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目的通过研究hPTH(1~34)对人成骨肉瘤细胞株SaOS-2胞浆内cAMP、IP3、Ca2+的影响,来阐明PTH与其膜上特异受体结合后的胞浆内主要信息传递途径。方法利用蛋白竞争结合法测定胞浆内cAMP,以Fluo-3/AM作为荧光指示剂,激光共聚焦显微系统显示SaOS-2内[Ca2+]i的变化,离子交换层析法测定hPTH(1~34)作用下胞浆内IP3的改变。结果hPTH(1~34)可使SaOS-2胞浆内cAMP明显升高且与其浓度呈正相关,其最佳作用时间为10min。hPTH(1~34)能迅速提高SaOS-2内[Ca2+]i,而且作用30s时SaOS-2胞浆内IP3升高即达最高峰,未发现百日咳毒素对此现象有抑制作用。结论cAMP及IP3/Ca2+两条信息途径均参与hPTH(1~34)对成骨细胞的调节作用 相似文献
14.
Ca~(2+)/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路在DPDPE长时程作用的NG108-15细胞中的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察阿片类依赖时Ca2 + /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )信息通路的变化 ,以及Ca2 + /CaMKⅡ信息通路与cAMP水平之间的关系。方法 以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别采用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 3 2 P参入法以及RT PCR测定cAMP水平、钙调蛋白 (CaM)活性、CaMKⅡ活性和mDOR的mRNA表达水平的变化。结果 DPDPE长时程作用NG10 8 15细胞 ,cAMP水平升高 ,形成阿片依赖 ;细胞CaM活性和CaMKⅡ活性也升高 ,该升高可被CaM拮抗剂W 7所抑制 ,而CaMKⅡ活性的升高可被CaMKⅡ特异性抑制剂KN 6 2所抑制。W 7或KN 6 2可抑制阿片依赖导致的细胞cAMP水平的升高。阿片依赖时 ,加入纳洛酮诱发戒断 ,CaM活性、CaMKⅡ活性进一步增高。而在阿片依赖时 ,δ阿片受体的mRNA表达水平无明显变化。结论 Ca2 + /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路可通过调节cAMP水平参与阿片依赖的机制。 相似文献
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文本观察了几种阿片类物质对小鼠脾脏淋巴细胞内环磷酸腺苷,游离钙及钙调蛋白的影响。结果表明:吗啡、α-CAO、MENK、DADLE及强啡肽均降低小鼠脾脏淋巴细胞内环磷酸腺苷水平,升高淋巴细胞内游离钙浓度,增加淋巴细胞内钙调蛋白活性。预先给予纳洛酮能够阻断阿片类物质的作用。说明阿片类物质的作用是通过阿片受体介导的。 相似文献
16.
目的:观察阿片类依赖时Ca^2 /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信息通路的变化,以及Ca^2 /CaMKⅡ信息通路与cAMP水平之间的关系。方法:以NG108-15细胞作为体外的细胞模型,分别采用竞争性蛋白结合法及放射免疫法,PDE法,γ-^32P参入法以及RT-PCR测定cAMP水平,钙调蛋白(CaM)活,DPDPE长时程作用NG108-15细胞,cAMP水平升高,形成阿片依赖;细胞CaM活性和CaMKⅡ活性也升高,该升高可CaM拮抗剂W-7所抑制,而CaMKⅡ活性的升高可被CaMK Ⅱ特异性抑罅剂KN-62所抑制。W-7或KN-62可抑制阿片依赖导致的细胞cAMP水平的升高,阿片依赖时,加入纳洛酮诱发戒断,CaM活性CaMKⅡ活性进一步增高,而在阿片依赖时,δ阿片受体的mRNA表达水平无明显变化。结论:Ca^2 /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路可通过调节cAMP水平参与阿片依赖的机制。 相似文献
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血栓素B_2放射免疫分析 总被引:7,自引:0,他引:7
血栓素A_2(TXA_2)是花生四烯酸(AA)的重要代谢产物之一,具有诱导血小板聚集,降低cAMP水平和收缩血管等作用。在37℃下,性质极不稳定,半衰期仅30秒,很快水解为较稳定的代谢产物TXB_2。虽然测定TXA_2和TXB_2分别可用生物测定和薄层层析,质谱分析等法,但用放射免疫分析法(RIA)不仅特 相似文献
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目的研究外源性hPTH(1-34)对新生大鼠成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成的影响。方法新生大鼠成骨细胞原代培养,原子吸收分光光度法测细胞基质钙含量,vonKossa染色鉴定钙化结节。结果10-10~10-7mol·L-1hPTH(1-34)持续作用于细胞,基质钙含量与对照相比显著降低;10-8mol·L-1hPTH(1-34)在以48小时为一循环的前12小时给药循环8次时基质钙含量达最高峰,与对照组相比增加576%,且形成钙化结节最多。结论hPTH(1-34)刺激成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成与给药方式及药物浓度有关,低浓度间歇性给与hPTH(1-34)能提高成骨细胞基质钙及促进钙化结节形成。 相似文献