腺苷A1受体激动剂减轻糖尿病并发抑郁症大鼠的认知功能障碍

目的观察腺苷A1受体(A1R)激动剂对糖尿病并发抑郁症大鼠学习记忆功能的影响。方法将大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍(Met)组[Met组:灌胃给予二甲双胍(0.18 g/kg) 28 d]和二甲双胍联合腺苷A1受体激动剂(Met+CPA)干预组[Met+CPA组:灌胃给予二甲双胍28 d,于第22天开始腹腔注射CPA(1 mg/kg),注射给药7 d]。观察大鼠血糖水平和学习记忆功能;ELISA检测大鼠海马谷氨酸的含量;用免疫组化法和Western blot检测海马谷氨酸转运体GLT-1和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血糖含量显著升高(P0.01);学习和记忆功能明显下降(P0.01);海马中谷氨酸含量明显升高(P0.01);而GLT-1和BDNF表达显著下降(P0.01或P0.05)。与模型组比较,Met组大鼠仅血糖含量显著下降(P0.01),其余指标均未见显著变化;而Met+CPA组大鼠血糖含量显著下降(P0.01),认知功能得到明显的改善(P0.01),海马中谷氨酸含量显著减少(P0.01),且GLT-1和BDNF表达显著增加(P0.01或P0.05)。结论激活腺苷A1受体可有效改善糖尿病并发抑郁症大鼠的认知功能,这可能与其通过减少谷氨酸释放和增加神经营养作用双途径共同减轻神经元兴奋性毒性有关。     

肿瘤标志物室间质评结果的评价

随着肿瘤的发生率和患者的死亡率逐年增高,肿瘤标志物用于肿瘤的辅助诊断、疗效观察、监测复发转移和判断预后等越来越受到临床医师的重视[1]。而肿瘤标志物检测的质量控制是对其结果稳定、可靠的有力保证。     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元微小兴奋性突触后电流的影响

目的观察左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元微小兴奋性突触后电流(mEPSC)频率及幅度的影响,探讨其对海马神经元保护作用的可能机制。方法选用17~19 d胚胎大鼠离体培养海马神经元,神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。细胞随机分为空白对照组、抑郁组、糖尿病组、糖尿病并发抑郁症组、空白血清组、左归降糖解郁方组和阳性药组,培养10 d后加入皮质酮(50μmol/L)和/或高糖(15 mmol/L)建立细胞模型,给予药物血清干预18 h,采用全细胞膜片钳记录神经元mEPSC,比较各组神经元mEPSC频率和电流幅度。结果经NSE免疫细胞化学鉴定,培养7 d后神经元纯度达95%以上。与空白对照组比较,抑郁组、糖尿病组和糖尿病并发抑郁症组大鼠海马神经元mEPSC的频率和幅度均显著上升(P0.01);与糖尿病并发抑郁症组比较,左归降糖解郁方组和阳性药组大鼠海马神经元mEPSC的频率和幅度均显著下降(P0.01)。结论左归降糖解郁方可降低糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元mEPSC的频率和幅度,对海马神经元有保护作用。     

百合地黄汤抑制NLRP3炎症小体激活改善焦虑性抑郁症模型大鼠海马神经元损伤

目的 从NOD样受体热蛋白结构域3（NLRP3）炎症小体探讨经典名方百合地黄汤抗焦虑性抑郁症的作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、文拉法辛组（13.5 mg·kg^-1）,百合地黄汤高、低剂量组（16,4 g·kg^-1）,每组10只。采用28 d慢性束缚应激（6 h）联合皮下注射皮质酮（30 mg·kg^-1）的方法建立焦虑性抑郁症大鼠模型,并从造模第8天起各给药组分别灌胃给予相应药物,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,连续给药21 d。采用高架十字迷宫评价大鼠焦虑行为,旷场实验评价抑郁行为,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清及海马匀浆液中炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）,白细胞介素-18（IL-18）的含量,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马NLRP3,凋亡相关斑点样蛋白（ASC）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）蛋白的相对表达量,苏木素-伊红（HE）染色观察海马组织病理形态,免疫荧光法检测NLRP3,ASC,Caspase-1的平均荧光强度,电镜观察神经元超微结构。结果 与正常组比较,模型组大鼠总穿臂次数（TE）,进入高架十字迷宫开放臂比（OE%）,开放臂停留时间比（OT%）及自主活动评分均显著降低（P<0.01）,焦虑和抑郁样行为显著,血清及海马中IL-1β,IL-6,IL-18含量显著升高（P<0.01）,NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达显著增加（P<0.01）,NLRP3炎症小体激活,海马神经元明显损伤;与模型组比较,百合地黄汤高剂量组大鼠焦虑、抑郁行为均显著改善（P<0.01）,血清及海马IL-1β,IL-6,IL-18含量均明显降低（P<0.05,P<0.01）,海马NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达显著降低（P<0.01）,海马神经元损伤情况得以缓解。结论 百合地黄汤能够通过抑制NLRP3炎症小体的过度激活改善焦虑性抑郁症神经元损伤。     

