,右下肢呈屈曲畸形,右臀后可触及一骨折块,右下肢血循、感觉无…     

家族性高胆固醇血症家系低密度脂蛋白受体基因剪接突变的研究

目的　检测中国汉族家族性高胆固醇血症 (familial hypercholesterolemia,FH)大家系低密度脂蛋白受体 (low density lipoprotein receptor,L DL R)基因突变 ,探讨 FH发病的分子机理。方法　首先采用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (polymerase chain reaction- restriction fragment lengthpolymorphism,PCR- RFL P)技术检测载脂蛋白 B1 0 0 (apo B1 0 0 )基因 Q35 0 0 R突变 ,排除家族性 apo B1 0 0 缺陷症 ,再采用 PCR扩增结合核苷酸序列分析检测 1例临床诊断为 FH纯合子患儿及其家系成员 L DL R基因启动子和全部 18个外显子片段 ,结果与 Gen Bank公布的该基因正常序列对比找出突变 ,并在家系其他成员中证实该突变。结果　该患儿 L DL R基因第 3内含子剪接供体处存在 IN 5′GT→AT纯合剪接突变 ,并且在家系中得到证实 ,一级和二级亲属中各发现 2例相同位点和相同形式的杂合子 ,其基因型表现为野生型和突变型杂合现象。同时未检测出患儿及其父母 apo B1 0 0 Q35 0 0 R突变。结论　发现 L DL R基因第 3内含子 G→ A纯合剪接突变 ,可能是该 FH家系发病的分子基础 ;检测该突变对临床干预和遗传指导有参考价值。     

汉族家族性高胆固醇血症患者永生化细胞株的构建及其LDL-R功能的研究

 目的：构建汉族家族性高胆固醇血症（FH）患者永生化细胞株;分析细胞表面低密度脂蛋白受体LDL-R活性。方法：将研究对象20例分为3组：（1）FH纯合组6人，为临床确诊的家族性高胆固醇血症纯合患者;（2）FH杂合组12人,为纯合患者的父母;（3）正常对照组2人，为血脂正常者；采用EB病毒转化外周血淋巴细胞；免疫组化法观察细胞表面LDL-R分布；流式细胞技术观察淋巴细胞LDL-R功能，4 ℃时检测其对LDL结合能力，37 ℃时检测其对LDL内化功能。结果：免疫组织化学法，在光镜下可见淋巴细胞表面散在分布的LDL-R，呈现棕褐色颗粒样；流式细胞技术对3组细胞株检测证实LDL-R功能存在差异，EB病毒转化的细胞株具有永生化特性;正常组LDL-R平均表达量111.35，高于杂合组（97.17）及纯合组（60.62）；纯合组37 ℃内化量228.61，4 ℃ 结合量95.20，结合量为正常人的41.6%，杂合组37 ℃内化量91.28，4 ℃结合量67.42，结合量为正常人的73.8%。结论：采用EB病毒转化外周血淋巴细胞，成功地构建了汉族家族性高胆固醇血症患者的永生化细胞株，此细胞株的功能研究表明其具有稳定的永生化特性，完整地保存了FH患者的细胞种质。     

PCR与RFLP相结合对临床标本真菌鉴定的研究

探讨快速、准确检测临床常用标本真菌分离、鉴定方法。方法PCR与RFLP相结合,应用9种临床重要真菌的通用引物,对常用临床标本(痰、BALF、胸水、尿、血)224份进行分离、鉴定,并对19例进行痰与非痰标本结果一致性、敏感性比较。 结果224份标本共检出真菌83株,阳性率37.03％,其中白色念珠菌35株(42.3％),假热带念珠菌30株(36.1％),热带念珠菌10株(12％),光滑念珠菌8株(9.6％)。19例痰与非痰标本47次检测,一致性、敏感性良好。结论PCR结合RFLP对真菌检测具有敏感、快速的特点,值得临床推广应用。     

中国性发育异常患儿临床表型与基因型分析

目的:探讨性发育异常（DSD）患儿临床表型及基因型的异质性及相关性。方法:回顾性分析全国36家儿童医疗机构2017年1月至2021年5月临床拟诊DSD的1 235例患儿的临床资料,对277个DSD相关候选基因进行捕获之后进行二代测序,结合临床表型分析其异质性及相关性。结果:1 235例临床拟诊为DSD的患儿初诊时社会性...     

单链构象多态性技术在家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因13外显子点突变筛查中的应用

目的 探讨单链构象多态性(SSCP)技术在家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体(LDLR)基因13外显子点突变筛查上的应用价值.方法 以16例临床诊断为家族性高胆固醇血症(FH)患者为研究对象,提取外周血DNA,扩增LDLR基因第13号外显子片段,组合最优条件进行SSCP电泳并银染.对异常条带进行DNA序列测定确定其突变性质和位置.结果 优化SSCP电泳条件为:不含甘油8%凝胶,在10℃条件下电泳;含5%甘油的8%凝胶,在常温条件下电泳(交联度均为49:1).凝胶厚度均不超过0.4 mm,电泳电压为5 V/cm,在此条件下进行SSCP电泳均可以得到满意电泳图谱.对发现的异常条带,结合DNA测序证实有4例患者LDLR基因第13外显子分别发生A606T,D601N,Y601D,或G636V错义突变,同时均存在1959碱基C→T同义突变.另外4例患者13外显子仅存在1959碱基C→T同义突变.结论 通过优化各种条件进行的PCR-SSCP银染方法,是高胆固醇血症病LDLR基因13外显子点突变初步筛查的有效手段.     

快速检测β地中海贫血基因型的方法学研究

目的利用PCR-HRM技术对常见β地中海贫血5种突变类型进行检测,对野生型、纯合以及杂合突变进行分析,建立一种有效地突变筛查方法。方法针对5种突变类型进行短片段扩增引物设计,用已知基因型的β地中海贫血患者基因组DNA标本进行PCR-HRM分析,并对于纯合子进行PCR产物测序验证。结果常见5种基因型纯合子以及杂合子均可以利用PCR-HRM进行区分,并得到测序验证。结论利用PCR-HRM技术可以对常见β地中海贫血进行基因突变筛查,并可以发现未知突变。