组织型转谷氨酰胺酶对乳腺癌侵袭转移作用的研究

目的 探讨组织型转谷氨酰胺酶(transglutaminase type 2,tissue transglutaminase,TG2或tTG)对人乳腺癌细胞的侵袭转移能力作用及可能的机制.方法 构建TGM2的特异性慢病毒干扰载体(TGM2-RNAi-LV),稳定转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞,实验设TGM2干扰组(RNAi)、空白组(Con)和阴性对照组(NC).实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞TGM2 mRNA表达.细胞侵袭迁移实验(Transwell)检测细胞侵袭迁徙能力改变.蛋白质印迹检测MDA-MB-231细胞TG2、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein 9,MMP 9)和波形蛋白(Vimentin)的表达.选择2012 05-10-2014-07-29广西医科大学第一附属医院(46例)和江西省肿瘤医院(35例)病理确诊的81例乳腺浸润性导管癌患者,采用免疫组化检测TG2表达水平,分析其与淋巴结转移关系.结果 RT-PCR检测结果显示,Con组TGM2mRNA表达量为1,RNAi组TGM2 mRNA表达量为0.21±0.03,明显低于Con组的1,z＝-2.087,P＝0.036 9;明显低于NC组的0.94±0.05,z=-1.964,P=0.049 5.细胞侵袭实验显示,侵袭到滤膜下的细胞数RNAi组为42.33±4.04,低于Con组的93.50±7.42和NC组的87.25±5.74,z值均为-2.121,P值均为0.033 9.迁移到滤膜下的细胞数RNAi组为66.13±4.59,低于Con组116.75±7.82和NC组109.00±7.79(z值均为-2.309,P值均为0.020 9).蛋白质印迹检测结果显示,RNAi组、NC组和Con组TG2蛋白相对表达量分别为0.34±0.06、0.87±0.10和0.95±0.03,F=66.55,P＜0.001.RNAi组Vimentin相对表达量(0.45±0.05)低于NC组(0.89±0.07)和Con组(0.90±0.03)的相对表达量,F=80.56,P＜0.001.RNAi组、NC组和Con组MMP-9蛋白相对表达量分别为0.09±0.02、0.18±0.03和0.19±0.04,F=12.89,P=0.007.TG2表达水平与年龄、肿瘤分化程度和月经状态无显著相关性,P值均＞0.05;而与淋巴结转移(x2=14.750,P＜0.001)、ER表达水平(x2=11.632,P=0.001)和TNM分期(x2 =13.506,P＜0.001)相关.Spearman相关分析显示,TG2与Vimentin(r=0.337,P=0.002)和MMP-9(r=0.358,P=0.001)表达水平呈正相关.结论 TG2可能具有促进乳腺癌的侵袭转移作用,下调TG2表达水平可能是治疗肿瘤转移的新靶点.     

肺血栓栓塞症误诊为冠心病21例原因分析

目的探讨肺栓塞(pulmonary embolism,PE)误诊为冠心病的原因,并提出防范措施。方法对我院2005年7月—2013年7月收治的误诊为冠心病的肺血栓栓塞症(pulmonary thromboembolism,PTE)21例的临床资料进行回顾性分析。结果本组占同期收治PTE 25.3%。误诊为心绞痛11例、心肌梗死7例、缺血性心肌病3例。误诊时间3~15 h。按误诊疾病治疗无效或效果不佳,后结合临床表现,血浆D-二聚体测定、血气分析及螺旋CT肺动脉造影检查等综合分析后确诊PTE,予相应治疗,20例症状明显改善后出院,1例死亡,平均住院(32.1±9.6)d。结论提高对PE的认识、发散诊断思维、重视鉴别诊断及全面系统分析病情,可降低PE的早期误诊率。     

