TRAIL净化自体造血干细胞移植物中白血病细胞的实验研究

目的探讨TRAIL作为自体造血干细胞移植物体外净化剂的可行性。方法常规分离骨髓单个核细胞，分别以PE—DcR1、PE—DcR2荧光染色，荧光显微镜观察观察TRAIL诱骗受体DcR1和DcR2在骨髓单个核细胞的表达及定位。200ng／ml的TRAIL作用骨髓单个核细胞、白血病Jurkat细胞系18h，FITC-Annexin V／PI标记流式细胞仪定量凋亡率，并将经上述处理的骨髓单个核细胞行成纤维细胞集落（CFU—F）培养。将绿色荧光蛋白标记的Jurkat细胞和骨髓单个核细胞混合经200ng／ml TRAIL作用24h，在GM—CSF和EPO作用下行集落培养，第7天计数Jurkat细胞所形成的荧光集落及骨髓单个核细胞所形成的非荧光集落数CFU—GM和BFU—E。结果TRAIL诱骗受体DcR1和DcR2在骨髓单个核细胞均有表达，且主要定位于胞浆和胞膜。200ng／mlTRAIL作用18h，骨髓单个核细胞、Jurkat细胞系凋亡率分别为（5．95±1．23）％、（33．42±2．28）％，2组间差异有统计学意义（P〈0.01）。TRAIL组每4×10^6个骨髓单个核细胞形成CFU—F集落数为235．67±33．56，与对照组249．33±42．72比较差异无统计学意义（P〉0．05）。200ng／mlTRAIL明显抑制Jurkat细胞所形成荧光集落，但基本不影响骨髓单个核细胞CFU—GM和BFU—E的形成。结论TRAIL能选择性地诱导Jurkat细胞凋亡，而对骨髓单个核细胞无明显毒性作用，可用于自体造血干细胞移植物体外净化。     

原发中枢神经系统淋巴瘤与继发中枢神经系统淋巴瘤的临床特征比较

背景 中枢神经系统淋巴瘤(central nervous system lymphoma,CNSL)分为原发中枢神经系统淋巴瘤(primary central nervous system lymphoma,PCNSL)和继发中枢神经系统淋巴瘤(secondary central nervous system lymp...     

口服酮康唑治疗癣病23例

口服酮康唑治疗癣病２３例陈曙光，刘景华（河北保定市２５２医院皮肤科，０７１０００）我们采用酮康唑治疗癣病３７例，疗效满意，现将资料完整的２３例报告如下：一、临床资料：股、体癣１１例，手、足癣８例，甲癣４例。二、治疗方法：全部病例均在门诊治疗，采用酮康...     

疾病预防控制机构组织绩效评估实证研究

近年来,政府行政绩效以及公共财政支出绩效越来越受到关注,人们的探索也同样投入到公共卫生领域^[1].卫生政策制定者开始关注各自卫生系统的绩效,许多国家进行了旨在改善绩效的改革^[2-3].作为卫生系统重要的组成部分,疾病预防控制机构承担大量的公共卫生服务,其绩效评估越来     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对骨髓基质细胞的毒性作用

