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目的构建结核分枝杆菌分泌蛋白MPT 64的重组质粒,并在大肠杆菌中表达及纯化和复性重组蛋白。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出mpt 64基因片段,插入PKRX-T载体中,再亚克降到表达载体PET30a中,在大肠杆菌中表达;应用组氨酸标签(His-Tag)纯化重组蛋白;在PBS中通过半透膜恢复重组蛋白的天然结构。结果构建了含MPT 64重组质粒的大肠杆菌工程菌,并以包涵体形式表达重组蛋白MPT 64,其占细胞总蛋白的20%~30%;重组蛋白变性后经镍柱纯化,其纯度达90%以上;通过半透膜完全恢复重组蛋白的天然结构。结论具有天然结构和高纯度的重组融合蛋白有可能成为有效的结核病血清学诊断的候选抗原。 相似文献
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[目的]探讨乙型肝炎病毒表面抗原定位整合(p21HBsAg/HbsAg)转基因小鼠肝癌发生过程中PCNA的表达及意义。[方法]分别选取2,6,12,18,24月龄的SPF级转基因小鼠,取肝脏及肝脏肿瘤组织,进行免疫组织化学S-P法染色。[结果]①阳性肝细胞核内可见棕黄色反应颗粒;②2,6月龄转基因小鼠肝脏有少量散在分布的肝细胞呈PCNA阳性表达,阳性率分别为2.5%,3%;12月龄转基因小鼠肝脏PCNA阳性表达主要出现在非典型增生的肝细胞,阳性率23.65%;18月龄转基因小鼠发生的肝细胞癌PCNA阳性率61.68%;24月龄的转基因小鼠发生的肝细胞癌PCNA阳性率63.56%。12月龄转基因小鼠PCNA阳性率高于2,6月龄转基因小鼠(p<0.01),18月龄和24月龄的转基因小鼠PCNA阳性率高于12月龄转基因小鼠(p<0.05)。[结论]①PCNA能准确反映乙型肝炎病毒表面抗原定位整合转基因小鼠肝细胞的增殖能力,PCNA与肝细胞癌的发生、发展密切相关;②非典型增生的肝细胞有较高的PCNA阳性表达,是一群具有肿瘤增殖潜能的癌前细胞群。 相似文献
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实验动物是冠状病毒的重要自然宿主,具有较高的感染率。它可以引起小鼠的病毒性肝炎(MHV),大鼠冠状病毒病(RCV)感染,大鼠涎泪腺炎,猫传染性腹膜炎,还能引起犬和兔的感染。因此,调查目前实验动物的冠状病毒感染情况,对探究SARS病的起源和开展SARS病的防治以及模型研究是十分必要的。1 材料和方法11 大小鼠血清的采集 用摘眼球采血方法对各有关单位的实验大、小鼠进行采血,分离血清并置-20℃以下冰箱保存待检。12 MHV和RCV抗体ELISA检测试剂盒 购自中国药品生物制品鉴定所,该试剂盒由抗原包被板、稀释液、阴性血清对照、阳性血… 相似文献
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刘蓉华刘忠华 《中国CT和MRI杂志》2022,(7):126-128
目的探讨受试者工作特征曲线(ROC)评价MIR-T_(2)WI信号强度比值(SIR)、信号值(SI)、表观扩散系数(ADC)对高强度聚焦超声(HIFU)治疗子宫肌瘤效果的评估价值。方法对我院收治的65例子宫肌瘤患者(子宫肌瘤91个)HIFU治疗前和治疗1周后行MRI平扫和增强扫描,测量MIR-T_(2)WISIR、SI、ADC,应用ROC曲线评价三项参数对超声消融疗效的预测价值。结果不同类.型肌瘤的超声消融率比较,差异无统计学意义(P>005);低信号组超声消融.率显著高于混杂信号组、等信号组、高信号组(P<005),混杂信号组、等信号组、高.信号组超声消融率比较,差异无统计学意义(P>005.);T_(2).WISIR<1的肌瘤超声消融率显著高于≥15(P<005),.T_(2)WI SI<200.的肌瘤超声消融率显著高于≥200(P<005),ADC.<14×10;mm;/s的.肌瘤超声消融率显著高于≥14×10;mm;/s(P<005);MRI-T_(2)WISIR、SI、ADC预测.肌瘤超声.消融率的曲线下面积(AUC)分别为774、0904、0794,T_(2)WISI的.预测效能较.高,灵敏.度、特异度、准确率分别为8182%、8611%、8352%。结论MIR-T_(2)WISIR、SI、ADC可用于子宫肌瘤HIFU消融效果的评估,T_(2)WI低信号和低SI、ADC值的肌瘤超声消融率较高。 相似文献
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目的:对尿液干化学法与尿沉渣镜检两种方法进行比较。方法:尿干化学分析仪使用Ur/test-150尿液分析仪,尿沉渣镜检使用OLYMPUS—CX31显微镜和80—2台式离心机,检测1845份尿液标本,对尿液红、白细胞的检测结果进行比较分析。结果在1845份标本中,将红、白细胞两项用两种不同的检测方法进行对比。结果:对比显示,白细胞:干化学法阳性人数为187例,阳性率为10.1%,镜检法阳性人数为262例,阳性率为14.2%。红细胞:于化学法阳性人数为223例,阳性率为12.1%,镜检法阳性人数为122例,阳性率为6.6%。结论:两种方法检测尿液结果有一定的差异,由于许多其他因素的干扰,故应将两种方法结合起来以提高检出率。 相似文献
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目的探讨呼吸道吸入法接种恒河猴感染H5N1流感病毒方法的可行性。方法利用1株鹅源性H5N1流感病毒经环甲膜穿刺接种恒河猴,通过观察恒河猴在接种后短期内各项指标的变化来评价呼吸道吸入法接种恒河猴感染H5N1流感病毒的可行性。结果恒河猴接种H5N1流感病毒后出现了典型的临床症状和病理学变化,与人和动物感染后的主要症状相似,是很好的模型动物。结论环甲膜穿刺接种恒河猴感染H5N1流感病毒具有很高的可行性,是恒河猴感染H5N1流感病毒和造模的良好途径,并为其它通过呼吸道感染的病原的造模和研究工作提供参考。 相似文献