基质分散固相萃取联合在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱法测定湖南省市售茶叶中9,10-蒽醌的含量

目的 建立基质分散固相萃取(quick,easy,cheap,effective,rugged and safe,QuEChERS)联合在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱(gel permeation chromatography- gas chromatography-mass/mass spectrometry, GPC-GC-MS/MS)测定茶叶中9,10-蒽醌含量的快速检测方法,并对湖南省内市售茶叶进行9,10-蒽醌残留量检测和结果分析。 方法 茶叶中的9,10-蒽醌以1:1环己烷-乙酸乙酯提取后,经QuEChERS方法净化,进GPC-GC-MS/MS联用仪分析检测,以同位素d8-蒽醌内标法定量。 结果 茶叶中的9,10-蒽醌在1~100 μg/L浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=0.0311x-0.0023,相关系数r=0.9997,方法的检出限为2 μg/kg,检测限为5 μg/kg;加标回收率为75.8%～98.4%,相对标准偏差2.6%～6.6%(n=6)。对湖南省14个地州市市售茶叶进行检测,发现存在一定程度的9,10-蒽醌污染,且超标率较高。其中,黑茶和红茶的检测结果中位数为35.1 μg/kg和25.9 μg/kg,污染程度明显高于乌龙茶和绿茶。 结论 该方法具有仪器自动化程度高,前处理快速简单,溶剂消耗少,灵敏度高,定性定量准确等特点,适合大批量茶叶样品中9,10-蒽醌的快速筛查检测。     

siRNA沉默Akt1基因的表达及其对脐静脉内皮细胞增殖的抑制作用

目的筛选Akt1基因特异性小干扰RNA（small interference RNA,siRNA）,观察siRNA对血管内皮细胞Akt1基因表达及增殖的影响。方法人脐静脉内皮细胞（human umbilical veins endothelial cells,HUVECs）为靶细胞,设计、筛选和合成3对针对Akt1基因mRNA的siRNA（Akt1siRNA-1、Akt1siRNA-2和Akt1siRNA-3）,利用阳离子脂质体介导转染HUVECs。分3组：仅加脂质体（Lip组）;加ScramblesiRNA组（Scr组）．力口Akt1siRNA组（Akt1组）。采用半定量RT_PCR技术检测Akt1mRNA和Akt2mRNA的表达,用westernblot技术检测Akt总蛋白表达。用。H—TdR掺人实验和流式细胞仪检测HUVECs的DNA合成和增殖指数。结果筛选出的Akt1siRNA-1转染后24h细胞Akt1rnRNA表达水平明显下调（分别与Lip组、Scr组相比,均为P〈0．01）,且对Akt2表达没有影响。Akt1siRNA-1转染后48h,明显抑制了总Akt蛋白的表达（分别与Lip组、Scr组相比,均为P％0．05）。转染Akt1siRNA-1组。H—TdR掺入量和增殖指数显著降低（分别与Lip组、Scr组相比,均为P〈0．01）。结论特异性siRNA能够有效的抑制Akt1基因的表达,并明显抑制血管内皮细胞的增殖。     

弗氏完全佐剂致大鼠急性膝关节炎动物模型制备

目的 复制符合临床急性膝关节炎病理生理特征的实验性大鼠急性膝关节炎动物模型。 方法 30只大鼠随机分为对照组、醋酸组、佐剂组,分别于第1、3、7天经右膝关节腔内注射生理盐水、醋酸及弗氏完全佐剂0.5ml/d,并于造模前、造模后7、14天分别采用ELISA法测定膝关节腔积液中白细胞介素-1β(IL-1β)、透明质酸(HA)含量;测量右膝关节及以下部位的体积,并计算各组动物膝关节肿胀百分率。于14天处死动物取膝关节滑膜组织做病理学镜检。 结果 造模后对照组关节无肿胀现象,醋酸组大鼠右膝关节及其周围肿胀,舔足跛行,模型成功率为80%;佐剂组僵硬肿胀等症状更加明显,模型成功率达100%,肿胀百分率明显高于醋酸组,造模第7、14天关节积液检查显示IL-1β明显升高,HA含量降低,与造模前及对照组、醋酸组比较,差异有统计学意义(P结论 弗氏完全佐剂可成功建立大鼠急性膝关节炎动物模型且优于醋酸法,更符合临床急性膝关节炎病理生理特征。     

结核瘤CT增强扫描的征象探讨

对肺内结节性质的判定一直是影像诊断学的难点和重点,随着CT、MRI的广泛应用,有关肺结核瘤的分叶征、毛刺、钙化等特征已有很多文献报道,本文着重总结肺结核瘤行CT增强扫描的强化特征,并注意其与恶性结节和其他良性结节的鉴别。     

经纤维支气管镜肺活检失败后超声、CT引导下经皮穿刺肺活检的临床分析

目的比较经纤维支气管镜肺活检失败后超声与CT引导下经皮穿刺肺活检诊断肺部肿块的正确率、安全性及可操作性。方法选择肺部占位性病变患者共382例，经纤维支气管镜肺活检诊断明确154例，余228例分为2组，进一步行经皮穿刺肺活检。其中超声引导组125例（病灶贴近胸膜且与胸壁之间无肺组织），CT引导组103例（病灶位于肺内、超声不能探及）。比较其正确率、安全性及可操作性。结果经纤维支气管镜肺活检和超声、CT引导下经皮穿刺肺活检诊断肺部肿块正确率分别为40-3％、89．6％、90．3％。并发症：超声、CT引导下经皮穿刺肺活检痰中带血发生率分别为8．0％、8．7％；CT引导组气胸发生率为24.3％，B超引导组未发生气胸。结论对于贴近胸膜且与胸壁之间无肺组织的肺部肿块，首选超声引导经皮穿刺肺活检；反之，则选择CT引导经皮穿刺肺活检。     