左归降糖解郁方促进糖尿病并发抑郁症大鼠的海马齿状回神经干细胞的自我更新并激活Shh信号通路

目的 研究左归降糖解郁方调节糖尿病并发抑郁症大鼠海马Shh信号通路,改善齿状回神经干细胞自我更新的机制。方法 建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为5组,16只/组：模型组、阳性药（二甲双胍+氟西汀）组、左归降糖解郁方高、中、低剂量组;另设健康SD大鼠为正常组。其中,左归降糖解郁方高、中、低剂量组和阳性药组分别给予相应药物,对照组和模型组灌胃给予等体积蒸馏水。给药结束后,采用血糖试纸检测大鼠血糖,采用强迫游泳实验和水迷宫实验检测大鼠抑郁样行为和学习记忆功能,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清瘦素水平。采用双重免疫荧光法检测海马齿状回Nestin和Brdu蛋白表达;采用Western blot法检测海马神经干细胞自我更新标（P<0.01）志物及Shh信号蛋白的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠血糖和瘦素水平显著升高（P<0.01）,强迫游泳实验的不动时间显著延长（P<0.01）,水迷宫实验中动物登台时间明显延长,寻台时间明显缩短,穿台次数明显减少（P<0.01）;海马齿状回Nestin和Brdu表达显著减少（P<0.01）,Cyclin D1、SOX2、Shh...     

复方柴金解郁方对抑郁症失眠大鼠海马、下丘脑CaMKⅡ和CREB表达影响及药效研究

目的 观察复方柴金解郁方对抑郁症失眠大鼠海马、下丘脑钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响,探讨复方柴金解郁方改善大鼠抑郁症失眠的作用机制.方法 将SD大鼠随机分为6组,即正常组,模型组,文拉法辛(13.5μg/g)+地西泮组(0.9μg/g),复方柴金解郁方高(10.8 g/kg...     

复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的机制研究

目的探讨复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法体外培养人肝癌Hep G2细胞,取对数生长期细胞,将其消化后随机分为对照组,复方木鸡颗粒高、低(10、5mg/m L)剂量组,顺铂组(1mg/m L)和复方木鸡颗粒(5mg/m L)联合顺铂(1mg/m L)组,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用Hoehcst染色法检测细胞凋亡情况,采用免疫荧光联合激光共聚焦分别检测各组细胞中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、蛋白天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、细胞色素C氧化酶(Cyt-C)表达水平。结果与对照组比较,复方木鸡颗粒10、5 mg/mL组及顺铂组、联合组的细胞活力显著降低(P0.01),细胞凋亡显著增加,细胞内Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.05、0.01),而Bax、Caspase-9、Cyt-C蛋白显著上调(P0.05、0.01),且联合组在抑制人肝癌Hep G2细胞增殖、促进其凋亡、调控凋亡相关蛋白表达的作用效果最佳。结论复方木鸡颗粒可显著抑制Hep G2细胞增殖并促进其凋亡,其与顺铂联合起到协同增效的效果,其作用机制可能与下调人肝癌Hep G2细胞内抑凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-9、Cyt-C表达水平有关。     

脑泰方对血红蛋白诱导的大鼠皮质神经元铁超载及过氧化损伤的多靶点干预作用

目的探讨脑泰方对体外血红蛋白(HGB)诱导的大鼠皮质神经元铁超载及过氧化损伤的多靶点干预作用及其机制。方法原代培养新生SD大鼠皮质神经元,采用HGB诱导神经元模拟建立脑出血后神经元铁超载及氧化应激损伤细胞模型;实验设正常组、模型组、空白血清对照组、铁离子螯合剂甲磺酸去铁胺(DFX)组、抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)组和脑泰方含药血清(NTF)组。采用CCK8法检测各组细胞活力;采用Calcein-AM染色法检测各组细胞内铁含量;采用ELISA法检测各组谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)活性及各组上清液中脂质活性氧(lipid ROS)含量;采用高内涵细胞成像分析技术(HCA)检测各组神经元转铁蛋白受体(TfR)、铁调节蛋白2(IRP-2)、膜铁转运蛋白1(Fpn-1)表达。结果与正常组比较,模型组及空白血清对照组神经元细胞活力降低(P0.01),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid ROS含量、TfR蛋白及Fpn-1蛋白表达升高(P0.01,P0.05),IRP-2、GSH含量、GPX-4活性降低(P0.01,P0.05)。与模型组比较,DFX组、NAC组和NTF组细胞活力、GSH含量、GPX-4活性升高(P0.01,P0.05),细胞内铁含量、细胞上清液lipid ROS含量降低(P0.05);DFX组及NTF组细胞TfR及IRP-2蛋白表达降低(P0.01,P0.05),Fpn-1蛋白表达升高(P0.01,P0.05)。结论脑泰方可通过减轻HGB诱导的大鼠皮质神经元细胞铁超载及lipid ROS累积,从而提高神经元细胞活力;其作用机制与铁死亡的生物学过程相吻合。脑泰方可能通过对神经细胞铁代谢及抗氧化信号分子的多靶点干预作用,抑制脑出血后神经细胞铁死亡而发挥神经保护作用。     

i2000SR全自动免疫分析仪的维护及故障处理

化学发光免疫分析是以化学发光物质为示踪物,具有灵敏度高、速度快等特点.主要试剂包括氧化剂、发光剂和催化剂等,测试中不使用有害的试剂,因此成为非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一.i2000SR具备实现完全自动化和不污染环境等优点,特别是能在较短的时间内得到实验结果,而对该仪器的维护、保养及故障排除尤为重要.