坚固专业思想,深化检验医学教学改革

随着人类医学的飞速发展,如何培养高素质的检验医学复合型人才成为新课题.为了适应新时期医学发展及教学改革的需要,探索医学院校检验专业教学新模式,在对医学检验专业本科学员专业思想以及专业授课情况调查分析的基础上,探索课堂教学的基本规律,大力开展教学改革,提高实验课质量、加强专业理论课与临床实际的联系,不断提高教学质量.     

N-糖基化IL-24的表达及体外诱导肿瘤细胞凋亡的研究

目的构建IL-24基因的真核表达载体,在毕赤酵母GS115中高效表达,研究重组N-糖基化IL-24蛋白体外诱导肿瘤细胞凋亡的活性。方法借助过渡质粒α/pUC18,将IL-24基因插入到质粒pPIC9K的BamHⅠ和EcoRⅠ之间,构建重组质粒IL-24/pPIC9K,转化毕赤酵母GS115分泌表达,Tricine-SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白,ELISA检测蛋白表达量,糖苷酶PNGaseF分析IL-24糖基化形式和程度。MTT法和形态学分析重组IL-24诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡的活性。结果成功构建重组表达质粒IL-24/pPIC9K,IL-24在毕赤酵母最高表达量为(81.31±14.46)mg·L-1。约70%的IL-24发生了N-糖基化。重组IL-24诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,对正常人肺成纤维细胞NHLF没有影响。N-糖基化IL-24对MCF-7抑制率约高于去糖基化IL-24。结论毕赤酵母分泌形式的表达和适度的糖基化修饰都有利于目的蛋白IL-24的生物学活性,为后续的研究提供基础。     

儿童屋尘螨变应原皮下特异性免疫疗法的不良反应分析

变应原特异性免疫治疗（SIT）是唯一针对过敏性疾病病因的治疗方法，但是变应原注射过程中可能发生不良反应，严重者可能出现致死性的不良反应。本院自2011年7月成立脱敏中心开展变应原皮下特异性免疫疗法（SCIT）治疗，至2012年12月已经有32例患儿接受脱敏治疗，现对32例病例资料作回顾性分析，将SCIT过程中发生的局部及全身不良反应的治疗预防措施进行总结与分析，旨在为今后SCIT治疗实践时避免不良反应提供参考。     

脑干听觉诱发电位测定在新生儿高胆红素血症中的应用

作者检测了36例正常足月新生儿以及36例高胆红素血症足月新生儿的脑干听觉诱发电位（BAEP）。结果发现胆红素脑损伤主要表现为Ⅰ、Ⅴ波潜伏期延长，Ⅲ～Ⅴ波及Ⅰ～Ⅴ波峰间或异常，异常BAEP发生率，与正常对照组比较有显著性差异，且随着患儿胆红素浓度的升高,异常BAEP发生率逐渐增加。本文结果表明，BAEP检测是早期发现无症状性胆红素脑病的一种有效方法，并可随访预后．     

儿童社区获得性肺炎不同临床类型外周血β-防御素1水平的表达

目的研究儿童社区获得性肺炎(CAP)不同临床类型其外周血中β-防御素1(HBD-1)的表达水平,探讨其临床意义。方法选择2015年2-10月CAP患儿122例。进行年龄、病原学、临床类型分类;设同期对照组52例。所有患者入院后按其临床特点进行相关类型分类,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其血清HBD-1。结果 CAP组HBD-1水平显著高于对照组(P?0.05);CAP组中不同病原体、不同性别之间HBD-1水平无显著差异;重度肺炎和轻度肺炎HBD-1水平比较无差异;CAP组中6~12月龄患儿HBD-1水平显著高于其他年龄组;CAP组HBD-1水平与C反应蛋白及中性粒细胞无明显相关性。结论 HBD-1除了作为机体固有免疫的一部分参与到抗感染过程,而且在获得性免疫方面亦可发挥重要的作用;HBD-1对各类病原体呈现出非特异性的、广谱的抗感染免疫功能。     

病毒性脑炎恢复期头痛原因探讨

目的探讨病毒性脑炎恢复期头痛原因。方法做脑血流图检查、测血压、复查脑电图(必要时做头颅CT检查)、五官科检查。结果①186例病毒性脑炎患儿恢复期有头痛表现者53例(28.5%)。②53例中,腰穿后低压性头痛3例,眼睛屈光不正引起者1例,慢性鼻炎、鼻窦炎3例,病因不明2例,脑血管痉挛44例。③脑血管痉挛44例中,中度以上痉挛16例(36.36%),轻度痉挛19例(43.18%),痉挛趋势9例(20.46%)。结论脑血管痉挛是病毒性脑炎恢复期头痛的主要因素,尼莫地平治疗有效。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌小鼠全身感染模型的建立与评价

