hsa-miR-223表达载体构建及其对靶基因ARTN的调控

目的：构建hsa-miR-223真核表达载体, 并在人食管癌细胞KYSE-150中验证hsa-miR-223对靶基因artemin （ARTN）的调控作用。方法： 以基因组DNA为模板, RT-PCR扩增包括hsa-miR-223前体序列在内的基因序列, 并将其克隆到载体pCD?NA3.1 （+） 上, 通过实时定量PCR方法检测hsa-miR-223在人胚肾HEK293细胞中的表达。根据生物信息学预测软件TargetScan、mirBase和PicTar对hsa-miR-223靶基因进行预测, 将靶基因ARTN的3'UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游, 通过双荧光素酶报告基因检测hsa-miR-223对靶基因ARTN的3'UTR区的调控作用。将pCDNA3.1-miR-223表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150, 通过Western blot检测对ARTN蛋白表达的影响。结果： 成功构建hsa-miR-223表达载体pCDNA3.1-miR-223。实时定量 PCR 验证表明 pCDNA3.1-miR-223 在人胚肾 HEK293 中能够明显地过表达成熟 miR-223。生物信息学预测 ARTN 是hsa-miR-223的靶基因, 并构建融合ARTN的3'UTR区表达质粒pMIR-ARTN, 在此基础上对ARTN的3'UTR “种子区” 进行定点突变。双荧光素酶报告基因分析表明hsa-miR-223能够作用于ARTN的3'UTR。Western blot法进一步证实ARTN是miR-223的靶基因。结论： hsa-miR-223作用于ARTN的3'UTR可在转录后水平上调控ARTN蛋白的表达。     

has-miR-223表达载体构建及其对靶基因ARTN的调控

目的:构建hsa-miR-223真核表达载体,并在人食管癌细胞KYSE-150中验证hsa-miR-223对靶基因artemin(ARTN)的调控作用.方法:以基因组DNA为模板,RT-PCR扩增包括hsa-miR-223前体序列在内的基因序列,并将其克隆到载体pCD?NA3.1(+)上,通过实时定量PCR方法检测hsa-miR-223在人胚肾HEK293细胞中的表达.根据生物信息学预测软件TargetScan、mirBase和PicTar对hsa-miR-223靶基因进行预测,将靶基因ARTN的3'UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基因检测hsa-miR-223 对靶基因ARTN 的3'UTR 区的调控作用.将pCDNA3.1-miR-223 表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150,通过Western blot检测对ARTN蛋白表达的影响.结果:成功构建hsa-miR-223表达载体pCDNA3.1-miR-223.实时定量PCR 验证表明pCDNA3.1-miR-223 在人胚肾HEK293 中能够明显地过表达成熟miR-223.生物信息学预测ARTN 是hsa-miR-223的靶基因,并构建融合ARTN的3'UTR区表达质粒pMIR-ARTN,在此基础上对ARTN的3'UTR"种子区"进行定点突变.双荧光素酶报告基因分析表明hsa-miR-223能够作用于ARTN的3'UTR.Western blot法进一步证实ARTN是miR-223的靶基因.结论:hsa-miR-223作用于ARTN的3'UTR可在转录后水平上调控ARTN蛋白的表达.     

高血压脑出血术后形成穿通性脑积水的治疗

位于内囊附近的高血压脑出血，尤其是破入脑室者，经过外科手术清除血肿后极易形成脑室－血肿腔部位的交通性积水，我院共治疗１２例此类病人，通过反复腰穿和脑室腹腔分流术均获得治愈。     

颅内良性脑膜瘤全切除术后的复发问题

据文献报道颅内良性脑膜瘤全切除术后的复发率约为9％～22％。近年，国外学者注重观察了肿瘤的病理形态学特点与复发的关系，而国内迄今尚无这方面的报道。本文分析我科收治的14例颅内良性脑膜瘤全切除术后的复发原因并提出防治意见。     

垂体Rathke囊肿22例手术分析

目的探讨垂体Rathke囊肿的诊断与治疗。方法对22例主要表现为头痛、视力损害和全垂体功能低下,MR及CT检查诊断为垂体Rathke囊肿的患者采用手术清除囊肿,其中20例采用经窦入路,2例采用经翼点入路。结果术后头痛均缓解,88%视力损害明显恢复,80%全垂体功能低下明显恢复,1例好转。结论尽管垂体Rathke囊肿的临床及影像学表现呈多样性但某些临床及影像学特征有助于本病的诊断。经蝶窦显微手术清除囊肿是治疗垂体Rathke囊肿的有效方法。     

高血压脑出血手术治疗临床分析

近年来,对高血压性脑出血的治疗有倾向于手术治疗的趋势,但手术治疗死亡率仍较高(20%～65%)。我院于1998-2004年对213例高血压性脑出血患施行了手术治疗,手术死亡率为19．2％。现着重手术治疗进行探讨。     

脑脓肿锥颅穿刺引流治疗脑脓肿22例疗效分析

2000年以来我科用锥颅穿刺抽脓引流治疗脑脓肿22例，疗效满意。现报道如下。     

急性颅脑损伤致多器官功能衰竭

急性颅脑损伤（Ⅱ级以上）易致多器官功能衰竭（MSOF），预后极差。现将我院近年来救治的急性颅脑损伤致MSOF68例报告如下。1临床资料1．1一般资料：男37例；女对例；年龄6－71岁。类型：均为五级以上；均为闭合性颅脑损伤。意识状态按GLS评分分为以下类型：3分13例；5分15例；6分14例；7分11例；8分15例。亚．2合并伤：合并其它部位骨折23冽，均无苦脏器合并伤。1．3CT所见：均有不同程度、不同部位脑控裂伤。其中硬膜外血肿29例，占42．6％；硬膜下血肿31例，占45．6％；脑内血肿8例，占11．8％。出血量在IO—70ml之间。2治疗方法及…     

12例垂体瘤术后水电解质紊乱临床分析

垂体瘤是颅内的常见肿瘤,手术治疗是主要治疗方法。水电解质紊乱是手术后的常见并发症。如不及时发现和纠正,常导致严重后果甚至死亡。本文就2001年7月～2009年7月在我院进行的垂体瘤手术的32例患者,其中术后发生水钠紊乱12例。我们对其临床特点及其治疗进行总结如下。     

垂体Rathke囊肿的诊断和治疗

目的探讨垂体Rathke囊肿的诊断与治疗。方法对20例主要表现为头痛、视力损害和全垂体功能低下,MR及CT检查诊断为垂体Rathke囊肿的患者采用手术清除囊肿,其中18例采用经窦入路,2例采用经翼点入路。结果术后头痛均缓解,88%视力损害明显恢复,80%全垂体功能低下明显恢复,1例好转。结论尽管垂体Rathke囊肿的临床及影像学表现呈多样性但某些临床及影像学特征有助于本病的诊断。经蝶窦显微手术清除囊肿是治疗垂体Rathke囊肿的有效方法。