双水平气道正压通气联合可拉明治疗慢性阻塞性肺疾病合并肺性脑病的临床研究

目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者合并肺性脑病时进行无创双水平气道正压(BiPAP)通气联合可拉明治疗的效果。方法40例COPD合并肺性脑病患者分为BiPAP组和BiPAP联用可拉明组,观察两组的治疗效果。结果两组患者治疗效果存在显著差异,与BiPAP组比较,联用组意识障碍恢复快,有效率高。结论对于COPD合并自主呼吸较稳定的肺性脑病患者,无创BiPAP通气联用可拉明是一种有效的治疗方法。     

电子胸腔镜在不明原因的胸腔积液诊断中的应用

目的探讨局部麻醉下电子胸腔镜检查能否提高胸膜疾病的诊断准确性和患者的顺应性。方法对36例不明原因胸腔积液患者在局部麻醉下进行电子胸腔镜肉眼观察和病理检查,统计诊断准确性、患者的不良反应和顺应性。结果电子胸腔镜下肉眼观:多发、单发结节最为常见(21例),占58.3%,其次为胸膜充血、水肿(8例),占22.2%。病理检查结果:36例患者中胸膜肿瘤为22例(61.2%),胸膜结核7例(19.4%),不明原因1例(2.8%),诊断准确性达97.2%。所有患者术中、术后生命体征均稳定;36例患者中仅6例在壁层胸膜活检时轻度疼痛,术后有4例伤口疼痛,无1例出现严重并发症;所有患者都乐意接受该项检查,97.2%的患者对检查结果满意。结论局部麻醉下电子胸腔镜检查术,操作简单,视野清晰,可以观察整个胸膜腔,也易于取活检,确诊率高,而且费用低,风险小,患者依从性和耐受性好。     

p27kiplcDNA对胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响

目的 观察p27基因表达对胃癌SGC7901细胞端粒酶活性及细胞周期的影响。方法 采用腺病毒介导的方法将p27kiplcDNA导人胃癌SOC7901细胞中，应用TRAP-ELISA法检测细胞端粒酶活性的变化，流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果 转染了p27kiplcNA的细胞端粒酶活性显著下降，G1期细胞比率显著增高，细胞增殖指数显著降低。结论 外源性p27基因的表达可使SGC7901细胞生长停滞于G1期，端粒酶活性下降，Ad-p27kipl对治疗胃癌有潜在意义。     

内皮素受体阻断剂抑制磷酸甘油诱导血管平滑肌细胞钙化木

目的:在离体钙化的血管平滑肌细胞上,观察内皮素受体阻断剂对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响,探讨内皮素(ET)促进细胞钙化的信号转导和分子机制.方法:磷酸甘油制备钙化VSMCs;通过细胞钙含量,[45Ca2 ]摄取,碱性磷酸酶活性测定,判断钙化程度,[3H]-胸腺嘧啶([3H]-TdR)和[3H]-亮氨酸([3H]-Leu)掺人测定细胞DNA合成,竞争性定量RT-PCR测定VSMCs骨桥蛋白(OPN)mRNA水平,放射免疫法测定培养上清ET含量.结果:与正常对照VSMCs相比,钙化VSMCs内钙含量,[45ca2 ]摄入及碱性磷酸酶活性分别增加119％、174％和7倍(P<0.01),OPN表达增加86％;细胞生长活跃,[3H]-TdR和[3H]-Leu分别增加7l％和35％;钙化细胞培养基中内皮素含量较对照组增加35％(P<0.05).而钙化加内皮素受体阻断剂BQl23组明显减轻VSMCs钙化程度,钙含量,[45ca2 ]摄入及碱性磷酸酶活性分别较钙化组降低33％、37％、40％(均P<0.01).OPN表达明显下调25％;细胞增殖活性明显降低.结论:BQl23可减轻VSMCs钙化程度,表明ET促进VsMcs钙化主要是通过内皮素A型受体(ET-A)途经.     

肺癌并发恶性胸腔积液临床治疗体会

目的:探讨肺癌并发恶性胸腔积液的临床治疗效果。方法:本次研究选择我院2006年1月～2010年12月收治的肺癌并发忍性胸腔机液的患者140例,采用胸膜固定术进行治疗同时分析不同药物的临床效果。结果:对5组用药临床效果进行比较,其中DDP组与N-CWS组、PYM组及TNF组比较,疗效显著,差异有统计学意义(P<0.05)。本次研究胸膜固定术采用的5种药物主要以胃肠道反应、发热、胸痛为不良反应,经针对性处理后均缓解,无骨髓抑制发生,无明置心、肾、肝功能损害。其中N-CWS与其它4组发热发生率比较较高,DDP与其它4组发热发生率比较较低.差异均有统计学意义(P<0.05)。胃肠道反应、胸痛等药物副作用5组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:恶性胸腔积液是肺癌患者在晚期常见的临床并发下,治疗方法应以安全有效、经济简单为前提,将药物通过闭式引流胸水后再注入胸膜腔,是目前临床用的治疗方法,临床应依据患者胸水部位、胸水引流方式、全身应用糖皮质激素情况的不同来制定治疗方案,提高患者生命质量。