干细胞在皮肤组织工程中的应用

目前还没有一种理想的组织工程皮肤能满足临床严重皮肤缺损患者的需求,其重要原因之一是无合适的种子细胞来源。干细胞在皮肤组织工程中的应用已取得了很大进展,但仍存在一些问题需要解决。基于此,文章重点介绍了胚胎干细胞、表皮干细胞和间充质干细胞等有代表性的干细胞的分离、培养以及在皮肤组织工程中的应用现状,并提出了存在的问题和下一步的研究方向,以期研制出更理想的组织工程皮肤替代物。     

兔耳实验性瘢痕模型的建立及实验方法

增生性瘢痕的治疗研究进展受动物模型难以复制的限制。我们参照最近国外有关文献［１］,建立了一种简便易行的免耳瘢痕模型并观察了去炎松对其作用的疗效。１资料与方法新西兰大白兔,由江西省医学实验动物中心提供,雌雄不拘,体重２～３ｋｇ,氯胺酮肌注使兔麻醉后,在其双耳腹前侧分别作两个正方形切口,边长１ｃｍ,完整切除全层皮肤,并用灼热铁丝烧灼创缘四周皮肤,创面以“邦迪”牌创可贴贴敷。操作完毕动物自然清醒,分笼饲养,观察瘢痕形成情况。３～４周后选择经病理切片证实的瘢痕创面随机分组,实验组将进口去炎松粉配成４０ｍｇ／ｍｌ的混…     

骨髓间充质干细胞复合脱细胞血管基质构建组织工程血管的初步研究

目的：探讨骨髓间充质干细胞复合脱细胞血管基质构建组织工程血管的可行性。方法：采用胰蛋白酶、乙二胺四乙酸和曲拉通X-100对兔主动脉进行脱细胞处理，制备成脱细胞血管基质；体外分离和扩增人骨髓间充质千细胞，并将其作为种子细胞种植于脱细胞血管基质上，复合构建组织工程化人工血管。结果：制备的脱细胞血管基质由胶原、弹力纤维等组成，未见细胞成分残留；体外扩增的人骨髓间充质干细胞种植于脱细胞血管基质上可生长增殖。结论：骨髓间充质干细胞与脱细胞血管基质支架材料复合可成功构建组织工程血管，有望为血管缺损的修复提供一种全新的技术方法和手段。     

磨痂术治疗头面部深Ⅱ度烧伤

报告磨痂术治疗头面部深Ⅱ度烧伤32例。结果：显效率达90．6％，平均住院天数14d。提示：磨痂术具有操作简单、磨痂深度易于掌握、出血少、美容和功能恢复满意等优点，是一种较理想的头面部深Ⅱ度烧伤治疗方法。     

组织工程化人工皮肤的构建与应用

目的 探讨组织工程化人工皮肤的构建与应用。方法 无血清培养人原代表内细胞，接种于经桂枝汤浸泡的异种真皮，进行复合移植。结果 人原代表皮细胞在无血清培养下生长增殖较好；桂枝汤浸泡的异种真皮存时间明显延长；复合移植于烧伤创面上皮片获成活。结论 人表皮细胞和经桂枝汤浸泡的异种真皮复合移植可作为一种新的皮肤代用品。     

粉防己碱对瘢痕成纤维细胞DNA和胶原合成的影响

目的探讨粉防己碱对瘢痕成纤维细胞DNA和胶原合成的影响.方法以体外培养的人瘢痕成纤维细胞为实验模型,将粉防己碱(5～80mg/L)加入细胞培养液中进行干预并与对照组比较,用3H-TdR掺入法和3H-脯氨酸掺入法分别测定各组瘢痕成纤维细胞3H-TdR掺入值与3H-脯氨酸掺入值,以反映其DNA和胶原合成水平的变化.结果粉防己碱预处理浓度由5mg/L升至80mg/L时(1)瘢痕成纤维细胞3H-TdR掺入值(min-1)由对照组的1740±165分别降至1162±226、412±82,抑制率达76.32%,组间差异有非常显著意义(P＜0.01);(2)瘢痕成纤维细胞3H-脯氨酸掺入值(min-1)由对照组的1126±193分别降至535±141、341±89,抑制率达69.71%,组间差异有非常显著意义(P＜0.01).结论粉防己碱对体外培养的瘢痕成纤维细胞DNA和胶原合成具有抑制作用,呈剂量依赖关系,具有防治增生性瘢痕的应用前景.     

