γ干扰素基因修饰疫苗的抗肿瘤作用

把人源γ-干扰素（IFN－γ）CDNA，通过逆转录病毒载体导入人肺腺癌A549细胞株。经G418筛选获得了能稳定分泌干扰素的A549－IFN－γ克隆细胞，经Co^60照射制成疫苗，结果证实它对小鼠肿瘤显示有抑制作用。     

食管癌患者外周血基因表达谱研究(英文)

目的用基因芯片技术研究食管癌患者外周血和正常人基因表达谱差异,筛选与食管早期癌变相关的基因。方法分别抽提食管癌患者外周血细胞和正常人外周血细胞总 RNA 并纯化 mRNA;将各 mRNA 逆转录合成以 Cy5和 Cy3标记的cDNA一链做探针,混合后在1张含有4096条双点人类全长基因的芯片上进行杂交。用扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用软件对扫描图象进行数字化处理和分析。结果食管癌患者外周血细胞和正常人外周血比较差异2倍以上的共有92个基因。其中差异3倍以上共有36个基因。有2个人尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)基因显著上调,80K-L 蛋白基因、蛋白酪氨酸磷酸酶基因、原癌基因蛋白 mRNA 显著上调,胶原 V 型α-2基因显著下调。结论 80K-L 蛋白基因、蛋白酪氨酸磷酸酶基因、原癌基因蛋白、胶原 V 型α-2基因异常可能与食管癌发生、发展和转移相关。uPAR 基因可能被利用在外周血诊断食管癌微转移具有重要意义。     

蛋白质微阵列

哈佛大学研究者在《科学》杂志上报道在盖玻片一半大小的玻璃片上已建立１万多点的蛋白质微阵列。用该微阵列可研究各种蛋白质的功能。例如鉴定能结合到其他游离蛋白质或一个小的亲药物分子。纽约Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ大学生物化学家 ,也是蛋白质微阵列的开创者Ｐｈｉｚｉｃｋｙ和其他人指出蛋白质微阵列可能有一些甚至比ＤＮＡ微阵列更有利的优点。但它要在细胞中进行大量的化学反应 ,更重要的是 ,ＤＮＡ微阵列检测的是可能被激活基因的ｍＲＮＡ或者是ｍＲＮＡ复制的ＤＮＡ ,而细胞中大量的ｍＲＮＡ常常显示与大量的蛋白质互不相关。更大的困…     

胃癌组织中c-erbB-2与P-gp表达的相关性研究

目的了解胃癌组织中c-erbB-2表达与多药耐药的相关性及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测了98例胃癌组织中c-erbB-2表达,应用流式细胞术(FCM)检测癌细胞P-糖蛋白(P-gp)水平,并对其进行相关性分析。结果胃癌组织中c-erbB-2阳性表达33例,阳性率33.67%;P-gp阳性表达58例,阳性率59.18%。在c-erbB-2表达阴性的病例累及2～3个部位的癌比累及1个部位癌的P-gp表达增多,两组比较有显著性差异(P=0.035)。当c-erbB-2和P-gp表达双阳性时,P-gp表达增多与双阴性组比较有非常显著性差异(P<0.001);当c-erbB-2或P-gp表达单阳性时,P-g表达增多与双阴性组比较有非常显著性差异(P<0.001);胃癌c-erbB-2和P-gp表达与患者年龄、性别、临床分期、胃癌分化程度和3年生存情况分析,均无统计学意义。结论同时检测胃癌c-erbB-2和P-gp表达水平,可为胃癌的综合治疗及化疗药物选择提供临床参考依据。但是不能用来判断胃癌患者预后。     

从大肠癌免疫核糖核酸(IRNA)中分离信使核糖核酸(mRNA)

目前对免疫核糖核酸(IRNA)的抗癌机理存在着两种主要见解,一种认为IRNA的抗癌作用与其他免疫刺激剂(例B.C.G和C.P.等)一样,仅引起机体的非特异性免疫水平的升高,起一种非特异的免疫应答抑癌作用;另一种看法是,在IRNA中携带(或蓄藏)有针对肿瘤抗原(细胞)的特异性免疫信息,且此特异免疫抗癌信息存在于IRNA中的mRNA部分,最近已有实验室证明IRNA的特异抗癌作用正是基于mRNA所含有的特异密码免疫     

