七氟醚和异氟醚对肝硬化患者肝切除术后肝功能的影响

目的 比较七氟醚和异氟醚对肝硬化患者行肝切除术后肝功能变化的影响.方法 将40名年龄为40～70岁的肝硬化(Child-Pugh A级),择期行肝癌肝叶切除术的患者随机分为七氟醚组和异氟醚组.两组患者均以咪唑安定0.1mg/kg体重、舒芬太尼0.4μg/kg体重、哌库溴铵1mg/kg体重诱导,分别予七氟醚或异氟醚辅以舒芬太尼维持麻醉.分别于术前、术后1、3、7d抽取非输液侧上肢静脉血测谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶、胆碱酯酶、白蛋白、凝血酶原时间和血小板计数.结果 两组患者血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶较术前明显升高,术后3d达峰,且其增高值在异氟醚组明显高于七氟醚组;术后无患者出现肝衰竭或肝损伤的临床表现.结论 在肝硬化患者的麻醉中,异氟醚对肝功能的影响可能强于七氟醚.     

真核表达载体pIRES2-EGFP-hFasL的构建及鉴定

背景：FasL通过与靶细胞上Fas结合诱导程序性细胞死亡,可维持机体内稳态,诱导同种异基因移植免疫耐受,促进肿瘤细胞凋亡。目的：构建带有增强型绿色荧光蛋白报告基因EGFP及目的基因hFasL的真核表达载体pIRES2-EGFP-hFasL。方法：通过实时聚合酶链反应RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞中扩增出hFasL基因,与真核空载体plRES2-EGFP一起,经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,T4DNA连接酶连接,从而构建pIRES2-EGFP-hFasL。用紫外分光光度计测定质粒浓度及纯度,经酶切、PCR技术、基因测序等方法进行鉴定。结果与结论：扩增出的hFasL条带大小约846bp,构建的plRES2-EGFP-hFasL经酶切后在846bp和2000bp处有特异性条带,DNA测序证实hFasL与Genebank上的序列完全一致。提示成功构建了含有hFasL及EGFP的真核表达载体plRES2-EGFP-hFasL。     

肝癌根治术后早期肺转移临床因素及CXCR7蛋白数学预测模型的研究

目的探讨建立肝癌根治术后早期肺转移临床因素及CXCR7蛋白数学预测模型。方法收集根治性切除279例患者的肝癌组织、癌旁组织标本及14例正常肝组织构建组织芯片,利用免疫组织化学方法检测CXCR7蛋白在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中的表达情况;回顾性分析279例患者的临床资料,以10项相关的临床病理因素及肝癌细胞中CXCR7蛋白表达情况进行单因素分析,筛选相关影响因素,并进行多因素分析及建立术后肺转移的预测模型。结果术后1年肺转移发生率为12.9%(36/279)。单因素分析提示肺转移组和无肺转移组在CXCR7蛋白表达、性别、肿瘤大小、术前AFP、镜下脉管癌栓方面相比较有显著性差异。多因素分析提示术后发生肺转移的独立判断因素为CXCR7蛋白阳性表达、肿瘤大小。结论随着肿瘤直径增大、CXCR7蛋白阳性表达,患者术后早期肺转移可能性较大。本预测数学模型P=Y/(1+Y),Y=EXP(-6.676+肿瘤大小的B值+CXCR7蛋白表达的B值)具有较高的预测准确率。     

人凋亡相关因子配体及人转化生长因子-β1基因共修饰树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的研究

目的 联合人凋亡相关因子配体(hFasL)及人转化生长因子-β1( hTGF-β1)基因共修饰大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞( imDC),提高imDC诱导大鼠同种异体原位肝移植免疫耐受的能力,以延长受鼠生存期.方法 行以DA大鼠为供体、近交系Lewis大鼠为受体的同种异体原位肝移植140例,随机均分为7组:未给移植受鼠注射DC组(对照组)、mDC组、imDC组、空载体组、FasL组、TGF组及共转染组;分别于移植前5d每天给Lewis大鼠腹腔注射mDC、imDC、空载体转染的imDC、hFasL修饰的imDC、hTGF-β1修饰的imDC、hFasL和hTGF-β1共修饰的imDC各2×106个,于肝移植术后3、7、10d各处死4只,观察外周血肝功能变化[丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)],肝脏病理改变,肝脏凋亡,外周血清细胞因子,并进行生存分析.结果 肝脏病理示术后7d,7组差异有统计学意义(P＜0.01),共转染组排斥反应均轻于TGF组和FasL组;10d时,7组差异有统计学意义(P＜0.01),共转染组排斥反应轻于TGF组和FasL组,TGF组轻于FasL组.肝功能示共转染组于7d时就已基本恢复正常,FasL组于7d时有所降低,但10 d时反而升高,ALT及TBIL的浓度均高于共转染组(P＜0.01,P＜0.05);TGF组到10 d时,肝功能已恢复正常,ALT及TBIL的浓度均低于FasL组(P＜0.01,P＜0.05),但与共转染组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).酶联免疫吸附试验(ELISA)检测示,术后7d共转染组和TGF组的血清白细胞介素(IL)-1、IL-10及IL-12与FasL组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);但共转染组和TGF组之间差异无统计学意义(P＞0.05).TUNEL显示FasL组的肝、脾及腹腔淋巴结中淋巴细胞凋亡指数与共转染组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),但多于TGF组,差异均有统计学意义(P＜0.05).FasL组中位生存期20 d与imDC组(23 d)差异无统计学意义(P＞0.05),而TGF组延长受鼠生存时间有限(48 d);只有共转染组出现长期存活的受鼠(＞90 d),均长于FasL组和TGF(P＜0.01,P=0.01).结论 imDC、hFasL或hTGF-β1单基因修饰imDC均未能诱导同种异体大鼠肝移植长期存活;hFasL 和hTGF-β1共转染的imDC诱导同种异体大鼠肝移植免疫耐受的能力显著增强,显著延长同种异体肝移植大鼠的生存期.     