基于随机扩增多态性DNA分析的霍乱弧菌分子分型方法的建立

目的建立基于随机扩增多态性DNA分析（Randomly amplified polymorphic DNA,RAPD）的霍乱弧菌简便快速分子分型方法。方法选择16株霍乱弧菌代表性菌株,包括O₁群、O₁₃₉群和非O₁/非O₁₃₉群等血清群,通过40条随机引物的RAPD-PCR实验,筛选出理想的随机引物,要求其产生的DNA指纹图谱多态性高,并有足够的分辨力进行分子分型。结果通过一系列RAPD-PCR实验和统计学聚类分析,从40条随机引物中筛选出2条最符合要求的引物。16株霍乱弧菌的分析结果显示,2条引物对于O₁群和O₁₃₉群产毒株、O₁群非产毒株和非O₁/非O₁₃₉群均有很好的聚类分辨率。结论本研究筛选获得了2条随机引物并建立了基于RAPD的分子分型方法,该方法简便、省时、省力,适用于地方疾控部门和口岸检疫部门的基层实验室开展霍乱监测和流行病学溯源工作。     

北京市燕山地区1978—1989年人口出生缺陷动态分析

人口素质问题关系着民族的兴衰和生产力的发展,人口出生缺陷直接影响着人口的素质。为此,我们对燕山地区人口出生缺陷状况进行了12年的动态观察,结果分析如下。燕山地区12年共出生人口13993人,其中出生缺陷者为130人,平均出生缺陷率为9.29‰,最高为     

自配AXSYM全自动免疫分析仪S0lution 3、S0lution 4试剂与原装试剂的比较分析

目的为解决美国雅培AXSYM免疫分析仪Solution 3、Solution 4试剂国产化问题,采用自配试剂以代替原装试剂.方法将自配试剂的理化性质、精密度、准确度与原装试剂进行对比分析.结果自配试剂与原装试剂理化性质一致,采用ME-lA法、FPIA法、ICAI法分别测定AFP、T4、Folate质控液10次,其CV值均小于5%,与原装试剂对比,两者无显著性差异(P＞0.05).结论自配美国雅培AXSYM免疫分析仪Solution 3、Solution 4试剂完全可以代替原装进口试剂.     

气相色谱法测定空气中三氯乙烯

随着城市干洗业的迅速发展,干洗剂的用量在不断增加,而作为干洗剂主要成分之一的三氯乙烯对人体有一定的毒性作用,慢性中毒可引起功能性中枢神经系统抑制,并对肝、肾、心脏和皮肤有毒性作用,严重急性中毒者可致死[1-4]。因此,必须对干洗场所的空气进行监测,保护从业人员的身体健康。目前使用的《车间空气监测检验方法》中,三氯乙烯的测定用的是吡啶-碱比色法[5]。而在一些报道中采用气相色谱法测定,但用的都是聚乙二醇6000柱分离[6-7]。本文则采用活性炭管吸收样品空气,用二硫化碳解吸后,经甲基硅橡胶柱分离,氢火焰离子化检测器检测。方法快速简便,精密度高,准确度好,测定浓度范围广。     

如何做好血液标本ELISA试验

ELISA是酶联免疫吸附测定的总称，是继荧光免疫和放射免疫技术之后发展的一种免疫技术。它是将抗原或抗体结合到固相载体表面，将抗原或抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合，洗涤多余的游离反应物，保证试验结果的特异性与稳定性。根据检测的对象和要求不同，ELISA试验又分为：双抗体夹心法，双位点一步法，间接法，竞争法，捕获法以及应用亲和素和生物素的ELISA法等。     

流式细胞仪不同标记技术对检测T细胞亚群的影响

目的探讨单、双、三标记标本对T细胞亚群测定的影响。方法采用流式细胞仪对正常人外周血T细胞亚群进行测定。结果单标记与双标记及三标记的测定结果均有显著性差异 (P<0.05)。结论检测T细胞亚群应采用双标记或三标记技术     

临床医疗专业选修口腔科诊治技能的尝试

口腔科诊疗技能在部队师团级医疗单位及地方区镇级医疗单位存在相对不足,为了解决这一问题,我们在临床医疗专业选择一些学习基础较好,本人愿意选修的学员进行口腔科技能学习。即在学习医疗系口腔学的基础上,利用课余时间参加口腔科门诊值班、口腔科实验室练习及跟班实习。使学员能在两年的基础临床课教学期间较熟练掌握牙体病、一般拔牙术,基本掌握活动义齿制做及固定义齿的设计,基牙预备及戴牙等技能。能初步独立完成口腔科门诊的工作。我们的做法是: