次声作用下大鼠脑皮质内mGluR5 mRNA表达的变化及其意义

目的：探讨8Hz、120dB次声作用后大鼠脑皮质内代谢性谷氨酸受体5亚型（mGluR5)mRNA表达的变化及意义。方法：SD大鼠60只被随机分为对照组及次声作用1、7、14次组和次声作用组，采用自制的次声压力舱用8Hz、120dB的次声按规定次数，每次作用2小时。利用地高辛标记寡聚核苷酸探针原位杂交技术与计算机图像分析系统，在光镜与透射电镜下观察mGluR5分别在额、顶、颞及枕皮质1区阳性神经元表达的改变，以及相应皮质的病理变化。结果：次声作用1次组，额、顶、颞、枕脑皮质内mGluR5 mRNA阳性神经元表达减少，次声作用7次组脑皮质内mGluRt mRNA阳性神经元表达数减少至谷底与对照组和次声作用1次组比较P均＜0．01，次声作用14次组脑皮质内mGluR5 mRNA阳性神经元表达数基本恢复到正常水平；阳性神经元在脑皮质浅层散在分布，mGluR5 mRNA在胞浆和胞核内均匀地呈颗粒状表达。结论：次声脑损伤可抑制mGluR5的表达和生成，其作用可能与mGluR1α不同，参与机体对次声脑损伤的保护。     

胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库的构建

目的 构建胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库。方法 从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞（PBL）中提取细胞总RNA,经逆转录后用套式多聚酶链反应（PCR）分别扩增抗体轻链VK和重链VH基因。先构建VK基因库,并使linker与VK基因连接,再将VH基因克隆人VK基因库,即构建成功单链抗体（ScFv）基因库。随机挑取菌落鉴定后测序。结果 从PBL中扩增出人源性VK和VH基因,并构建了库容量约为2×106的ScFv噬菌体抗体基因库。随机挑取克隆的测序结果表明,测定的VH基因与Kabat的抗体基因库中人抗体VH基因有较高的同源性,证明所克隆的基因属于人抗体可变区基因。结论 本实验构建成胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库,为进一步筛选入源性抗脑胶质瘤抗体奠定了基础。     

甲紫糊退色原因的探讨及疗效观察

甲紫在临床上用于外搽消毒杀菌,我们配制了各种不同的浓度及剂型,如甲紫糊,甲紫霜等。在临床应用的过程中,发现糊剂逐渐退色,初配呈紫兰色,放置不久即慢慢变兰色,以后退成灰兰色,最后全部退成无色,呈现原来氧化锌糊的颜色,基于这个原因,我们改配成霜剂,效果较好。     

二次脑损伤大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体1α的改变

目的研究二次脑损伤(SBI)大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体1α (mGluR1α)的变化及意义. 方法 SD大鼠90只,随机分为假手术对照、单纯脑损伤、脑损伤合并SBI 3组. 在Marmarou大鼠加速性弥漫性脑损伤模型基础上,以抽血造成低血压为SBI指标. 在伤后不同时间进行免疫组化和病理学研究. 结果与假手术对照相比,单纯脑损伤组脑皮层mGluR1α阳性神经元在伤后1 h表达明显增加, 为13.9±3.2(P<0.05),24 h达到15.3±3.7的峰值(P<0.01);脑损伤合并SBI组mGluR1α阳性神经元表达在伤后0.5 h即明显增加:13.5±3.8(P<0.05),伤后6 h达高峰:15.6±3.7(P<0.01). 结论在弥漫性脑损伤发生、发展过程中, mGluR1α改变可能是导致脑损害加重的因素之一, 合并SBI组脑皮层mGluR1α阳性神经元表达的增强和高峰的提前提示mGluR1α参与缺血过程.     

反义VEGF165真核表达载体的构建和表达

目的 进行抗血管生成治疗人脑胶质瘤实验,构建和鉴定携带人反义VEGF165基因的真核表达载体。方法 将VEGF165cDNA反向克隆入pcDNA3,构建CMV启动子控制的真核表达载体pcDNA-AVEGF165,用酶切鉴定结果;应用该载体转染人脑胶质瘤细胞SHG44,G418筛选阳性克隆;Western blot和免疫组化检测转染前、后瘤细胞的VEGF表达。检测转染前、后瘤细胞的生物学性状。结果 获得反向构建的pcDNA-AVECF165真核表达载体,VEGF165反义RNA阻断了SHG44细胞的VEGF表达,该细胞生物学性状不受外源基因的表达影响。结论 成功构建的反义VEGF165真核表达载体,为人脑胶质瘤的反义基因治疗提供了必要的条件。     