食管癌P-gp和P27表达水平及对生存的影响

目的:研究食管癌细胞多药耐药性和细胞周期调控因子表达水平及对患者生存期的影响。方法:用免疫组化方法检测了104例有随访资料的食管癌手术标本中癌细胞P-糖蛋白(P-gp)和细胞周期调控因子(P27)表达水平,并进行临床病理分析。结果:104例食管癌P-gp表达阴性70例(67.3%);阳性表达34例,其中轻度表达6例(5.7%)、中度表达18例(17.3%)、重度表达10例(9.6%)。P27表达阴性34例(32.7%);阳性表达70例,其中轻度表达7例(6.7%)、中度表达42例(40.4%)、重度表达21例(20.2%)。在生存3年以上组P-gp表达阳性占17.5%(10例),而3年内死亡组P-gp表达阳性占53.3%(24例),两组比较差异有非常显著性(P<0.0001)。P-gp过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率成正相关。生存3年以上组P27表达阳性占75.8%(44例),而在3年内死亡组P27表达阳性占56.5%(26例),两组比较差异有显著性(P<0.05)。P27过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率呈负相关。肿瘤的分化程度在生存组与死亡组比较差异有显著性(P<0.05)。肿瘤的浸润深度在生存3年以上组浸润全层仅占53.4%(31例),而在3年内死亡组浸润全层占82.6%(38例),两组比较差异有非常显著性(P<0.01)。淋巴结有无转移的生存组与死亡组比较差异有显著性(P<0.05)。临床分期在生存组与死亡组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:P-gp过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率成正相关。P27过表达与癌细胞恶性生物学行为和死亡率呈负相关。检测P-gp和P27表达水平可为临床提供选择化疗方案的参考依据。肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期是影响食管癌患者生存的重要因素。     

高转移卵巢上皮性癌基因表达谱中差异表达基因与染色体拷贝数变异的相关性

目的 采用基因芯片技术研究高转移卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞株HO-8910PM和正常卵巢上皮组织基因表达谱的差异表达基因及其与染色体拷贝数变异的相关性.方法 利用全基因组表达谱芯片、单核苷酸多态性(SNP)扫描芯片分别检测高转移卵巢癌和正常卵巢上皮组织之间的差异表达基因以及染色体拷贝数变异情况,并采用生物信息学方法对检测结果进行相关性分析.筛选部分染色体片段和差异表达基因,用荧光原位杂交技术和实时荧光定量PCR技术进行验证.结果 通过对表达谱芯片和SNP扫描芯片整合分析显示,高转移卵巢癌细胞中有379个SNP位点,共385个差异表达基因(其中有6个SNP位点发现各有2个基因).这些SNP位点染色体拷贝数扩增的有240个,缺失的有139个.染色体定位分析发现,385个差异表达基因散在分布于各条染色体上,其中3号染色体最多,有34个(占8.8%,34/385);其次是2、9、10、1和11号染色体分别有33个(8.6%)、28个(7.3%)、27个(7.0%)、25个(6.5%)、24个(6.2%);6和12号染色体各有23个(6.0%);4和5号染色体各有22个(5.7%);这10条染色体占总数的67.8%(261/385).基因的功能分类:385个差异表达基因属于酶及其调控子基因的最多(99个,占25.7%),其次是信号传导基因(54个,占14.0%),第3类是核酸结合基因(50个,占13.0%),第4类是蛋白结合基因(36个,占9.4%);以上4大类共占差异表达基因总数的62.1%(239/385).结论 肿瘤的转移是多基因共同作用的结果.4大类(酶及其调控子、核酸结合、蛋白结合、信号传导)差异表达基因是今后研究卵巢癌转移相关的重要基因.1、2、3、4、5、6、9、11和12号染色体是值得关注的转移相关位点所在的染色体.     

大肠癌免疫核糖核酸(iRNA)生物活性测定——巨噬细胞鼓动(Pulse)法简介

iRNA活性测定,长期以来,一直是iRNA临床应用和实验室研究中急待解决的问题。目前国际上常用的是微量细胞毒法和无细胞系检测系统,其它还有巨噬细胞或白细胞移动抑制法,国内上一医创建的巨噬细胞电泳法等。然而,上述方法都要求一定的条件:同位素标记的靶细胞、液闪仪:富含mRNA的麦胚翻译测试系统要有~(14)C和~3H标记的亮氨酸等,巨噬细胞电泳也需要特殊的仪器配备。因此,我们选用了巨噬细胞移动抑制法。但是,此法重     

异种抗癌免疫核糖核酸(iRNA)临床应用初步

最近由于分子生物学与免疫学的相互渗透,对特异性抗原的传递途径与物质基础以及抗体形成机理进行了深入研究。发现核酸,特别是核糖核酸(RNA)在其中起着重要的作用,它能传递遗传和免疫信息。用动物或人体肿瘤细胞(或肿瘤抗原)攻击(注射)异种动物(豚鼠、羊等)使其致敏。处死动物,取其淋巴结、脾脏和肝脏,抽提其核糖核酸,实验证实此种(异种)免疫核