精氨酸联合谷氨酰胺的肠外营养对胃癌术后病人的作用

目的:评价应用精氨酸(Arg)联合谷氨酰胺(Gln)的肠外营养(PN)对胃癌病人术后营养状况、免疫功能和应激状态的影响.方法:将80例胃癌病人随机分为Arg组、Gln组、Arg Gln组及常规PN组(Rou组),每组20例.术后给予添加不同免疫营养素的PN 1周,观察各组的营养状况、免疫功能和应激状态的变化.结果:术后第8天时,Arg组、Gln组和Arg Gln组均比Rou组更能维持胃癌术后病人的营养状态,差异均有显著性意义(P＜0.05);Arg组、Gln组和Arg Gln组均比Rou组更能改善胃癌病人术后的免疫功能,差异均有显著性意义(P＜0.05),其中Arg Gln组与Rou组相比,差异有极显著性意义(P＜0.01);Arg组、Gln组和Arg Gln组与Rou组比更能抑制胃癌病人术后的应激反应,差异均有显著性意义(P＜0.05),其中C反应蛋白Arg Gln组比Rou组差异有极显著性意义(P＜0.01).结论:Arg联合Gln的PN比单用Arg或Gln的PN对增强胃癌根治术后病人细胞免疫功能、抑制其应激反应更为明显.     

携带反义甲胎蛋白增强子/单纯疱疹病毒胸苷激酶基因的产病毒细胞系的建立及对肝癌细胞的靶向杀伤效应

目的建立对肝癌细胞具有靶向调控的高感染性和高分泌性产病毒细胞系。方法将重组反义甲胎蛋白增强子/单纯疱疹病毒胸苷激酶基因逆转录病毒载体(pL/TK/AFE/SN)转染至PA317包装细胞,经G418(400mg/L)筛选、病毒滴度测定。以病毒上清感染培养的Hep3B肝癌细胞和Hela宫颈癌细胞,并抽提细胞基因组DNA作Southernblot分析;观察GCV(100mg/L)对细胞生长的影响。结果转染pL/TK/AFE/SN的PA317细胞经G418筛选2周获阳性克隆;病毒滴度为5.4×104～3.8×105CFU/ml。Southern杂交证实前病毒已完整整合于PA317细胞,并稳定整合于Hep3B肝癌细胞和Hela宫颈癌细胞中。导入AFE/TK基因的Hep3B肝癌细胞经GCV作用后的存活率在2、4、6d时分别降低35%、87%、95%,生长明显受抑制(F=7.23,P<0.01)。结论携带AFE/TK基因的产病毒细胞系能够成功地将AFE/TK基因转移到感染细胞中。     

射频毁损后肝脏病理形态变化的动态观察

目的 动态观察射频毁损后不同时间段正常兔肝组织的超声声像图及病理形态改变，探讨射频毁损后超声声像图特征性改变的病理形态学基础。方法 对25只白兔分别于射频毁损后即刻、1、2、3、4周进行毁损区超声声像图、大体标本及病理形态观察。结果 射频毁损区不同时间段的超声声像图各具特征性改变。它们是因肝组织受射频波作用后发生不可逆转的凝固性坏死、汽化及继发性纤维性包裹、液化和钙化等病理变化所致。结论 肝组织经射频毁损后的超声声像图是毁损后病理改变的反映，也是射频治疗效应的可靠依据。     

APE1在肝细胞癌组织芯片的表达及临床病理意义

目的 探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)基因在原发性肝细胞癌(HCC)的表达及其与临床病理变化的关系.方法 应用免疫组织化学方法,检测包含HCC及转移灶、癌旁肝硬化组织、癌旁慢性肝炎组织和正常肝组织的组织芯片中APE1的表达情况,结合临床病理资料进行统计分析.结果 APE1在癌旁肝硬化组织、癌旁慢性肝炎组织和正常肝组织以细胞核表达为主,在HCC和转移灶组织以细胞质细胞核联合表达为主(P＜0.01).细胞质与细胞核染色强度均与HCC分级和转移密切相关(P＜0.01),细胞质染色强度还与肿瘤包膜有无浸润有关(P＜0.01).结论 APE1蛋白表达与HCC恶性表型有关,APE1蛋白过表达及细胞质表达的出现可能成为HCC预后不良的指标之一.     

利用组织芯片研究COX-2和mPGES-1在肝细胞癌中的表达及意义

目的：检测COX-2和mPGES-1在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达,探讨其在HCC发生、发展中的意义.方法：构建含HCC、癌旁肝硬化、癌旁慢性肝炎及正常肝组织的组织芯片,应用免疫组化和图像分析技术检测COX-2和mPGES-1蛋白的相对表达量,进行半定量分析.结果：COX-2和mPGES-1在HCC中表达均高于正常肝组织（P＜0.01）,随着病理学分级的升高,COX-2相对表达量明显下降（P＜0.01）,但mPGES-1表达量逐渐增高,包膜侵犯组中mPGES-1表达量高于包膜无侵犯组（P＜0.01）,转移组高于无转移组（P＜0.01）.在HCC组织中,COX-2与mPGES-1的表达无明显相关（r=-0.13,P＞0.05）.结论：COX-2和mPGES-1与HCC的发生密切相关,mPGES-1可能在HCC进展期发挥重要作用,选择性抑制mPGES-1有可能成为治疗HCC新的靶点.     

