聚合酶链反应直接检测粪便中志贺氏菌和侵袭性大肠杆菌

为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）在腹泻病快速诊断的实用性，应用ＰＣＲ和长臂光敏生物素标记福氏２ａ的特异ＤＮＡ片段作探针，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法，检测志贺氏菌和侵袭性大肠杆菌（ＥＩＥＣ）共有的侵袭相关性基因（ｉａｌ），９株志贺氏菌和２株ＥＩＥＣ均存在特异的３２０ｂｐＤＮＡ片段。最小检测菌量为１００菌落形成单位（ｃｆｕ）。１９株非志贺氏菌均阴性。检测５８份粪标本，ＰＣＲ２３份阳性（３９．６％），粪培养１８份阳性（３１％）。全部实验，包括ＤＮＡ粗提取，仅需６～７小时。结果表明其敏感性高于粪培养，ＰＣＲ操作简便、快速、敏感、结果可靠，适用于腹泻病的快速诊断。     

乙型肝炎病毒基因PCR诊断方法的建立和应用研究获奖

军事医学科学院放射医学研究所研究员马立人等将分子生物学新技术——PCR技术,用于乙型肝炎病毒DNA的临床检测,可直接检测病毒核酸,更灵敏确切地反映传染性,建立了微量快速、套式(二次及一次)、多元、分型PCR方法以及PCR定量技术,配齐PCR用全套轻便装备及试剂盒。具多项创新,在国内领先。成本降低至原法的1/5～1/10,灵敏度和特异性明显优于血清学方法,已向全国200多个单位推广使用。在血制品生物制品质控、输血及临床     

用PCR及Southern杂交方法对HBsAg阴性献血员HBV感染的检测

用ＰＣＲ与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交（ＳＢＨ）方法对７８例ＨＢｓＡｇ阴性献血员进行ＨＢＶ感染检测，结果２份标本经ＰＣＲ后直接在２５４ｎｍ紫外灯下观察就可见到特异扩增带，另有１２份标本经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交后可观察到特异扩增带，总阳性率较原来ＨＢｓＡｇ检测提高１７．９％，说明ＰＣＲ－ＳＢＨ可以区分ＨＢｓＡｇ阴性但仍然存在ＨＢＶ潜伏感染的献血员，使用ＰＣＲ－ＳＢＨ方法检测的ＨＢＶ可以提高输血的安全性。     

长臂光敏地高辛的研制与初步应用

设计简化合成步骤，合成核酸标记试剂－长臂光敏地高辛，用其标记探针，并分别用于对幽门螺杆菌，白色念珠菌，混合真菌，ｐ５３基因的点杂交，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及原位杂交检测上，不仅提高了检测灵敏度而且使反应结果更特异。     

原位聚合酶链反应对胃癌和胃炎组织内幽门螺杆菌的检测

组织化学染色是检测幽门螺杆菌较灵敏的方法，但迄今为止所有组织化学方法均不特异，特别是在细菌数量较少或经治疗后，更易造成假阴性结果。为此，我们建立了原位聚合酶链反应方法，使用它对胃组织内的幽门螺杆菌进行检测。     

对胃癌和慢性萎缩性胃炎组织内细胞凋亡的检测与分析

对胃癌和慢性萎缩性胃炎组织内细胞凋亡的检测与分析李月娟刘耀清黄焰古庆阳马立人军事医学科学院放射医学研究所北京１００８５０李月娟，女，１９６３年２月生，博士，助理研究员细胞凋亡是由基因编程控制的细胞自杀过程，是多细胞动物生命现象的重要属性。近年来，人们...     

大鼠γ射线照射后BALF中透明质酸含量的变化

透明质酸 (ＨＡ)是细胞间质的一种主要成分 ,虽然有文章认为[1 ] ,ＨＡ的变化可作为判断放射性间质性肺炎病变过程的一个标记 ,但对其变化的机理和其对后期纤维化的影响却不甚明了。本文作者观察了放射性间质性肺炎发病过程中ＨＡ的变化机理 ,并观察了不同分子量的ＨＡ片段对胶原蛋白基因表达的影响。一、材料和方法1 材料 :ＤＭＥＭ培养基、小牛血清 (ＦＣＳ)及胰蛋白酶购于瑞典ＳＶＡ公司。重组的ＰＤＧＦ ＢＢ和ＴＧＦ β由瑞典Ｌｕｄｗｉｇ肿瘤研究所惠赠。3Ｈ标记的ＨＡ由奥地利Ｆｒａｓｅｒ博士惠赠。ＨＡＳ1、ＨＡＳ2、ＨＡＳ3、ＨＹ…     

小肠结肠耶氏菌O∶22血清型的致病性

小肠结肠耶氏菌(耶菌)能引起人类腹泻病、结节性红斑、关节炎、阑尾炎及败血症等疾病[1]。常见耶菌为Ｏ∶3、Ｏ∶5,27等血清型,Ｏ∶22血清型常被视为非致病型[2]。为进一步明确Ｏ∶22血清型致病性,我们采用聚合酶链反应、ＤＮＡ序列分析检测耶菌致病基因(ａｄｈｅｒｅｎｔｉｎｖａｓｉｏｎｌｏｃｕｓ;ａｉｌ),并结合自凝试验和刚果红试验对其致病性进行探讨。一、材料和方法1菌株:耶菌购于中国医学细菌保藏管理中心。Ｏ∶3血清型3株(52301);Ｏ∶4,33血清型1株(52205);Ｏ∶5,27血清型1株(52207);Ｏ∶7,8血清型1株(52210);Ｏ∶9血清型1株(5230…     

聚合酶链反应对沙门氏菌肠炎快速诊断的初步应用

对沙门氏菌肠炎快速诊断,采用聚合酶链反应和ＤＮＡ序列分析,以沙门氏菌保守序列--侵袭基因Ａ作为靶序列,检测２３株沙门氏菌均扩增出２８４ｂｐ特异的ＤＮＡ片段,提示存在侵袭基因Ａ,２０株非沙门氏菌扩增阴性。检测８４份粪标本,１３份阳性,其中仅８份大便培养阳性。ＤＮＡ序列分析证实粪标本扩增出的２８４ｂｐＤＮＡ片段与侵袭基因Ａ序列一致。结果表明聚合酶链反应用于沙门氏菌肠炎诊断,具有简便、快速、敏感等优点,适于临床快速诊断     

茜草酸甙的分离和性质的观察

从茜草(Rubia cordifolia)根经过水煎、酒沉、铅沉、酸析去铅、锦纶柱层析、干燥等步骤制得的茜草提取物(代号“208”)和用简化工艺制备的茜草提取物(代号“408”)给正常狗口服后可以观察到它具有使外周血自细胞数明显升高的药理作用。经丙种射线照射265拉德引起急性放射病的狗,用茜草提取物口服治疗可以使30天活存率从26.2％(对照组)提高至63.3％。