PSP94抗血清制备及正常、增生和癌变前列腺人外周血PSP94分析

构建了GST－PSP94融合蛋白表达质粒pGEX-PSP94,并使其在大肠杆菌中表达了GST－PSP94融合蛋白。该融合蛋白经亲合层析纯化后,免疫家兔获得了PSP94抗血清。经Wenstrn blot分析,该PSP94抗血清可与重组PSP94蛋白发生特异性结合。用它对正常人和前列腺增生病人各10例、前列腺癌病人5例的外周血PSP94浓度进行了分析。结果显示,PSPS94在这三种人外周血中的浓度无明显差异。提示PSP94不能作为前列腺癌的血清标志物。     

辐射危害的阈值问题──纪念伦琴发现X射线100周年

自伦琴发现Ｘ射线一个世纪以来,核辐射和核技术已广泛应用于人类社会生活和经济发展的各个方面,并促进了放射科学领域的深入研究。低水平辐射对健康的影响倍受重视,其中对辐射致癌的危险尤为关注。辐射致癌有无阈值,既涉及放射生物学理论,又关系辐射防护实践。辐射兴奋效应的研究获得了日益增多的科学证据,对辐射致癌的“无阈”假说提出了疑问。已知低水平辐射诱导适应性反应、增强免疫功能、抑制肿瘤生长,这是辐射兴奋效应研究中三个相互联系的核心问题。从分子水平阐明三者的本质,将有助于加深人们对辐射致癌有无阈值的理解。     

血管内皮生长因子重组DNA的构建及体外表达

目的:以质粒PCNDA3.0为载体,研究血管内皮生长因子(VEGF)目的基因在体外真核细胞中的表达.方法:将编码人可溶性VEGF165的目的基因克隆于带有CMV启动子/增强子的PCNDA3.0载体上,重组为PCNDA3.0-VEGF165质粒载体.直接以质粒DNA形式应用脂质体介导的方法转染人脐静脉内皮细胞ECV304,收取细胞上清,用ELISA和Western blot方法检测上清中VEGF165可溶性表达产物.结果:VEGF165基因在CMV启动子/增强子的调控下,可在ECV304细胞高效表达,且在转染后72 h表达量明显高于转染后48 h的表达.结论:以质粒PCNDA3.0为载体,VEGF165基因可以在体外真核细胞中表达,为治疗缺血性疾病提供一个新的基因治疗途径.     

X射线全身照射对小鼠胸腺细胞p53、p21、GADD45及MDM2蛋白表达的影响

目的：观察电离辐射全身照射对小鼠胸腺细胞ｐ５３、ｐ２１、ＧＡＤＤ４５ 及ＭＤＭ２ 蛋白表达的影响。方法：采用间接免疫荧光标记,流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果：２ Ｇｙ Ｘ射线照射后１～８ ｈ ｐ５３ 蛋白表达显著增高;照射后４～４８ ｈ ｐ２１ 蛋白表达显著增高;ＭＤＭ２ 蛋白在照后４ ｈ 及８ ｈ 显著增高;而ＧＡＤＤ４５ 蛋白表达在照后１～４８ ｈ 内无明显变化。结论：电离辐射可诱导胸腺细胞ｐ５３、ｐ２１ 及ＭＤＭ２ 蛋白表达增高。此结果将对辐射诱导胸腺细胞Ｇ１ 期阻滞的分子通路研究有重要意义。     

低剂量X线全身照射对小鼠甲状腺和肾上腺皮质功能的影响

本文报道,75mGyX线全身照射后4天,引起正常小鼠、SRBC免疫小鼠血浆中皮质酮含量降低,而血浆中 T_3、T_4的含量在照射后4天、7天均未见明显变化。提示75mGy照射后肾上腺皮质功能下调,而甲状腺功能未受影响。     

肿瘤相关抗原肽与低剂量全身照射的协同抑瘤作用

目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据。方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小鼠75mGyX射线全身照射,12h后以TAP提取物皮下免疫小鼠,检测脾细胞CD3、CD69和TCRαβ表面标记、脾T细胞亚组百分数的变化、脾细胞ConA反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果小鼠经TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞CD3分子和CD69分子的表达显著升高,脾细胞ConA反应性、IFNγ分泌活性和CTL杀伤活性显著增强,IL-2分泌增多。而同时给予LDR的小鼠不仅上述功能不同程度增强,脾CD8+细胞百分数显著增高。结论LDR与细胞膜TAP具有协同抑瘤作用,细胞免疫力的明显增强可能为其机制之一。     

分子内分泌学的进展及其临床意义

分子内分泌学是一门新发展起来的学科,近十年来进展较快。它的发展加深了人们对生物机体神经体液调控机理的认识,对生理学、病理生理学和临床医学起到了很大促进作用。由于现代先进技术的应用,才有可能从分子水平来探讨激素的作用机理,从激素分子的改造来达到防治效应,从激素分子的特异测定来提高诊断水平。分子内分泌学涉及的内容很多,本文只就与医学临床关系密切的四个问题作初步介绍。     

X射线全身照射对小鼠胸腺细胞GADD45及Rb蛋白表达的影响

细胞凋亡是机体维持内环境稳态的重要过程，多种大分子物质的合成是大多数细胞凋亡所必需。ＧＡＤＤ４５和Ｒｂ蛋白与细胞凋亡和死亡密切相关，在某种程度上决定了细胞周期的进程。电离辐射可诱导细胞凋亡，本研究探讨不同剂量Ｘ射线对ＧＡＤＤ４５和Ｒｂ蛋白表达的影响，...     

体外抑制素和性激素对腺垂体细胞功能的影响

大鼠腺垂体细胞与睾丸Sertoli细胞联合培养72小时,培养液中促卵泡激素(FSH)含量明显低于垂体细胞单独培养时的FSH含量(P<0.001),表明Sertoli细胞在体外分泌抑制素,在垂体水平抑制FSH分泌。1.8×10~(-13)～9.2×10~(-13)M雌二醇(E_2)对腺垂体细胞分泌FSH量没有影响。1.7×10~(-10)～6.9×10~(-10)M睾丸酮(T)能刺激腺垂体细胞分泌FSH,致使腺垂体细胞分泌FSH量明显升高(P<0.005)。     

羊促卵泡素的异种放射免疫分析的研制和应用

促卵泡素(FSH)的放射免疫分析法的一大困难是难于获得特异性抗血清,消除与促黄体素(LH)和促甲状腺素(TSH)的交叉反应。建立异种放射免疫分析系统可以克服这一困难。