原发性肝癌多药耐药基因的表达及其意义

目的 探讨５种多药耐药（ＭＤＲ）基因肝癌组织中的表达,建立ＭＤＲ的基因诊断标准。方法 用逆转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,流式细胞术检测肝癌组织中５种ＭＤＲ基因ｍＲＮＡ和蛋白质的表达,用四氮唑蓝快速比色（ＭＴＴ）法检测抗癌药物对肝癌原代细胞的ＩＣ５０值。结果 肝癌耐药涉及ｍｄｒ１,ＭＲＰ,ＬＲＰ,ＧＳＴｐ１和ＴｏｐｏⅡα基因,ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ≥０．５、ＭＲＰｍＲＮＡ≥０．６、ＬＲＰ ｍｒｎＡ     

DPC4基因在胃癌中的丢失突变研究

我们应用聚合酶链反应 简单重复序列长度多态性 (ＰＣＲ ＳＳＬＰ)和聚合酶链反应 单链构象多态性 (ＰＣＲ ＳＳＣＰ)等方法 ,对 30例胃癌ＤＰＣ4基因的杂合性丢失和突变状况进行研究 ,探讨该基因在胃癌发生中的作用。一、材料与方法1.标本 :胃癌组织和对应的正常胃粘膜组织各 30例 ,取自我院外科 1996年 7月～ 1997年 12月间手术标本。在标本离体 2 0ｍｉｎ内 ,经液氮速冻 ,再转至 - 75℃深低温冰箱中贮存。以上标本都经病理检查证实。2 .ＤＮＡ提取 :每例标本取 2ｍｍ×2ｍｍ× 3ｍｍ大小 ,用蛋白酶Ｋ 酚 氯仿方法提取ＤＮＡ。若为胃癌…     

反义寡脱氧核苷酸逆转人肝癌多药耐药性的实验研究

目的：探讨坂义寡脱氧核苷酸（ASPODNs)对人肝癌多药耐药基因（MDR）的逆转作用,方法：ASPONs作用于肝癌MDR细胞模型后,用MTT法检测其逆转作用,用逆转录PCR和流式细胞术检测其对4种MDR基因表达的影响,结果：ASPODNs抑制DR基因的表达存在时间－效应和剂量－效应关系,对单基因MDR细胞药性的逆转率为90．26％－100％,对多重MDR细胞耐药性逆转率70．09％－100％,结论：多种ASPODNs联合逆转多重MDR具有可行性并取得明显效果。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的作用

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植在大鼠肝纤维化形成过程中的作用。方法应用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化雄性SD大鼠MSCs，分别在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型的第1天、第6周、第8周以5×10^6的剂量经尾静脉注入同种雌性大鼠体内。各组大鼠均在MSCs移植4周后，评价干预组与对照组的生存状态，并用Scheuer炎症活动度评分法和SchmidM纤维化评分法评价肝脏病理情况。结果第1天移植MSCs，干预组12只大鼠中有6只肝脏炎症活动度评分≤1分，对照组11只中仅有1只，两组Scheuer评分均值分别为1．50和2．55（t=2．894，P=0．009）；SchmidM评分均值分别为0．75和0．82（t=0．217，P=0．83）。第6周移植MSCs，干预组和对照组在炎症活动度方面无明显差异，Scheuer评分均值分别为3．58和3．73（P=0．559）；在纤维化方面，干预组12只大鼠中有3只≥6分，对照组11只中则有7只≥6分，SchmidM评分均值分别为4．75和5．54（t=2．424，P=0．024）；干预组与对照组的腹水发生率分别为25％和45．4％（t=2．241，P=0．036）。第8周移植MSCs，干预组与对照组炎症活动、纤维化程度及腹水发生率均无明显差异，Scheuer评分的均值分别为3．64和3．92（P=0．113）；SchmidM评分均值分别为5．27和5．67（t=1．207，P=0．241）；腹水发生率分别为18．2％和25％（t=0．703，P=0．490）。值得注意的是，对照组有5／12出现异形细胞，而干预组未见一例。结论早期移植MSCs可减轻四氧化碳引起的肝脏炎症，改善大鼠的肝纤维化程度，但对肝硬化无作用，MSCs移植可以减少肝硬化大鼠异形细胞发生的现象值得进一步探讨。     

五种多药耐药性基因在正常人体组织的表达

目的：观察五种多药耐药性（MDR）基因在正常人体组织中的表达。方法：采用二重RT-PCR法及免疫组织化学SP法，分别从mRNA和蛋白质表达水平检测（90例，共15种）正常人体组织中5种MDR基因的表达。结果：五种MDR基因在人体不同器官和组织中均有表达。同时表达5种MDR基因的器官和组织有肝脏、肺脏、肾脏、食管、结肠、小肠、胰腺、甲状腺、前列腺及胎盘。皮肤组织中未发现LRP基因表达（0/5）。乳腺和卵巢组织未发现MRP基因表达（0/5）。不同MDR基因在各种组织中的表达存在差别。结论：正常情况下，五种MDR基因的mRNA和蛋白质在人体组织中广泛表达，以在肝脏、肺脏、肾脏、结肠、小肠和胰腺组织中表达较强。