耐受性树突状细胞和调节性T细胞相互作用研究进展

树突状细胞(DCs)是体内最重要的抗原递呈细胞(APC),其最重要的特点就是能够刺激初始型T细胞增殖,是机体免疫系统反应的启动者,在免疫应答过程中起着重要的作用,同时DCs在诱导免疫耐受中起重要作用,是诱导外周免疫耐受的调控点[1].而近年来在免疫学领域的另一研究热点则是对调节性T细胞(Tr)的研究.Tr细胞是外周免疫耐受新的重要作用机制,它可通过细胞接触或者抑制性细胞因子作用于APCs或效应性T细胞,从而发挥调节效应.越来越多的研究结果证实DCs与Tr细胞在人类免疫调节过程中存在着紧密联系.现介绍DCs与Tr在免疫调节中的相互作用的进展.     

pIRES2-EGFP-hIL-10真核表达载体的构建及鉴定

目的构建带有报告基因EGFP的hIL-10真核表达载体。方法通过RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞中扩增出IL-10基因,构建IL—10基因和报告基因EGFP基因真核表达载体pIRES2-EGFP—hIL-10,经PCR、酶切、测序等方法进行鉴定,紫外分光光度计测定质粒浓度及纯度。结果酶切、PCR及测序证实pIRES2-EGFP—hIL-10载体序列正确。结论成功构建真核表达载体pIRES2-EGFP—hIL-10,可为后续器官移植免疫耐受的研究奠定基础。     

快速康复外科在肝癌肝切除围手术期的应用研究

  目的  探讨快速康复外科(fast track surgery, FTS)理念在原发性肝癌肝切除围手术期应用的效果和安全性。   方法  收集福建医科大学附属第一医院115例需行肝切除的原发性肝癌患者, 随机分为FTS治疗组(FTS组)及围手术期采用传统方法治疗组(对照组), 比较两组患者术后肛门开始排气时间、开始下床活动时间、肝功能变化、术后并发症发生率、住院时间和患者总的住院费用等指标。   结果  FTS组患者术后肛门开始排气时间、开始下床活动时间显著早于对照组(P < 0.05), 肝功能恢复更快, 与对照组比较有显著性差异(P < 0.05), 术后并发症发生率、住院时间与对照组比较显著降低(P < 0.05), 总的住院费用与对照组相比减少, 但两组间无显著性差异(P > 0.05)。   结论  运用FTS理念在肝癌肝切除的围手术期治疗是安全、有效的, 术后并发症的发生率更低, 患者恢复更快, 同时可减少总的住院费用, 值得临床推广。      

肝切除时肝血流阻断方法选择

肝肿瘤的治疗目前仍遵循以手术切除（包括肝移植）为主的原则，近年来随着肝脏外科技术的发展，肝切除术的术式出现多样化，每种术式各有特点，有特定的适用对象。如何针对患者的个体情况选择合理的术式已经成为讨论的焦点问题之一，亦是在临床工作中术者常要思考和决定的问题之一，其主要目的是降低手术风险，减少手术并发症，而术式的选择应以患者病情特点和术者技术条件及经验相结合，遵循“安全、有效、简便”的原则。     

脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1在肝细胞癌中的表达及其意义

肝癌(HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,其癌变是一个多步骤的渐进过程.脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE)1,可修复损伤的DNA.APE1又名氧化还原因子1(Ref-1),可调节许多转录因子的DNA结合活性.我们采用免疫组织化学及原位杂交方法检测APE1在HCC中的表达情况,旨在探讨APE1基因表达在HCC的发生及恶性转化中的作用与地位.     

原位肝移植术后的彩色多普勒超声监测

目的:初步探讨彩色多普勒超声在肝移植术后监测中的应用价值。方法:应用彩色多普勒超声观察2例原住肝移植术后患者肝实质、肝内管系的情况,并进行相应的血流参数测量。结果:各项监测指标随着时间的推移而逐步变化,可为临床实施治疗方案提供帮助。结论:彩色多普勒超声是肝移植患者术后监测的首选影像学方法。