手术学教学中技术人员的工作

手术学无论是单独教学或与局解合并教学,对技术人员的工作要求均略同。多有认为手术学教学是教员的工作,技术人员无关紧要,其实不然。手术学与其它课程的主要不同处在于实习课的比重大,需要的人力、物力相对来说特别多。因此,技术人员的工作处于举足轻重的位置,左右着教学质量。可能有的院校在手术学教学中存在着技术人员少或不固定、教学经费不足等问题。在这     

二次脑损伤神经细胞内游离Ca2+、脑组织丙二醛与血液流变性的改变

目的 :探讨脑弥漫性轴索损伤 (DAI)及合并二次脑损伤 (SBI)的发生机制。方法 :12 0只大鼠随机分为正常对照、单纯 DAI及合并 SBI(低血压与高热 )组 ,于伤后 0 .5、3、12、2 4和 72小时检测神经细胞内游离 Ca2 、自由基和血液流变学指标。结果 :DAI后神经细胞内游离 Ca2 超载明显 ,0 .5小时即有表达 ,12小时达高峰 ,持续至 2 4小时 ;在伤后同一时间点 ,与单纯 DAI组比较 ,DAI合并 SBI组 Ca2 含量明显增加 (P<0 .0 5 )。 DAI后自由基与血液粘滞性指标在伤后 3小时开始增高 ,2 4小时达高峰 ,72小时开始下降 ;与单纯 DAI组比较 ,DAI合并 SBI组丙二醛 (MDA)和血液粘滞性指标均明显高于相应时间点单纯 DAI组 ;脑组织中 MDA含量与全血粘度、血细胞比容、红细胞聚集指数呈正相关 ,组织病理学改变 SBI较单纯 DAI重。结论 :神经细胞 Ca2 超载是DAI及 SBI发生机制的关键 ,自由基和血液流变学特性改变也起重要作用。     

P16与P53蛋白在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨P16与P53蛋白在人脑胶质瘤中的表达及与病理分级的关系。方法:采用免疫组化方法检测52例胶质瘤手术标本及2株人脑胶质瘤细胞系中P16与P53蛋白的表达状况,并分析其与该类肿瘤病理级别的关系。结果:随胶质瘤病理级别的升高P16蛋白的表达率逐渐降低,Ⅰ～Ⅳ级阳性率分别为75.0％、64.7％、42.8％和33.3％,低度恶性组(Ⅰ～Ⅱ级)与高度恶性组(Ⅲ～Ⅳ级)间有显著差异(P<0.05)。P53蛋白表达率随胶质瘤病理级别的升高有上升趋势。结论:P16及P53基因表达在胶质瘤恶性演变中有重要意义。     

人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库的构建

为构建人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库 ,从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞 (PBL)中提取细胞总RNA ,经逆转录后用套式PCR分别扩增抗体轻链Vκ和重链VH基因。先构建Vκ基因库 ,并使连接Vκ和VH基因的linker与Vκ基因连接 ,再将VH基因克隆入Vκ基因库 ,即构建成功单链抗体 (ScFv)库。随机挑取菌落鉴定 ,测序表明从PBL中扩增出人源性Vκ和VH基因 ,并构建了库容量约为 2× 10 6的ScFv噬菌体抗体库。随机挑取克隆的测序表明 ,测定的VH基因与Kabat的抗体基因库中人抗体VH基因有较高的同源性 ,证明所克隆的基因属人抗体可变区基因。结果表明实验构建成人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库 ,为进一步筛选人源性抗脑胶质瘤抗体奠定了基础     

弥漫性脑创伤与二次脑损伤发生机制研究

为研究弥漫性脑创伤 (DBI)与二次脑损伤 (SBI)后鼠脑代谢型谷氨酸受体 1a(mGluR1a)、cAMP、cGMP含量变化及I类mGluRs拮抗剂MCPG的治疗作用 ,将大鼠随机分为假手术对照、单纯DBI、脑损伤合并SBI及MCPG作用组。脑损伤后 ,以低血压作为SBI指标 ,于伤后不同时间进行免疫组化和放射免疫研究。结果发现 ,与对照组比较 ,单纯DBI组脑皮层mGluR1a阳性神经元表达在伤后 1h增加 ,2 4h达高峰 (P <0 .0 1) ,伤后2 4hcAMP水平下降 ,cGMP升高 ,cAMP/cGMP比值下降 ;合并SBI组 ,mGluR1a阳性神经元表达在伤后 0 5h即明显增加 ,6h达高峰 (P <0 0 1) ,cAMP改变也更加明显 ;MCPG可减少SBI后损伤神经元的数目。提示mGluR1a参与了细胞兴奋性毒性和代谢应急 ,是加重脑损害的关键因素。