背景：已证实肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL）能选择性诱导白血病细胞凋亡，并且不影响正常造血干/祖细胞的功能。但TRAIL对作为造血微环境核心的骨髓基质细胞的毒性作用如何，据作者查新检索目前尚未见系统报道。 目的：通过观察TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导效应及其造血支持功能的影响，继而评价TRAIL对骨髓基质细胞的毒性作用。 设计、时间及地点：细胞学体外对照观察，于2006-03/10在解放军沈阳军区总医院中心实验室完成。 材料：血常规、骨髓涂片细胞检查正常的骨髓标本11份，取自解放军沈阳军区总医院血液科。化疗药物柔红霉素为浙江海正药业股份有限公司产品，国药准字H33020925。 方法：Percoll+贴壁法体外分离培养骨髓基质细胞，达80%融合时胰蛋白酶消化扩增，取处于对数生长期的细胞，分为4组，空白对照组不进行任何干预，柔红霉素组加入0.5 μmol/L柔红霉素作用24 h，TRAIL组加入200 μg/L TRAIL作用18 h，联合组加入0.5 μmoL/L柔红霉素作用6 h后再以200 μg/L TRAIL作用18 h。取第2代骨髓基质细胞，60Co射线照射消除内源性造血集落，接种后去除悬浮细胞，TRAIL组以200 μg/L TRAIL作用基质细胞层18 h，按1×105/孔将骨髓单个核细胞接种于基质细胞层，扩增5 d后加入甲基纤维素培养体系，于37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件下培养10 d。 主要观察指标：荧光显微镜观察诱骗受体在骨髓基质细胞的表达及定位，流式细胞仪检测柔红霉素对骨髓基质细胞诱骗受体表达的影响，AnnexinⅤ/PI标记TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导作用及对其造血支持功能的影响。 结果：诱骗受体DcR1和DcR2在骨髓基质细胞中均有表达，主要定位于胞膜及胞浆。0.5 μmol/L柔红霉素作用24 h后，基本不影响诱骗受体DcR1和DcR2的表达水平。与空白对照组细胞凋亡率比较，TRAIL组无明显变化（t=0.973，P > 0.05）；柔红霉素组、联合组均显著升高（t=5.141，P=0.001；t=4.187，P=0.002），此两组间比较差异无显著性意义（t=1.222，P > 0.05）。与空白对照组比较，TRAIL组骨髓单个核细胞数、粒-巨噬集落形成单位均无明显变化（t=1.313，P > 0.05；t=1.172，P > 0.05） 结论：TRAIL的诱骗受体DcR1及DcR2在骨髓基质细胞均有表达，使骨髓基质细胞免于TRAIL的凋亡诱导效应，且TRAIL不增强柔红霉素对骨髓基质细胞的细胞毒性作用。     

单倍型相合小鼠急性移植物抗宿主病模型的建立

目的:建立单倍型相合小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型,探讨移植后继发血细胞减少的原因.方法:将受鼠分为单纯照射(R组)、照射 输注骨髓单个核细胞(B组)、照射 输骨髓单个核细胞 输脾单个核细胞(S组).移植后观察小鼠体重、体位、活性、毛发、腹泻及生存期,检测外周血象及嵌合体,濒死前行肝、小肠、皮肤、脾脏病理检查.结果:S组出现体重降低、弓背、活动度减低、脱毛,病理检查符合aGVHD,并发生继发白细胞及血红蛋白降低,同时检测嵌合体>90%.结论:C57BL/6N→BcF1 9.5 Gy60Co的照射剂量下,输注骨髓单个核细胞1×102,脾单个核细胞3×107、4×107、5×107均可建立aGVHD模型;aGVHD的发生是移植后继发血细胞减少的主要原因.     

冠心病病人的健康生活方式

2005-04／2005-07我们对70例冠心病住院病人开展健康生活方式教育，收到良好效果，现总结报告如下。     

ZO-1基因与白血病相关性的研究及其在K562细胞中高表达意义的探讨

目的 探讨白血病细胞ZO-1基因的表达、甲基化情况及其与白血病发生的相关性.方法 应用基因组限制性酶切扫描(RLGS)技术自白血病小鼠标本中钓取ZO-1基因,用甲基化PCR方法检测自血病细胞系Molt4、HL-60、K562细胞及白血病患者原代白血病细胞及正常人外周血单个核细胞ZO-1基因甲基化水平,用RT-PCR方法检测ZO-1基因表达水平,并对高表达ZO-1基因的K562细胞进行小十扰RNA(siRNA)靶向干扰,然后用Northem blot方法验证ZO-1基因抑制效率,用CCK-8检测细胞增殖情况,膜联蛋白V(Annexin V)和碘化丙锭(PI)舣染色法观察细胞凋亡率及细胞周期.结果 采用RLGS技术从门血病小鼠标本中成功钓取ZO-1基因.原代白血病细胞及Moh4、HL-60细胞ZO-1基因呈高甲基化状态,ZO-1基因表达水平较正常人外周血细胞明显下降或不表达.正常人外周血单个核细胞ZO-1基因不发生甲基化,ZO-1基因高表达.K562细胞高表达ZO-1基因,未见ZO-1基因甲基化;去甲基化药物可以诱导Molt4及HL-60细胞重新表达ZO-1基因.经ZO-1小干扰RNA干预的K562细胞ZO-1基因的表达明显降低,但并不影响细胞的增殖及凋亡.结论 绝大多数急性白血病细胞中ZO-1基因呈高甲基化状态,表达明显降低,ZO-1基因是一个白血病相关基因.其在K562细胞中高表达的意义尚不明确.