目的建立稳定、可靠的MRSA全身感染小鼠模型,为MRSA疫苗的研发提供参考依据,并对系统研究MRSA感染的发病机制及其防治策略奠定实验基础。方法在采用国际标准株MRSA-252建立OD₆₀₀-CFU标准曲线的基础上,经尾静脉注射途径感染BALB/c小鼠,从感染剂量的选择、小鼠的生存率和体重变化、血液及多脏器的细菌定植量以及主要组织器官病理学变化等多个层面进行时相性监测,对建立的小鼠模型进行系统评价。结果经此途径建立的小鼠模型,致死剂量为每只5.0×10⁹ CFU,亚致死剂量为每只1.0×10⁹ CFU(生存率为60%~70%)。感染后小鼠生存率下降;体重下降;血液及肝脏、脾脏和肾脏均有细菌定植,定植量在感染后第3天达到高峰;心、肝、肺和肾等主要脏器中有较明显的细胞坏死和炎性细胞浸润。结论小鼠模型的建立,将为进一步研究 MRSA疫苗的有效性和安全性评价等提供可靠的技术手段。     

幽门螺杆菌对天然植物成分诱导耐药反应的实验研究

目的探讨幽门螺杆菌（HP）是否会对乳香胶、大蒜油和黄连提取物产生耐药。方法采用多步诱导法进行HP的体外耐药试验，另选临床耐药率很高的甲硝唑和目前抗HP疗效好的克拉霉素作同步试验；观察在药物浓度逐渐增加的培养基上转种的HP最低抑菌浓度（MIC）的变化，将敏感性下降的诱导株在无药培养基上转种3次后检测MIC值，测定乳香胶、大蒜油和黄连提取物对甲硝唑敏感性下降诱导株的MIC值。结果在多步诱导培养过程中，未诱导出对乳香胶、大蒜油和黄连提取物耐药的HP菌株，而在含64倍MIC甲硝唑的培养基上菌株仍能生长。在培养过程中，菌株对甲硝畦的敏感性逐渐下降，MIC值逐渐升高至64μg／mL；甲硝唑耐药株（MR）在无药培养基上转种10次后得到的MR’的MIC值不变。乳香胶、大蒜油和黄连提取物对MR的MIC没有影响。结论HP对乳香胶、大蒜油和黄连提取物不易产生耐药性，且甲硝唑耐药株对三者仍保持敏感。乳香胶、大蒜油和黄连提取物是有良好开发前景的抗HP感染的天然药物。     

幽门螺杆菌感染小鼠及其抗原免疫小鼠后体液免疫应答的比较

目的：比较BALB／c小鼠感染H.pylori后以及经H.pylori UreB抗原口服免疫后的体液免疫应答的差异。方法：80只BALB／c小鼠分为感染组和免疫组，感染组灌喂H.pylori小鼠适应株；免疫组灌喂重组H.pylori UreB抗原和佐剂LTB。在试验的0，2，6和10周时每组分别取10只小鼠收集唾液及血液标本，用ELISA法检测抗UreBIgG和IgA抗体，同时采集胃组织作H.pylori感染检测。结果：感染组小鼠在灌喂H.pylori后2，6，10周，感染率均为100％，其血清中抗UreB IgG增高明显，但血清及唾液中均未见IgA的明显升高，；免疫组小鼠在初次免疫后第6，10周后，血清及唾液中抗UreB,IgG和IgA抗体的均显著升高。结论：H.yplori感染BALB／ c小鼠不能诱导其产生明显的特异性黏膜免疫应答，而重组UreB可作为良好的免疫原诱导其产生分泌型IgA抗体。     

大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的分泌表达与性质鉴定

目的 较高效率分泌表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位并鉴定其性质。方法 将编码成熟大肠杆菌不耐热肠毒素(LTB)的基因引入pET22b( )并转化E．coli BL21(DE3)；重组工程菌在改良M9-CAA培养基内进行表达；对分泌表达的LTB进行纯化后进行神经节苷脂(GMl)结合活性、免疫原性与黏膜免疫佐剂活性的鉴定。结果 LTB既能分泌表达至胞周质又能以包含体形式表达，两者都与pelB信号肽准确分离。纯化出的LTB具有正常的GM1结合活性、免疫原性及黏膜免疫佐剂活性。结论 pET22b( )质粒的pelB信号肽可使LTB以较高效率分泌表达。