单倍体相合骨髓和外周血干细胞联合移植治疗慢性粒细胞性白血病一例

造血干细胞移植是目前唯一能够根治慢性粒细胞性白血病的方法,而造血干细胞的来源主要依靠HLA完全相合的同胞供者,部分来源于造血干细胞库.前者,在同胞中完全相合的可能性只有25%,加上目前国家人口政策,使得找到HLA完全相合的机会越来越少;后者因为查找困难、找到HLA完全相合的概率较小、移植风险也比较大,在一定程度上限制了它的应用.本文采用GIAC方案[1]成功地对1例慢性粒细胞性白血病患者进行了母供子HLA单倍体相合造血干细胞移植,报告如下.     

新免疫标志组合在多参数流式细胞术检测多发性骨髓瘤微小残留病中的应用

目的多参数流式细胞术（multiparameter flow cytometry, MFC）检测多发性骨髓瘤（multiple myeloma, MM）微小残留病(minimal residual disease, MRD)细胞和非MM浆细胞两者免疫标志表达的区别。方法2012年4月至2020年4月淮安市第一人民医院和上海健康医学院附属周浦医院收治的44例具有MRD的MM患者和43例非MM患者分别为研究组和对照组,应用10色流式细胞仪检测浆细胞CD45、CD19、CD56、CD28、CD117、CD20以及CD44、CD49d和CD184表达情况。结果与非MM浆细胞高表达不同,MM的MRD细胞中CD44为低表达,两类细胞的表达差异有统计学意义（P=0.007）,CD44可能是MM检测MRD免疫标志之一;CD49d和CD184广泛存在于MM的MRD细胞和非MM浆细胞中,但缺乏特异性,不能作为MM特异性免疫标志;利用CD45、CD19、CD56、CD28、CD117、CD20和CD44的界值判断免疫标志的异常个数,MM的MRD细胞中位异常免疫标志数为4(2~6)个,而非MM浆细胞为0(0~2)个。结论通过MFC检测新的免疫标志组合CD45、CD19、CD56、CD28、CD117、CD20和CD44可以有效的鉴别出MM的MRD细胞。     

吲哚美辛诱导的HL-60白血病细胞凋亡与JNK信号转导途径活化

目的：观察吲哚美辛对HL-60白血病细胞增殖的抑制作用及细胞凋亡的诱导作用，了解c-Jun N-末端激酶(JNK)信号转导途径在介导吲哚美辛诱导的HL-60细胞凋亡中的活化状态，揭示吲哚美辛诱导HL-60细胞凋亡的分子机制。方法：以台盼蓝染色检测药物干预后的HL-60细胞活力；分析HL-60细胞的增殖能力；DNA梯状胶电泳及吖啶橙／溴化乙锭染色形态学分析鉴定细胞凋亡；Western印迹检测凋亡信号蛋白caspase-9，-3和PARP的裂解激活以及JNK信号途径蛋白质MEK4，JNK，P-JNK，P-C-Jun的表达及活化状态。结果：200～400txmol的吲哚美辛能够显著抑制HL-60细胞增殖和诱导HL-60白血病细胞凋亡，并呈浓度和时间依赖性；HL-60细胞凋亡伴有easpase-9，3和PARP的表达上调及裂解激活；MEK4蛋白表达呈浓度依赖性上调；磷酸化JNK和磷酸化C-Jun呈浓度依赖性上调。结论：吲哚美辛可抑制HL-60细胞增殖和诱导细胞凋亡；JNK信号途径活化介导了吲哚美辛诱导的凋亡。JNK途径的活化导致了下游caspase途径的活化。     

塞来昔布联合干扰素α对K562细胞增殖、凋亡、细胞周期和CD117表达的影响

本研究探讨塞来昔布(Celecoxib)对K562细胞增殖、凋亡、细胞周期和CD117表达的影响及其与干扰素α(IFN-α)联用的协同作用。通过以不同浓度组合的Celecoxib和IFN-α作用于培养的K562细胞,用MTT比色法观察各组的细胞生长抑制情况,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和CD117膜抗原表达情况。结果显示:Cele-coxib可明显抑制K562细胞增殖,抑制效应呈浓度依赖性(r=-0.91)。K562细胞培养72小时后,空白对照组、IFN-α组、Celecoxib组和Celecoxib联合IFN-α组的细胞增殖率分别为(96.1±0.5)%、(90.2±0.4)%、(57.2±0.9)%和(21.9±0.3)%;细胞凋亡率分别为(5.5±0.8)%、(6.3±0.6)%、(26.4%±3.9)%和(57.3±4.5)%;K562细胞膜CD117表达率分别为54.7%、10.5%、36.3%和7.3%。两药联用还可使K562细胞阻滞于G0/G1期。结论:Celecoxib和IFN-α不同程度地抑制K562细胞增殖和诱导细胞凋亡、产生G0/G1期阻滞和降低CD117表达,两药联用对上述效应具有协同作用。     

部分脾栓塞治疗难治性原发性血小板减少性紫癜的疗效观察

【目的】探讨部分脾栓塞在治疗难治性原发性血小板减少性此癜（ITP）的临床疗效和应用。【方法】对9例难治性ITP患者进行部分脾栓塞治疗,其中3例短期有效而又复发者进行脾切除治疗,观察和随访其临床疗效。【结果】9例病人中有8例（包括脾切除术3例）完全缓解,缓解率达88．9％,1例无效。其中随访2年以上4例．1年以上2例,半年以上2例,均无复发。【结论】部分脾栓塞保留了脾脏的免疫功能,并发症少,临床疗效满意,是治疗难治性ITP安全可靠的方法,亦可作为脾切除治疗难治性ITP的一个手术指标。     