羊膜覆盖治疗烧伤创面的临床观察

及时有效地封闭烧伤创面、提高创面修复质量，是烧伤治疗的重要环节。笔者自2005年9月至2006年9月，对我科门诊患者Ⅱ度烧伤创面采用羊膜覆盖治疗，取得了较满意的疗效。     

不同发育阶段胎儿表皮干细胞差异表达基因的研究

目的采用基因芯片技术筛选早期胎儿与晚期胎儿表皮干细胞差异表达基因,分析不同发育阶段胎儿表皮干细胞基因表达变化特征及其可能的生物学意义,为进一步寻找表皮干细胞特异性发育调控基因提供新线索。方法收集胎龄8～12周人胎儿正常皮肤(早期胎儿组)及28～32周人胎儿正常皮肤(晚期胎儿组),采用胰蛋白酶和EDTA联合消化法分离表皮,Ⅳ型胶原快速黏附法分离、纯化人表皮干细胞,分别提取各组细胞总RNA,用基因芯片技术检测2组胎儿表皮干细胞基因表达并筛选差异表达基因。结果基因芯片高通量地揭示了早期胎儿组与晚期胎儿组表皮干细胞的遗传信息。晚期胎儿组与早期胎儿组相比,DNA复制均与表皮干细胞的发育进程密切相关。差异表达基因有805个,其中表达下调的基因有389个,主要是GTP结合蛋白基因、序列特异性DNA结合蛋白基因、MAKP活性蛋白基因等与细胞增殖分化相关基因;表达上调的基因有416个,主要是与细胞成熟相关的细胞骨架结构蛋白基因等。结论体外培养的早期胎儿与晚期胎儿表皮干细胞基因表达谱有明显的不同,其差异可能与不同发育阶段人表皮干细胞的增殖分化能力及皮肤创伤修复能力不同密切相关。     

β-catenin信号分子的生物学功能及其在创伤修复中的研究进展

β-catenin是E-cadherin/catenin复合体及Wnt信号通路的重要分子。近年来,许多研究都证实经典Wnt通路与皮肤创面修复密切相关。本文对β-catenin的结构、生物学功能及其在皮肤创伤修复中的作用研究进展进行简要综述,为进一步认识β-catenin的作用机制和以β-catenin为靶点的临床研究和治疗奠定理论基础。     

小肠黏膜下层无细胞基质作为阴道平滑肌细胞载体的可行性

背景:目前国内外用于阴道组织工程研究的主要支架材料聚乙醇酸存在降解过快等缺陷.天然脱细胞支架材料尤其是小肠黏膜下层逐渐成为组织工程研究的重点.目的:探索用猪小肠黏膜下层基质作为组织工程学阴道细胞载体的可行性.方法:取新西兰雌兔,分离出阴道平滑肌组织块,组织块+酶消化法原代培养阴道平滑肌细胞.体外培养传代后作为种子细胞接种于自制猪小肠黏膜下层基质体外联合培养,倒置显微镜动态观察细胞形态及生长增殖情况,分别于1,2,3,4周时取标本,行组织学检查.结果与结论:①体外成功培养出阴道平滑肌细胞,倒置显微镜下,见培养的阴道平滑肌细胞呈现长梭状,细胞集结于培养皿上形成典型的"峰和谷"样构型.②黏膜下层无细胞基质外观呈白色,半透明,有一定韧性.苏木精-伊红染色未见细胞成分存在.③阴道平滑肌细胞-肠黏膜下层标本切片苏木精-伊红染色后,光镜下可见细胞成分逐渐增多,由表浅向深层部位生长.④阴道平滑肌细胞-肠黏膜下层标本切片采用抗兔平滑肌α-肌动蛋白单克隆抗体免疫组化染色后,均可见抗兔α-Actin的阳性细胞.结果初步证明了猪小肠黏膜下层基质可作为一种平滑肌细胞载体.