Celecoxib对羟基脲抗K562细胞增殖作用的增敏效应和机制

目的：确定celecoxib对羟基脲的抗K562细胞增殖作用是否存在增敏效应并探讨其分子机制。方法：用低剂量celecoxib(40 μmol/L)、羟基脲(10 mmol/L)以及二者合用分别干预K562细胞,用MTT试验、DNA裂解片段分析、Western印迹及RT PCR技术分析药物对K562细胞增殖、凋亡的影响和机制。结果：40 μmol/L celecoxib与10 mmol/L羟基脲共同干预K562细胞,较之单用低剂量的Celecoxib或羟基脲抑制K562细胞增殖活力和诱导细胞凋亡效应更明显。Celecoxib联合羟基脲可明显抑制K562细胞环氧化酶 2（COX 2）蛋白和 mRNA表达。结论：Celecoxib对羟基脲的抗K562细胞增殖作用具有增敏效应,其机制可能与药物下调K562细胞COX 2表达有关。     

糖皮质激素在慢性免疫性血小板减少症治疗中作用机制及耐药性机制的研究进展

免疫性血小板减少症(ITP)是以骨髓细胞发育成熟障碍、抗血小板自身抗体出现等为特征的器官特异性自身免疫紊乱性疾病.糖皮质激素作为ITP的一线治疗药物,可使80％～90％ ITP患者的出血症状得到控制,但仍有20％～30％患者对糖皮质激素疗效欠佳或发生耐药.糖皮质激素可抑制浆细胞样树突状细胞(DC)成熟、减少髓样DC数量和使髓样DC功能失调而抑制其介导的效应T细胞(Teff)功能,减少血小板自身抗体的产生.大剂量地塞米松可影响白细胞介素(IL)-18和其内源性拮抗物IL-18相关蛋白等平衡,减弱IL-18对γ干扰素的诱导作用,发挥免疫抑制作用.而糖皮质激素耐药可能与糖皮质激素受体(GR)α表达下降、GRβ表达亢进,核因子-κB表达减少,干扰核因子-κB等介导的下游信号传导有关.作为编码GR基因,NR3C1基因与糖皮质激素耐药关系有待进一步研究证实,而其他编码基因的异常可能与糖皮质激素耐药相关.     

吲哚美辛诱导的HL-60白血病细胞凋亡与JNK信号转导途径活化

目的 :观察吲哚美辛对HL 6 0白血病细胞增殖的抑制作用及细胞凋亡的诱导作用 ,了解C JunN 末端激酶 (JNK)信号转导途径在介导吲哚美辛诱导的HL 6 0细胞凋亡中的活化状态 ,揭示吲哚美辛诱导HL 6 0细胞凋亡的分子机制。方法 :以台盼蓝染色检测药物干预后的HL 6 0细胞活力 ;分析HL 6 0细胞的增殖能力 ;DNA梯状胶电泳及吖啶橙 /溴化乙锭染色形态学分析鉴定细胞凋亡 ;Western印迹检测凋亡信号蛋白caspase 9, 3和PARP的裂解激活以及JNK信号途径蛋白质MEK4 ,JNK ,P JNK ,P C Jun的表达及活化状态。结果 :2 0 0～ 4 0 0 μmol的吲哚美辛能够显著抑制HL 6 0细胞增殖和诱导HL 6 0白血病细胞凋亡 ,并呈浓度和时间依赖性 ;HL 6 0细胞凋亡伴有caspase 9,3和PARP的表达上调及裂解激活 ;MEK4蛋白表达呈浓度依赖性上调 ;磷酸化JNK和磷酸化C Jun呈浓度依赖性上调。结论 :吲哚美辛可抑制HL 6 0细胞增殖和诱导细胞凋亡 ;JNK信号途径活化介导了吲哚美辛诱导的凋亡。JNK途径的活化导致了下游caspase途径的活化。     

粒细胞肉瘤2例报告分析

目的探讨粒细胞肉瘤（GS）的临床特点、诊断、鉴别诊断和治疗策略。方法报告我院近期收治的2例粒细胞肉瘤并复习相关文献。结果2例均以浅表淋巴结肿大为首发症状，病理标本的免疫组化MPO、CD43均阳性，按急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）化疗，均效果良好。结论粒细胞肉瘤初诊时易误诊为恶性-淋巴瘤，免疫组化对诊断有意义，早期确诊和早期采用治疗ANLL方案全身化疗，对减少GS向ANLL转化并延长生存期是有帮助的。     

急性早幼粒细胞白血病缓解期并发粒细胞肉瘤一例并文献复习

目的 提高对急性早幼粒细胞白血病（APL）缓解期并发粒细胞肉瘤（GS）的认识.方法 对1例APL缓解期并发GS患者的临床资料进行分析,结合文献进行讨论.结果 患者肿块行病理检查示：淋巴造血系恶性肿瘤;免疫组织化学示：MPO＋＋＋,末端脱氧核苷酸载移酶（TDT）＋＋,CD117＋,Ki-67＋,CD34-,CD20-,CD3-;荧光原位杂交（FISH）检测PML-RARα融合基因阳性,予以维甲酸及亚砷酸联合治疗后肿块消失.结论 APL缓解期出现肿块的患者应警惕GS的可能,必要时需行肿块病理、免疫组织化学或FISH检测,以避免因检查不足而延误诊断及治疗.